NVP-BEZ235逆转伯基特淋巴瘤RAJI细胞阿霉素耐药的研究

目的:研究NVP-BEZ23对耐阿霉素细胞株RAJI/DOX的逆转耐药作用。方法:利用浓度梯度法诱导耐阿霉素细胞株RAJI/DOX;Western blot测定各组细胞Pgp、p-AKT、p-mTOR蛋白水平;MTT法检测细胞抑制率,SPSS软件测定IC50。结果:成功诱导出耐阿霉素细胞株RAJI/DOX。耐阿霉素细胞株RAJI/DOX中Pgp、p-AKT、p-mTOR蛋白水平高于亲本细胞RAJI。NVP-BEZ235可引起耐阿霉素细胞株RAJI/DOX中p-AKT、p-mTOR蛋白水平下降。NVP-BEZ235能够抑制耐阿霉素细胞株RAJI/DOX增殖,与阿霉素具有协同作用。结论:PI3K/AKT/mTOR通道在耐阿霉素伯基特淋巴瘤细胞中进一步活化;NVP-BEZ235通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通道活化,能够与阿霉素协同抑制伯基特淋巴瘤耐药细胞,逆转伯基特淋巴瘤耐药细胞对阿霉素的耐药性。

PI3Ks新型抑制剂NVP-BEZ235对食管鳞癌的抑制作用

目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)新型抑制剂NVP-BEZ235(Dactolisib)对食管鳞癌体内外模型的抑制作用,为食管鳞癌的靶向治疗提供参考。方法采用免疫印迹(Western blot)法检测食管鳞癌细胞系中磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基p85α(PI3K-p85α)蛋白的表达情况;对食管鳞癌的细胞系分别给予0,1,4,8,16,32,64,128 nmol/L浓度的NVP-BEZ235,采用MTT法检测生长情况,计算细胞生存率及半数抑制浓度(IC50);对PI3K-p85α高表达及低表达的食管鳞癌细胞系分别予10 nmol/L NVP-BEZ235,观察细胞集落形成情况;建立裸鼠皮下移植瘤模型,评估NVP-BEZ235的体内治疗效果。结果PI3K-p85α高表达的食管鳞癌细胞系KYSE30,KYSE70,KYSE510,TE1对NVP-BEZ235更敏感,IC50分别为4.92,5.43,4.76,7.78 nmol/L;而PI3K-p85α低表达的细胞系KYSE150,KYSE180,KYSE270,KYSE450对NVP-BEZ235的敏感度较低,IC50分别为13.21,18.44,20.37,48.45 nmol/L。加入10 nmol/L NVP-BEZ235进行的集落形成实验结果相似,KYSE30,KYSE70,KYSE510,TE1的集落数目少于KYSE150,KYSE180,KYSE270,KYSE450的集落数目。在裸鼠皮下移植瘤模型中,较低浓度(10 mg/kg)的NVP-BEZ235即可抑制食管鳞癌皮下移植瘤的生长。结论NVP-BEZ235对食管鳞癌细胞系和裸鼠移植瘤都有明显的抑制作用,在PI3K-p85α高表达的食管鳞癌细胞系中抑制效果更明显,在食管鳞癌中具有一定靶向性,可为后期的临床试验提供参考。

NVP-BEZ235诱导自噬在肝癌细胞凋亡中的作用研究

目的以Hep3B和PLC/PRF/5两种肝癌细胞为研究对象,探讨自噬在NVP-BEZ235中引起细胞凋亡的作用.方法人类肝癌细胞Hep3B和PLC/PRF/5在含有10%FBS的DMEM培养基中进行培养,然后再进行细胞活性检测,用于Western blotting检测及线粒体膜电位(MMP)分析.结果 NVP-BEZ235能够有效增加LC3-Ⅱ的表达,并同时降低p62的表达,由此推断,NVP-BEZ235也能够诱导产生自噬,与Atg5的siRNA或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合应用时,肝癌细胞的生长被抑制.结论 NVP-BEZ235与Atg5的siRNA或者3-MA的联合应用能够促进细胞凋亡,NVP-BEZ235和自噬抑制剂的联合应用可为肝癌和其他恶性肿瘤临床治疗提供新的方法.

