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虫草素对糖毒性胰腺INS-1E细胞保护作用 被引量:2
1
作者 赵海燕 陈立波 +4 位作者 黎丽萍 黄兴 李静 胡园园 吕术昕 《天津中医药》 CAS 2018年第2期139-142,共4页
[目的]研究虫草素对糖毒性胰腺INS-1E细胞保护作用。[方法]建立胰腺INS-1E细胞糖毒性模型,给予虫草素浓度分别为6.125、12.5、25μmol/L处理,用CCK-8细胞技术试剂盒检测虫草素保护糖毒性胰腺INS-1E细胞存活率,用胰岛素酶联免疫吸附法(EL... [目的]研究虫草素对糖毒性胰腺INS-1E细胞保护作用。[方法]建立胰腺INS-1E细胞糖毒性模型,给予虫草素浓度分别为6.125、12.5、25μmol/L处理,用CCK-8细胞技术试剂盒检测虫草素保护糖毒性胰腺INS-1E细胞存活率,用胰岛素酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测虫草素促进INS-1E细胞胰岛素分泌和合成作用,用蛋白免疫印迹(Western-blot)方法检测虫草素促进INS-1E细胞Akt磷酸化作用。[结果]虫草素能够提高糖毒性胰腺INS-1E细胞存活率,促进胰岛素的分泌和合成,提高蛋白激酶Akt的磷酸化作用。[结论]虫草素能对糖毒性胰腺INS-1E细胞具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 糖毒性 虫草素 AKT 胰腺 2ns-1E
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稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株的筛选与鉴定 被引量:2
2
作者 田泽维 董文其 刘朝霞 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第11期1174-1176,1180,共4页
目的建立稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株。方法将以HBV多表位复合基因取代脊区基因的杂合HBc真核表达质粒转染NS-1细胞,经G418及亚克隆筛选高表达阳性细胞株,并以RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blottin... 目的建立稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株。方法将以HBV多表位复合基因取代脊区基因的杂合HBc真核表达质粒转染NS-1细胞,经G418及亚克隆筛选高表达阳性细胞株,并以RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测、鉴定重组细胞表达产物。结果筛选所得稳定表达细胞株经RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测均呈阳性反应,而阴性对照及空白对照未出现相应阳性反应。结论筛选获得稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组细胞株,命名为NS/HBc-Mep。为建立HBc-Mep特异的cELISA及CTL活性测定等实验方法提供可靠的靶细胞。 展开更多
关键词 重组ns-1细胞株 筛选 鉴定 乙型肝炎病毒核心抗原 多表位复合基因 杂合HBc颗粒
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防止预应力混凝土中高强钢丝腐蚀的缓蚀剂NS-1 被引量:1
3
作者 王昌义 赵翠华 《水运工程》 北大核心 1989年第2期36-40,共5页
本文采用测定极化曲线、电腐蚀等电化学试验方法和盐水浸烘加速腐蚀试验,研究了防止预应力混凝土中高强钢丝腐蚀的缓蚀剂NS-1。研究结果表明,NS-1属阳极型缓蚀剂,其缓蚀效果强于NaNO_2;掺1%NS-1混凝土,28d抗压强度大于不掺混凝土。
关键词 ns-1 极化曲线 高强钢丝 缓蚀效果 电化学试验 加速腐蚀试验 应力腐蚀破裂 电腐蚀 极化电位 缓蚀作用
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SARS病毒NS-1株稳定性及培养条件的研究
4
作者 李萍萍 杨晓明 +3 位作者 方志正 易玲 吴杰 郑新雄 《微生物学免疫学进展》 2005年第1期1-5,共5页
用SARS病毒NS- 1株接种Vero细胞, 37℃培养,于培养 1、2、3、4d收获病毒液,分别置 70℃冻融和 4℃释放,于不同时期取样进行病毒滴定。结果显示, SARS病毒NS 1株各代次培养特性和形态学变化完全相同,有较好的抗原特异性,病毒滴度稳定, 4... 用SARS病毒NS- 1株接种Vero细胞, 37℃培养,于培养 1、2、3、4d收获病毒液,分别置 70℃冻融和 4℃释放,于不同时期取样进行病毒滴定。结果显示, SARS病毒NS 1株各代次培养特性和形态学变化完全相同,有较好的抗原特异性,病毒滴度稳定, 4℃保存 125d,滴度下降 2. 25lgCCID50 /ml,- 70℃保存 6个月,滴度未见明显下降。SARS病毒NS- 1株未经冻融或释放, 1d收获的病毒滴度比 2、3、4d收获的病毒滴度低,经冻融或释放, 1、2、3、4d收获的病毒滴度无明显区别,病毒收获时的病毒滴度与形态学变化成正相关。不同接种条件收获的病毒液,病毒滴度无明显区别。SARSNS -1株有较好的遗传稳定性和保存稳定性,培养 2d, 4℃释放收获病毒液,细胞悬液与病毒混合接种更简单,易操作,更适合疫苗规模生产。 展开更多
