丙型肝炎病毒非结构基因5A反式激活基因4A结合蛋白基因的筛选

目的 筛选并克隆HCV非结构基因NS5A反式激活基因4剪切体NS5ATP4A的结合蛋白基因，为研究NS5ATP4A的生物学功能提供线索。方法 构建HCV NS5ATP4A蛋白诱饵酵母质粒，转化酵母AH109后与含文库质粒的酵母Y187进行配合，在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。选择既能在4重营养缺陷培养基（SD／-Trp／-Leu／-Ade／-His）上生长，又能在涂有X-α-半乳糖的四缺培养平皿上生长的蓝色菌落，提取此酵母克隆的质粒，转化大肠杆菌后进行测序，并进行生物信息学分析。结果 筛选出7个基因，其中已知功能基因6个，未知功能基因1个，这些基因与RNA合成、蛋白质翻译、细胞周期及肿瘤免疫有关。结论HCV NS5ATP4A结合蛋白基因的成功筛选，提示了HCV NS5ATP4A新的信号转导途径，为HCV致病机制的进一步研究提供了依据。