NVP-BEZ235诱导多囊肾大鼠胆管上皮细胞自噬的机制研究

目的:探讨PI3K/Akt/m TOR双靶点抑制剂NVP-BEZ235诱导多囊肾(polycystic kidney,PCK)大鼠胆管上皮细胞自噬的作用。方法:免疫组化法检测p-m TOR和p-Akt在PCK大鼠胆管上皮细胞中的水平。WST-1比色法检测NVP-BEZ235对胆管细胞活力的抑制作用以及LC3、Beclin 1基因沉默和自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对细胞活力的影响。蛋白免疫印迹法检测NVP-BEZ235对PI3K/Akt/m TOR信号通路相关蛋白及自噬标志蛋白LC3和Beclin 1的变化。结果:p-m TOR和p-Akt在PCK大鼠胆管上皮细胞中显著升高,NVP-BEZ235可明显抑制胆管上皮细胞的活力,且呈浓度和时间依赖性改变(P<0.05);NVP-BEZ235明显抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路相关蛋白的水平;并上调自噬标志蛋白LC3 II/LC3 I比值和Beclin 1蛋白的表达水平。LC3、Beclin 1基因沉默和3-MA均可明显减弱NVP-BEZ235对细胞活力的抑制作用(P<0.01)。结论:NVPBEZ235可抑制PCK大鼠胆管上皮细胞的活力,其机制与自噬密切相关。

PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235体内外对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 :探讨PI3K/m TOR双重抑制剂NVP-BEZ235在体内外对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:MTT法检测NVP-BEZ235对细胞增殖的影响;Western blot检测NVP-BEZ235对PI3K/m TOR下游信号蛋白的影响;碘化丙啶染色检测细胞周期和细胞凋亡;DAPI染色从细胞形态上检测细胞凋亡;构建CNE1异种移植肿瘤模型,NVP-BEZ235口服给药,测量肿瘤体积大小和剥除的肿瘤重量计算抑制率,TUNEL法检测组织细胞凋亡。结果:1与人鼻咽上皮细胞NP69比较,NVP-BEZ235选择性抑制鼻咽癌细胞增殖;2 NVP-BEZ235在体外特异性抑制PI3K/m TOR下游信号通路;3 NVP-BEZ235通过阻滞G1期抑制细胞周期,在体外诱导细胞凋亡;4 NVP-BEZ235抑制裸鼠移植肿瘤的生长,在体内通过抑制PI3K/m TOR下游信号通路的磷酸化诱导细胞凋亡。结论:PI3K/m TOR双重抑制剂NVP-BEZ235在体内外选择性抑制鼻咽癌细胞增殖,抑制细胞周期进程,诱导鼻咽癌细胞凋亡。

NVP-BEZ235对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响

目的探讨PI3K/Akt/mTOR双靶点抑制剂NVP-BEZ235在体外对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响。方法采用0、0.01、0.1、1.0μmol/L NVP-BEZ235处理HepG2细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度NVP-BEZ235处理24、48、72和96h的增殖抑制率,流式细胞仪、Transwell侵袭实验、荧光定量PCR及免疫印迹检测不同浓度NVP-BEZ235处理48h后的细胞周期分布、穿膜细胞数及基质金属蛋白酶(MMP)-2的mRNA和蛋白水平。结果 NVPBEZ235可呈剂量和时间依赖的方式升高增殖抑制率(P<0.05);除0.01μmol/L处理24h的晚期凋亡率外,0.01、0.1、1.0μmol/L NVP-BEZ235处理24、48h的早、晚期凋亡率均高于0μmol/L(P<0.05);0.01、0.1、1.0μmol/L NVP-BEZ235处理48h的G0/G1期细胞比例高于0μmol/L,穿膜细胞数、MMP-2 mRNA和蛋白水平及S期和G2/M期细胞比例均低于0μmol/L(P<0.05),且各浓度间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NVP-BEZ235可抑制肝癌HepG2细胞增殖及侵袭转移,促进其凋亡和阻滞细胞在G0/G1期并降低MMP-2表达。