关键词 SARS—CoV ns-1 稳定性 培养
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人DR5真核表达载体的构建及稳定转染NS-1细胞系的建立
5
作者 刘峰涛 李淑莲 马远方 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2009年第1期8-10,共3页
目的:构建人死亡受体5(DR5)真核表达载体,转染NS-1细胞,建立稳定转染的NS-1细胞系。方法:采用RT-PCR方法,以人Jurkat细胞cDNA为模板扩增人DR5基因的cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.0,经酶切和测序鉴定... 目的:构建人死亡受体5(DR5)真核表达载体,转染NS-1细胞,建立稳定转染的NS-1细胞系。方法:采用RT-PCR方法,以人Jurkat细胞cDNA为模板扩增人DR5基因的cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.0,经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染NS-1细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的NS-1细胞系,用FACS法检测DR5的表达。结果:成功构建了pcDNA3.0/DR5真核表达载体,并建立了稳定转染的NS-1细胞系,成功地表达目的基因。结论:真核表达载体成功构建和稳定转染NS-1细胞系的建立为进一步进行基因治疗研究奠定良好的实验基础。 展开更多
关键词 真核表达载体 稳定转染的ns-1细胞系 死亡受体5
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SARS病毒NS-1株三级毒种库的建立 被引量:2
6
作者 李萍萍 杨晓明 +6 位作者 张爱华 易玲 刘俊生 吴杰 鲁建忠 郑新雄 方志正 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期227-228,235,共3页
目的建立SARS病毒NS1株三级毒种库。方法SARS病毒NS1株在Vero细胞上传代扩增,并经各项检定合格后,建立SARS病毒NS1株三级毒种库。结果工作种子批病毒滴度均在8.2LgCCID50ml以上;无菌试验、支原体检查均合格;鉴别试验中,经与SARS病人恢... 目的建立SARS病毒NS1株三级毒种库。方法SARS病毒NS1株在Vero细胞上传代扩增,并经各项检定合格后,建立SARS病毒NS1株三级毒种库。结果工作种子批病毒滴度均在8.2LgCCID50ml以上;无菌试验、支原体检查均合格;鉴别试验中,经与SARS病人恢复期高效价血清中和,中和指数均在955以上;外源因子检查中,小鼠和乳鼠存活率均在86%以上;血吸附和非血吸附检查均为阴性;免疫原性检查中,病毒原液和1∶5倍稀释病毒液免疫小鼠,其血清中和效价分别达1∶54和1∶15。结论SARS病毒NS1株各项指标均符合《SARS病毒灭活疫苗临床前研究技术要点》和《中国生物制品规程》2000年版要求,可作为SARS灭活疫苗生产用毒种。 展开更多
关键词 SARS病毒 种库 三级 2000年 病毒滴度 免疫原性 免疫小鼠 生物制品 技术要点 灭活疫苗 疫苗生产 检查 种子批 支原体 中和 恢复期 存活率 合格 试验 血清 效价 吸附 乳鼠 毒液 毒种
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曲霉NS-1产木聚糖酶发酵条件优化
7
作者 刘梦婷 杜娟娟 +2 位作者 周燕 黄佳伟 王鑫 《安徽农业科学》 CAS 2015年第26期6-7,96,共3页
以真菌NS-1为研究对象,采用单因素试验研究碳源、碳源组成、氮源、碳酸钙、表面活性剂及初始p H对产木聚糖酶的影响。结果表明:最佳碳源为玉米芯;复合碳源玉米芯+木聚糖最有利于木聚糖酶的分泌;最佳氮源是硫酸铵;当初始p H为5.0,碳酸钙... 以真菌NS-1为研究对象,采用单因素试验研究碳源、碳源组成、氮源、碳酸钙、表面活性剂及初始p H对产木聚糖酶的影响。结果表明:最佳碳源为玉米芯;复合碳源玉米芯+木聚糖最有利于木聚糖酶的分泌;最佳氮源是硫酸铵;当初始p H为5.0,碳酸钙浓度为1.5%,表面活性剂为SDS时,木聚糖酶活力最高。 展开更多
关键词 曲霉ns-1 木聚糖酶 发酵条件的优化