BEZ235和顺铂协同抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂BEZ235联合顺铂对膀胱癌细胞迁移和侵袭的影响,及其潜在的作用机制。方法 在2020年1月1日至2021年5月30日,应用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测BEZ235和顺铂联合接单药对人膀胱癌细胞(5637细胞)增殖的影响,并计算联合用药指数(CI);在BEZ235和顺铂空白处理(对照组)、联合处理和单药分别处理膀胱癌5637细胞后,通过平板克隆形成实验、划痕愈合实验和细胞侵袭实验分别检测各处理组膀胱癌细胞的集落形成、迁移和侵袭能力;应用蛋白质印迹法检测各处理组的膀胱癌细胞中上皮-间质转化相关蛋白的表达。结果 BEZ235和顺铂对5637细胞均以时间和剂量依赖的方式发挥抑制作用,100 nmol/L BEZ235和0.1μmol/L顺铂联合用药时,CI值最小。BEZ235和顺铂联合处理组的5637细胞的集落形成数[对照组为(207±9)个,BEZ235单药处理组为(146±10)个,顺铂单药处理组为(179±11)个,两药联合处理组为(103±9)个]、相对迁移率[对照组为(70±5)%,BEZ235单药处理组为(52±6)%,顺铂单药处理组为(53±4)%,两药联合处理组为(39±6)%]和侵袭数[对照组为(346±36)个,BEZ235单药处理组为(193±38)个,顺铂单药处理组为(254±27)个,两药联合处理组为(133±23)个]均显著少于对照组和各单药组(均P<0.05)。BEZ235和顺铂联合处理组的5637细胞中上皮-间质转化相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)的表达水平均显著高于对照组和各单药组(均P<0.05),神经钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白的表达水平均显著低于对照组和各单药组(均P<0.05)。结论 BEZ235和顺铂可在体外协同抑制膀胱癌细胞的增殖,并通过上皮-间质转化途径抑制细胞的迁移和侵袭。

联合自噬抑制剂增加PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235诱导的结肠癌细胞凋亡

目的探讨自噬对I3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235诱导的人结肠腺癌DLD1细胞凋亡的影响。方法PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235和(或)自噬抑制剂3-MA处理人结肠腺癌DLD1细胞,MTT法检测细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western Blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果不同浓度的NVP-BEZ235作用于人结肠腺癌DLD1细胞24h后,MTT及流式细胞术结果显示,明显地抑制了细胞增殖,并增加了细胞凋亡率,同时观测到凋亡相关蛋白Caspase-3表达升高;采用3-MA特异性抑制自噬活性后,明显地增加了NVP-BEZ235诱导的细胞凋亡率;同时,检测到凋亡相关蛋白Caspase-3的表达上调。结论自噬在NVP-BEZ235诱导的人结肠腺癌DLD1细胞凋亡的过程中起保护作用,3-MA抑制自噬后,促进了NVP-BEZ235诱导人结肠腺癌DLD1细胞凋亡,联合应用PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235和自噬抑制剂3-MA有望成为人结肠癌的新治疗策略。

NVP-BEZ235增敏左旋棉酚杀伤肝癌HepG2细胞的作用

目的探讨PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235增敏左旋棉酚[(-)-gossypol]杀伤肝癌细胞HepG2的作用及可能机制。方法用NVP-BEZ235、左旋棉酚或二者联合处理HepG2细胞,CCK-8法检测不同处理对细胞增殖的影响,流式细胞术检测不同处理对细胞凋亡的影响,Western blot检测不同处理对细胞中mTOR磷酸化水平以及Mcl-1蛋白水平的影响。结果联合使用NVP-BEZ235和左旋棉酚可显著抑制HepG2细胞增殖,并促进细胞凋亡,其中左旋棉酚可上调HepG2细胞中mTOR磷酸化水平及Mcl-1蛋白水平,导致抵抗发生,NVP-BEZ235能够剂量依赖性抑制mTOR磷酸化(P<0.01),并抑制左旋棉酚对Mcl-1的上调作用。结论 NVP-BEZ235可通过抑制mTOR进而下调Mcl-1来增强左旋棉酚杀伤HepG2细胞的效果。