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Optimization of Fermentation Conditions for Xylanase Production by Aspergillus niger NS-1 被引量:4
8
作者 Mengting LIU Juanjuan DU +2 位作者 Yan ZHOU Jiawei HUANG Xin WANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2016年第1期54-56,共3页
In this study, a xylanase-produeing Aspergillus niger strain, NS-1, was screened and isolated from agricultural and forestry wastes. Based on single-fac- tor experiments, the effects of different carbon sources, compo... In this study, a xylanase-produeing Aspergillus niger strain, NS-1, was screened and isolated from agricultural and forestry wastes. Based on single-fac- tor experiments, the effects of different carbon sources, composite carbon sources, nitrogen sources, calcium carbonate concentrations, initial pH and surfactants on xylanase production by A. niger NS-1 were investigated. The results indicated that the most appropriate carbon source was corncobs ; the best composite carbon source was corncobs + xylan, which was conducive to xylanase secretion; the most suitable nitrogen source was ammonium sulfate. Xylanase activity reached the highest in the medium added with 1.5% calcium carbonate and SDS as a surfactant with an initial pH of 5.0. This study provided the basis for the production of high-activity xylanase. 展开更多
关键词 Aspergillus niger ns-1 XYLANASE OPTIMIZATION Fermentation conditions
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KRN7000对荷NS-1骨髓瘤小鼠的抗瘤作用
9
作者 阎洪敏 韩明哲 +2 位作者 韩俊领 李成文 刘汉芝 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期343-346,共4页
为了探讨KRN70 0 0抗肿瘤作用机制 ,以负荷NS 1骨髓瘤细胞的小鼠为对象 ,观察了KRN70 0 0对荷瘤鼠的保护作用及对小鼠脾脏细胞NK活性的影响。结果表明 ,经KRN70 0 0体外处理或体内注射后均能明显增强脾脏细胞对Yac 1(NK敏感细胞 )和NS... 为了探讨KRN70 0 0抗肿瘤作用机制 ,以负荷NS 1骨髓瘤细胞的小鼠为对象 ,观察了KRN70 0 0对荷瘤鼠的保护作用及对小鼠脾脏细胞NK活性的影响。结果表明 ,经KRN70 0 0体外处理或体内注射后均能明显增强脾脏细胞对Yac 1(NK敏感细胞 )和NS 1(NK非敏感细胞 )的杀伤活性。KRN70 0 0单独用药可使 2 0 %荷瘤鼠获得长期存活 ,联合应用环磷酰胺 (CTX)后 80 %小鼠获得长期存活 (与对照组比较P <0 .0 0 5 )。同时发现 ,10 0 μg kg剂量的KRN70 0 0对小鼠的肝、肾等重要脏器无明显的毒副作用。研究结果提示 ,KRN70 0 0可能是一种非常有发展前途的免疫调节剂。 展开更多
关键词 KRN7000 骨髓瘤 抗瘤作用 免疫调节剂 动物实验
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HBV多表位复合基因在NS-1细胞的表达
10
作者 田泽维 董文其 +4 位作者 王萍 吴英松 李林海 李明 黄建生 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期661-663,共3页
目的 研究HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS - 1内的表达。方法 PCR扩增HBc 1~ 72aa及 93~ 1 83aa编码序列并合成HBV多表位复合基因 ,定向克隆至pcDNA3 .1 (+)。经双酶切及核苷酸序列测定等方法筛选阳性克隆... 目的 研究HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS - 1内的表达。方法 PCR扩增HBc 1~ 72aa及 93~ 1 83aa编码序列并合成HBV多表位复合基因 ,定向克隆至pcDNA3 .1 (+)。经双酶切及核苷酸序列测定等方法筛选阳性克隆。阳性质粒以Lipofectamine介导转染NS - 1细胞 ,通过ELISA及间接免疫荧光等方法检测细胞表达产物。结果 双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约 890bp的HBc与HBV多表位复合基因的杂合基因。重组子成功转染NS - 1细胞并表达HBc-Mep融合蛋白。 结论 HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS - 1内正确表达目的蛋白。为研究pHBc -Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础。 展开更多
关键词 HBV HBC 多表位复合基因 细胞转染 表达 ns-l CELL
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小鼠血管内皮生长因子慢病毒载体的构建及其在NS-1小鼠骨髓瘤细胞株中的表达
11
作者 杨金荣 曾科 +1 位作者 李军 牛挺 《华西医学》 CAS 2013年第7期998-1002,共5页
目的构建含小鼠血管内皮生长因子(mVEGF)的重组慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒后感染NS-1小鼠骨髓瘤细胞株,以便进一步探索VEGF在骨髓瘤病理生理机制中的作用。方法聚合酶链反应法扩增mVEGF基因,克隆入含嘌呤霉素抗性的pCDH慢病毒表达载... 目的构建含小鼠血管内皮生长因子(mVEGF)的重组慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒后感染NS-1小鼠骨髓瘤细胞株,以便进一步探索VEGF在骨髓瘤病理生理机制中的作用。方法聚合酶链反应法扩增mVEGF基因,克隆入含嘌呤霉素抗性的pCDH慢病毒表达载体,构建出表达mVEGF的慢病毒表达载体pCDH-mVEGF;采用磷酸钙法将慢病毒系统三质粒pCDH-mVEGF、psPAX2、pMD2.G共转染293FT细胞包装病毒,分别收集转染后48 h和72 h病毒上清并感染靶细胞NS-1,初次感染72 h后开始采用嘌呤霉素筛选稳定株,筛选2周后采用ELISA法检测稳定株细胞培养上清中mVEGF的表达,建立出稳定高表达mVEGF的NS-1小鼠骨髓瘤细胞株。结果成功构建重组慢病毒表达质粒pCDH-mVEGF,并包装成慢病毒颗粒,感染NS-1细胞株后获得靶基因的稳定高表达。结论成功构建出含mVEGF的慢病毒表达载体pCDH-mVEGF,慢病毒系统能有效介导目的基因在NS-1小鼠骨髓瘤细胞株中稳定表达,病毒包装成功并能有效感染NS-1细胞,为进一步探索VEGF在骨髓瘤病理生理机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠血管内皮生长因子 慢病毒载体 ns-1细胞株 多发性骨髓瘤
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NS-398诱导舌鳞癌细胞凋亡及其对E2F-1蛋白表达的影响 被引量:1
12
作者 杜一飞 陈宁 +1 位作者 张双越 周薇娜 《口腔医学》 CAS 2008年第2期81-84,共4页
目的观察选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂NS-398诱导舌鳞癌Tca8113细胞凋亡及其对细胞核转录因子E2F-1蛋白表达的影响。方法NS-398作用于舌癌Tca8113细胞,噻唑蓝法检测细胞生长抑制情况,流式细胞仪检测细胞周期及其凋亡率的改变,放射免... 目的观察选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂NS-398诱导舌鳞癌Tca8113细胞凋亡及其对细胞核转录因子E2F-1蛋白表达的影响。方法NS-398作用于舌癌Tca8113细胞,噻唑蓝法检测细胞生长抑制情况,流式细胞仪检测细胞周期及其凋亡率的改变,放射免疫法测定细胞上清液中前列腺素E2(PGE2)含量,Western blot法检测细胞中COX-2和E2F-1蛋白表达的变化。结果NS-398可以抑制Tca8113细胞的增殖,其抑制作用随着时间的延长和药物浓度的增加而增强。NS-398(50μmol/L)可引起Tca8113细胞G0/G1期细胞的逐渐增加,S期和G2/M期细胞比例数减少,并随着时间的延长细胞上清液中PGE2含量降低,细胞中COX-2和E2F-1蛋白表达下调。结论NS-398可以抑制Tca8113细胞的增殖,阻断细胞生长停滞于G0/G1期;该效应可能与其诱导细胞凋亡和降低细胞产生前列腺素E2有关;E2F-1蛋白可能参与了这些过程。 展开更多