NVP-BEZ235抑制肝癌细胞HepG2的增殖和迁移及机制研究

目的 探究NVP-BEZ235对肝癌细胞HepG2增殖和迁移的影响及其机制。方法 NVP-BEZ235(0、25、50、100、250、500 nmol·L^-1)处理HepG2细胞48 h后,采用MTT法检测细胞的活性;通过形态学观察和Hoechst 33342染色法,检测NVP-BEZ235对HepG2细胞增殖、凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell迁移实验,检测NVP-BEZ235对HepG2细胞迁移能力的影响;免疫印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路、上皮-间质转化(EMT)以及Six1/Ezrin信号轴等标志物的表达情况;采用免疫荧光实验检测EMT相关标志物的表达情况。结果 NVP-BEZ235可明显抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;NVP-BEZ235可诱导HepG2细胞发生凋亡;NVP-BEZ235可抑制HepG2细胞的迁移能力。在NVP-BEZ235的作用下,p-Akt^Ser473 、p-S6^Thr389 、p-4E-BP1^Thr37/46 的表达下调,上皮标志物E-cadherin表达上调,间质标志物Vimentin、Snail表达下调,Six1和p-Ezrin^Tyr353 表达下调。结论 NVP-BEZ235可有效抑制HepG2细胞的增殖和迁移,其机制可能与NVP-BEZ235降低p-Akt^Ser473 、p-S6^Thr389 、p-4E-BP1^Thr37/46 的表达,抑制Six1/Ezrin信号轴及逆转EMT的进程有关。

NVP-BEZ235抑制CD34^+CD38^-急性髓系白血病干细胞的增殖和集落形成

本研究旨在探讨PI3K/mTOR信号系统双靶点抑制剂———NVP-BEZ235对CD34+CD38-髓系白血病干细胞增殖、细胞周期和集落形成能力的影响。用流式细胞术检测急性髓系白血病KG1a细胞表面CD34和CD38的表达;应用台盼蓝染色细胞计数法检测不同浓度NVP-BEZ235对KG1a细胞增殖的影响,PI染色流式细胞术检测NVP-BEZ235对KG1a细胞周期的影响,持续用软琼脂集落形成实验检测不同浓度NVP-BEZ235对KG1a细胞集落形成细胞的影响。结果表明,急性髓系白血病KG1a细胞中CD34+CD38-占(98.02±0.72)%,NVP-BEZ235(0.125-1μmol/L)对KG1a细胞增殖抑制呈现时间和剂量依赖(P<0.05),其24和48 h的IC50值分别为0.597和0.102μmol/L。0.5μmol/L的NVP-BEZ235作用24 h后,G0/G1期KG1a细胞比例达(83.2±3.80)%,较对照组(43.47±9.60)%明显增高(P<0.05)。2500个细胞在NVP-BEZ235(0-1μmol/L)持续作用下14 d和21 d而形成的集落数分别由375.67±21.46、706.33±87.31降至0(P<0.05)。结论:NVP-BEZ235能抑制CD34+CD38-髓系白血病干细胞增殖和集落形成。

NVP-BEZ235对卵巢癌细胞系SKOV3增殖及体内、体外迁移的影响

目的探讨NVP-BEZ235对卵巢癌细胞SKOV3的增殖抑制及体内、体外转移的抑制作用。方法对贴壁生长的卵巢癌细胞SKOV3进行体外培养及传代,采用Cell Count Kit-8检测不同浓度NVP-BEZ235(125、250、500、1 000 nmol/mL)处理SKOV3细胞48 h后的增殖抑制效应。选取无增殖抑制的浓度125 nmol/mL处理细胞,Transwell法检测体外侵袭变化,斑马鱼移植癌细胞模型检测体内侵袭变化。结果 NVP-BEZ235能显著抑制卵巢癌细胞SKOV3体外增殖,Transwell法检测体外侵袭能力明显减弱,NVP-BEZ235显著抑制SKOV3细胞在斑马鱼体内转移。结论 NVP-BEZ235对于卵巢癌细胞SKOV3具有抑制增殖,减少体外体内侵袭,具有成为卵巢癌治疗药物的可能。