关键词 ns-398 鳞状细胞癌 环氧化酶-2 E2F-1
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NS-398调节HepG2细胞组蛋白乙酰化和p21WAF1/CIP1表达
13
作者 吴青 朱长才 +2 位作者 郭晓鹏 范丽蓉 宋世震 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2007年第5期370-373,共4页
背景与目的:研究非甾体药物NS-398对人肝癌细胞株HepG2细胞组蛋白H3乙酰化水平的调节作用及对细胞周期素依赖性激酶抑制p21WAF1/CIP1表达的影响。材料与方法:用不同浓度(100、200、300、400μmol/L)的NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮... 背景与目的:研究非甾体药物NS-398对人肝癌细胞株HepG2细胞组蛋白H3乙酰化水平的调节作用及对细胞周期素依赖性激酶抑制p21WAF1/CIP1表达的影响。材料与方法:用不同浓度(100、200、300、400μmol/L)的NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞增殖抑制率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期的改变及凋亡百分率的变化,应用NS-398分别作用HepG2细胞4、8、12、24、48h,非药物作用组作为对照,提取细胞的总RNA和总蛋白,采用RT-PCR技术检测p21WAF1/CIP1mRNA表达情况,并用免疫印迹技术(Western blot)观察组蛋白H3的乙酰化水平变化及p21WAF1/CIP1蛋白的表达水平。结果:NS-398抑制HepG2细胞增殖,且呈剂量依赖性,并诱导其凋亡。且呈浓度依赖性改变细胞周期的分布,一方面增高G0/G1期细胞比例,另一方面降低S期和G2/M期细胞比例,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。NS-398对组蛋白H3乙酰化作用随时间改变而变化,可引起组蛋白H3的乙酰化。NS-398对p21WAF1/CIP1 mRNA和p21WAF1/CIP1蛋白表达的影响呈时间依赖性。结论:NS-398明显上调HepG2细胞组蛋白H3的乙酰化水平,促进细胞周期依赖性激酶抑制剂p21WAF1/CIP1的表达。 展开更多
关键词 ns-398 组蛋白乙酰化 P21WAF1/CIP1 HEPG2细胞
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KRN7000对荷NS-1骨髓瘤小鼠抗瘤作用机制的研究
14
作者 闫洪敏 韩明哲 《中华国际医学杂志》 2001年第2期116-118,共3页
目的 探讨KRN7000抗肿瘤作用的机理。方法 以负荷NS-1骨髓瘤细胞的小鼠为对象,观察KRN7000对小鼠脾细胞NK活性及对荷瘤鼠生存期的影响。结果 鼠脾细胞经KRN7000体内、外作用后,对Yac-1(NK敏感细胞)和NS-1细胞的杀伤活性均明显... 目的 探讨KRN7000抗肿瘤作用的机理。方法 以负荷NS-1骨髓瘤细胞的小鼠为对象,观察KRN7000对小鼠脾细胞NK活性及对荷瘤鼠生存期的影响。结果 鼠脾细胞经KRN7000体内、外作用后,对Yac-1(NK敏感细胞)和NS-1细胞的杀伤活性均明显增强。KRN7000可以延长小鼠的生存期,单独或联合环磷酰胺(CY)用药分别可使20%(与对照组比较P<0.05)和80%(与对照组比较P<0.01)的小鼠获得长期存活。病理检查发现10μg/kg剂量的KRN700对小鼠的心、肝、肾等重要器官无明显的毒性作用。结论 KRN7000可能是一种非常有发展前途的免疫调节剂。 展开更多
关键词 KRN7000 ns-1骨髓瘤小鼠 抗瘤作用
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禽流感病毒NS1蛋白对细胞的影响 被引量:4
15
作者 赵莉霞 张莹莹 +6 位作者 杨志新 许龙 杨予涛 于孟斌 王荣 周晓巍 黄培堂 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1912-1917,共6页
NS1蛋白为流感病毒非结构蛋白,只在病毒侵入宿主细胞后产生。目前NS1蛋白对细胞整体水平上的作用仍不清楚,为了解NS1蛋白在病毒感染细胞中的作用,构建了重组质粒pCMV-myc-NS1并将其转染A549细胞,利用双向电泳技术检测了受NS1蛋白调控的... NS1蛋白为流感病毒非结构蛋白,只在病毒侵入宿主细胞后产生。目前NS1蛋白对细胞整体水平上的作用仍不清楚,为了解NS1蛋白在病毒感染细胞中的作用,构建了重组质粒pCMV-myc-NS1并将其转染A549细胞,利用双向电泳技术检测了受NS1蛋白调控的宿主蛋白,以期从蛋白质组水平上研究禽流感病毒与宿主细胞间的相互作用。同时,还检测了转染NS1对细胞增殖和细胞周期的影响。结果显示,NS1在细胞中的表达,能够明显引起宿主细胞代谢的变化,并通过阻滞细胞周期的正常进行而减缓细胞的增殖。 展开更多
关键词 NS1蛋白 宿主细胞 双向电泳 细胞增殖 细胞周期
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猪细小病毒NS_1基因的克隆及表达 被引量:4
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作者 吕建强 陈焕春 +1 位作者 赵俊龙 何启盖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期435-437,共3页
根据 Bergeron等报道的猪细小病毒基因组序列设计引物 ,在下游引物中引入 Bgl 酶切位点以便于构建表达载体。利用 PCR技术扩增得到 NS1 全基因 ,将其克隆到 p MD18- T载体中进行序列测定并分析 ,进而构建重组转移载体p Fast- NS1 ,在 DH... 根据 Bergeron等报道的猪细小病毒基因组序列设计引物 ,在下游引物中引入 Bgl 酶切位点以便于构建表达载体。利用 PCR技术扩增得到 NS1 全基因 ,将其克隆到 p MD18- T载体中进行序列测定并分析 ,进而构建重组转移载体p Fast- NS1 ,在 DH1 0 Bac大肠杆菌中与改造过的苜蓿夜蛾核型多角体病毒 (Ac NPV )基因组 (Bacmid)发生同源重组 ,获得重组穿梭载体 Bacmid- NS1 ,经脂质体介导转染 Sf9细胞后 ,得到重组杆状病毒 (Ac NPV- NS1 )。SDS- PAGE、Western-blotting分析可见大小约为 84 0 0 0的特异性带 ,表明 NS1 蛋白在杆状病毒 Bac- To- Bac表达系统中成功地实现了表达 ,从而为研究其结构与功能创造了条件。 展开更多
关键词 猪细小病毒 NS1基因 基因克隆 基因表达 PCR技术
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肾病综合征患儿钙磷代谢、骨密度变化及1,25-二羟维生素D_3的干预作用 被引量:12
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作者 张国珍 徐志泉 +3 位作者 罗海伶 陈玉雯 冯小伟 廖锋 《海南医学》 CAS 2018年第6期769-772,共4页
目的观察肾病综合征患儿钙磷代谢、骨密度变化及1,25-二羟维生素D_3的干预作用。方法选取2013年1月至2016年12月海南省人民医院儿科收治住院的首次发病肾病综合征患儿62例作为观察组,采用随机数表法分为活性维生素D+钙剂组(n=20)、活性... 目的观察肾病综合征患儿钙磷代谢、骨密度变化及1,25-二羟维生素D_3的干预作用。方法选取2013年1月至2016年12月海南省人民医院儿科收治住院的首次发病肾病综合征患儿62例作为观察组,采用随机数表法分为活性维生素D+钙剂组(n=20)、活性维生素D组(n=20)和维生素D+钙剂组(n=22),疗程7~9个月。选取正常健康儿童20例为对照组。检测各组患儿治疗前、治疗后2个月、6个月及停激素后2个月的血清钙、磷、骨碱性磷酸酶、25-羟维生素D_3水平和骨密度Z值,并分别与对照组进行比较。结果观察组患者的血钙、25-羟维生素D_3较对照组明显降低,血磷、骨碱性磷酸酶较对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后2个月、6个月及停激素后2个月血钙、25-羟维生素D_3较治疗前增高,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的骨密度Z值在治疗后6个月达最低值,与治疗前、治疗后2个月比较差异均有统计学意义(P<0.05),而治疗前与停激素后2个月的骨密度Z值比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组各组间治疗前的血清钙、磷、25-羟维生素D_3、骨碱性磷酸酶、骨密度Z值比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后2个月及停药后2个月,活性维生素D+钙剂组患者的血25-羟维生素D_3水平明显高于其他两组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后6个月,维生素D+钙剂组患者的骨密度Z值明显低于其他两组,差异均有统计学意义(P<0.05);停激素后2个月,血清钙磷、骨碱性磷酸酶、骨密度各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论肾病综合征患儿存在钙磷代谢紊乱,在糖皮质激素治疗过程中骨密度Z值降低,通过给予维生素D、1,25-二羟维生素D_3及钙剂治疗均可以改善钙磷代谢紊乱及骨密度。对比三种治疗方案,活性维生素D+钙剂组能明显提高25羟维生素D水平。 展开更多
关键词 肾病综合征 1 25-二羟维生素D_3 骨密度 定量超声骨强度
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H7N9亚型禽流感病毒非结构蛋白-1真核表达载体的构建与表达 被引量:1