β拉帕醌联合PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235抑制BGC-823细胞增殖和迁移

目的研究β拉帕醌(β-lapachone)与磷脂酰肌醇3激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/m TOR)抑制剂NVP-BEZ235联合用药对人胃癌BGC-823细胞增殖与迁移的影响及机制。方法将BGC-823细胞分为空白对照组、1μmol/Lβ-lapachone处理组、50 nmol/L NVP-BEZ235处理组及1μmol/Lβ-lapachone联合50 nmol/L NVP-BEZ235处理组。采用MTT法和平板克隆形成实验检测BGC-823细胞的增殖能力;Western blot法检测细胞增殖相关蛋白磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白水平;划痕实验及TranswellTM迁移实验检测细胞迁移能力;Western blot法检测上皮-间质转化(EMT)相关标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子Snail及β联蛋白(β-catenin)的蛋白水平。结果与β-lapachone处理组或NVP-BEZ235处理组相比,β-lapachone联合NVP-BEZ235处理组能更显著地抑制细胞的增殖和克隆形成能力,p-AKT、p-NF-κB、p-ERK及cyclin D1的蛋白表达下调最明显;在联合处理组对细胞迁移的抑制更明显,EMT相关标志物E-cadherin表达上调,vimentin、Snail及β-catenin表达下调最明显。结论β-lapachone联合NVP-BEZ235可有效抑制BGC-823胃癌细胞增殖,可能与p-AKT、p-NF-κB、p-ERK和cyclin D1表达降低有关;并通过调控EMT进程,抑制BGC-823细胞的迁移。

NVP-BEZ235联合用药抗肿瘤的研究进展

NVP-BEZ235是ATP竞争性的PI3K/m TOR双靶点抑制剂,可以通过周期阻滞和凋亡诱导作用在体外水平有效抑制肿瘤细胞的增殖。然而,临床前动物实验发现NVP-BEZ235单药治疗的抗肿瘤效果并不理想。但是,NVPBEZ235与多种抗肿瘤药物联合应用时可以产生强大的协同效应,以NVP-BEZ235为基础的联合化疗方案可能成为肿瘤治疗的新策略。

伏立诺他协同PI3K抑制剂NVP-BEZ235诱导Jurkat细胞凋亡

目的探讨伏立诺他联合PI3K抑制剂NVP-BEZ235对Jurkat细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养Jurkat细胞,用不同浓度伏立诺他或(和)NVP-BEZ235孵育后,采用MTS观察两者单独用药或联合用药对细胞的增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测PI3K/Akt磷酸化及Bim1表达。结果0.12、0.24、0.36、0.48和0.60μmol/L伏立诺他和6、12、18、24、30 nmol/L NVP-BEZ235对Jurkat细胞的生长增殖具有协同作用。伏立诺他或(和)NVP-BEZ235也可促进Jurkat细胞凋亡,并抑制PI3K/Akt磷酸化,上调Bim1的表达。结论伏立诺他对PI3K抑制剂NVP-BEZ235抑制Jurkat细胞生长具有协同作用,并能诱导Jurkat细胞凋亡,其机制与影响Bim1有关。

NVP-BEZ235体外对胆管癌细胞株QBC939增殖及凋亡的影响

目的研究NVP-BEZ235体外对胆管癌细胞株QBC939增殖及凋亡的影响。方法在体外培养人胆管癌细胞株QBC939,通过流式细胞仪检测NVP-BEZ235对QBC939凋亡的影响;MTT法检测NVP-BEZ235作用24小时、48小时和72小时对QBC939的增殖影响;Western blot分析NVP-BEZ235作用48小时对QBC939凋亡的影响(PARP),并检测分析相关信号通路蛋白Bcl-2、Akt、p-Akt、c-FLIPL和Mcl-1表达水平的变化。结果 NVP-BEZ235能抑制QBC939的增殖,抑制作用具有时间依赖性和浓度依赖性,同时能诱使细胞发生凋亡。NVP-BEZ235导致细胞内抗凋亡蛋白Mcl-1、c-FLIPL和Bcl-2表达下调,并降低p-Akt表达。结论 NVP-BEZ235抑制Akt的磷酸化,NVP-BEZ235通过PI3K/Akt通路下调Bcl-2、Mcl-1和c-FLIPL的表达,从而诱使QBC939出现凋亡,抑制QBC939增殖。

PF-4708671和NVP-BEZ235联合用药协同抑制MDA-MB-436和A549细胞增殖

目的研究p70核糖体S6激酶β-1(S6K1)抑制剂PF-4708671激活蛋白激酶B(AKT)的分子机制,以及其联合磷脂酰肌醇-3-激酶/哺乳动物西罗莫司(雷帕毒素)靶蛋白抑制剂NVP-BEZ235对肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法 PF-4708671单独处理人乳腺癌MDA-MB-436和肺癌A549细胞0,1,3,6,12和24 h或与西罗莫司联合处理24 h后,Western蛋白印迹法检测p-S6及p-AKT表达水平;敲低肿瘤细胞中S6K1基因,并用PF-4708671处理野生型和突变型细胞,Western蛋白印迹法检测S6K1及p-AKT473表达水平;PF-4708671和NVP-BEZ235单用及联用于肿瘤细胞,Western蛋白印迹法检测p-S6及p-AKT473的表达水平,同时分别采用平板克隆和CCK8法检测肿瘤细胞增殖和存活。结果 PF-4708671处理肿瘤细胞不同时间后,在抑制S6K1活性的同时增强AKT活性(P<0.01);西罗莫司和PF-4708671都能抑制S6K1活性(P<0.01)并激活AKT,并在联用时进一步增强AKT活性;敲低S6K1基因导致AKT活性增强;PF-4708671处理敲低S6K1基因的突变型细胞,相对于野生型细胞,对AKT活性的激活程度显著减弱(P<0.01);PF-4708671和NVP-BEZ235联用能抑制AKT活性(P<0.01),同时显著降低肿瘤细胞的克隆形成率和增殖活性(P<0.01)。结论 PF-4708671通过抑制S6K1活性反馈激活AKT,这可能是导致其对肿瘤细胞增殖抑制作用减弱的原因之一;PF-4708671和NVP-BEZ235联用对肿瘤细胞生长和增殖的抑制作用明显增强。

NVP-BEZ235对血管肉瘤细胞系ISOHAS增殖及侵袭的影响

目的:探讨PI3K/Akt抑制剂NVP-BEZ235对血管肉瘤细胞系ISOHAS增殖及侵袭的影响。方法:使用CCK8检测24h、48h、72h不同浓度NVP-BEZ235(5、10、20、50、100nM)处理后ISOHAS细胞的增殖能力。Transwell小室实验、Western Blot实验检测NVP-BEZ235(50、100n M)处理后ISOHAS细胞的侵袭能力及细胞内PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达变化情况。结果:与对照组比较,NVP-BEZ235处理后血管肉瘤细胞的增殖、侵袭能力明显下降,且细胞中PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白p-Akt、p-mTOR的表达明显下降。结论:NVP-BEZ235通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制血管肉瘤细胞的增殖、侵袭能力,提示NVP-BEZ235对血管肉瘤治疗具有潜在的应用价值。

NVP-BEZ235对人结肠癌细胞SW480体外增殖的抑制作用及其机制探讨

目的:探讨NVP-BEZ235对人结直肠癌细胞株SW480的抑制、凋亡作用及其可能的作用机制。方法:以不同浓度的NVP-BEZ235处理体外人结直肠癌细胞株SW480,分别用MTT法、流式细胞术和Western blot法检测NVP-BEZ235对SW480细胞的增殖抑制作用、细胞凋亡率和凋亡相关蛋白的表达。结果:NVP-BEZ235对人结直肠癌细胞株SW480的生长具有显著的抑制活性,诱导其凋亡,抑制p-Akt、p-p70S6K蛋白的表达,且均与药物浓度和作用时间呈正相关。结论:NVP-BEZ235具有抑制人结直肠癌细胞株SW480的生长作用并诱导其凋亡,且机制可能是通过抑制p-Akt、p-p70S6K蛋白的表达来实现的。

伏立诺他协同NVP-BEZ235诱导人外周血白血病T细胞凋亡探究

为探讨伏立诺他联合NVP-BEZ235诱导人外周血白血病T细胞(Jurkat细胞)凋亡及机制,培养Jurkat细胞,用伏立诺他或(和)NVP-BEZ235处理,采用流式细胞术检测Jurkat细胞的凋亡情况,Western blot检测FOXO3a磷酸化,免疫荧光检测FOXO3a的核转位核转位。采用si RNA干扰Bim1,观察对Jurkat细胞增殖的影响。结果表明,伏立诺他协同NVP-BEZ235能够促进Jurkat细胞凋亡,降低FOXO3a的磷酸化并诱导其发生核转位,且能诱导Bim1表达,沉默Bim1能逆转伏立诺他和NVP-BEZ235对Jurkat细胞生长的抑制效应。