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作者 温恬 迟莹 +3 位作者 张黎 张文帅 彭海燕 史智扬 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1339-1343,共5页
目的:构建甲型H7N9亚型禽流感病毒非结构蛋白NS1真核表达载体并转染293T细胞以表达其编码的蛋白。方法:从南京分离株H7N9流感病毒[A/Nanjing/1/2013(H7N9)]提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T载体中构建pMD18... 目的:构建甲型H7N9亚型禽流感病毒非结构蛋白NS1真核表达载体并转染293T细胞以表达其编码的蛋白。方法:从南京分离株H7N9流感病毒[A/Nanjing/1/2013(H7N9)]提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T载体中构建pMD18-T-NS1质粒,以pMD18-T-NS1质粒为模板扩增NS1基因。双酶切NS1基因PCR产物与PXJ40-MYC后,连接构建真核表达载体PXJ40-MYC-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过Western blot鉴定NS1蛋白的表达。结果:经双酶切、测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功。Western blot法可见NS1基因编码蛋白的成功表达。结论:成功构建了H7N9非结构蛋白NS1真核表达载体,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1蛋白的细胞模型和NS1蛋白功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感病毒 NS1 真核表达 免疫印迹
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猪细小病毒NS1基因的原核表达 被引量:2
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作者 冉旭华 闻晓波 +1 位作者 孟凡 周恩民 《黑龙江八一农垦大学学报》 2007年第6期50-54,共5页
根据GenBank发表的猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)中国株基因序列设计引物,通过PCR方法扩增到了PPV LJL12株NS1全长基因,将其克隆到原核表达载pET30a(+)上,成功构建原核表达载体pET30a-NS1,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞... 根据GenBank发表的猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)中国株基因序列设计引物,通过PCR方法扩增到了PPV LJL12株NS1全长基因,将其克隆到原核表达载pET30a(+)上,成功构建原核表达载体pET30a-NS1,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。SDS-PAGE电泳显示NS1在大肠杆菌中得到成功表达,重组蛋白大小约为86ku,与预期大小相符;Western blot分析表明,该蛋白能与PPV阳性血清发生特异性反应,证明该蛋白具有良好生物学活性。NS1在大肠杆菌中成功表达,具有免疫原性,可作为鉴别诊断抗原用于PPV的临床检测。 展开更多
关键词 猪细小病毒 NS1蛋白 原核表达
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Ca_(1—n)Sr_nS:Cu^+,Eu^(2+)的合成与光谱特征 被引量:9
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作者 廉世勋 李承志 +1 位作者 吴振国 毛向辉 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 1997年第1期56-58,共3页
研究了Cu+,Eu2+共激活的Ca1—nSrnS的发光性质、基质组分Ca/Sr摩尔比与荧光性质的关系.Cu+和Eu2+在纯CaS基质中的发射光谱分别位于430nm及630nm附近.随着基质中Sr含量的增加,红、蓝发射... 研究了Cu+,Eu2+共激活的Ca1—nSrnS的发光性质、基质组分Ca/Sr摩尔比与荧光性质的关系.Cu+和Eu2+在纯CaS基质中的发射光谱分别位于430nm及630nm附近.随着基质中Sr含量的增加,红、蓝发射带都向绿区移动;当基质为纯SrS时,红、蓝发射带复合为一个主峰在517nm、半宽度为80nm的带谱.实验结果表明:Ca1—nSrnSCu+,Eu2+是一种红。 展开更多
关键词 光谱特性 铜离子 铕离子 硫化钙 硫化锶 合成
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