Na^＋,K^＋-ATP酶在大鼠皮质神经元缺氧性损伤中的作用

目的:探讨缺氧对Na+,K+-ATP酶活性的影响,以及高亲和力Na+,K+-ATP酶和低亲和力Na+,K+-ATP酶在缺氧损伤中的不同作用。方法:通过切换低氧灌流液模拟大鼠脑片和原代培养的皮质神经元缺氧环境,以脑片膜片钳全细胞模式记录Na+,K+-ATP酶电流和膜电流,以可视化动缘探测系统测定培养的皮质神经元内钙离子浓度([Ca2+]i),观察缺氧4min时脑片皮质神经元Na+,K+-ATP酶电流的变化,以及缺氧2、4、6、8和10min时在有、无哇巴因(Na+,K+-ATP酶阻断剂)存在情况下皮质神经元膜电流密度和[Ca2+]i的变化。结果:缺氧4min总Na+,K+-ATP酶电流密度(0.160±0.046pA/pF)较缺氧前(0.265±0.068pA/pF)显著降低(P<0.01),但10min缺氧可时间依赖性显著升高皮质神经元的膜电流密度(r=0.9803,P<0.01)和[Ca2+]i(r=0.9734,P<0.01);10μmol/L哇巴因可通过抑制低亲和力Na+,K+-ATP酶进一步增强此种缺氧所致的膜电流密度和[Ca2+]i增大作用(P<0.05或0.01),但10nmol/L哇巴因则通过抑制高亲和力Na+,K+-ATP酶显著降低缺氧对二者的增大作用(P<0.05或0.01)。结论:Na+,K+-ATP酶活性改变参与了皮质神经元的缺氧性损伤,其中高亲和力Na+,K+-ATP酶与皮质神经元缺氧性损伤保护作用有关,而低亲和力Na+,K+-ATP酶则与其缺氧性损伤有关。

Na^＋，K^＋-ATP酶不参与慢性心衰豚鼠心肌细胞钙瞬变的减小

目的研究Na+,K+-ATP酶是否参与慢性心衰(CHF)豚鼠心肌细胞钙瞬变的减小。方法采用降主动脉缩窄(CDA)法和异丙肾(ISO)法建立豚鼠慢性心衰模型;酶解法急性分离左室心肌细胞;采用无机磷法测定心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性,采用RT-PCR和Western blot检测CHF心肌Na+,K+-ATP酶α1、α2亚单位在mRNA水平和蛋白水平的表达。结果CDA法致心衰后Na+,K+-ATPα1、α2亚单位在mRNA水平均明显减少,ISO法α1明显减少,α2无变化;但两种方法致豚鼠CHF后,心肌细胞Na+,K+-ATP酶α1亚单位在蛋白水平的表达及酶活性均无改变。结论豚鼠CHF后钙瞬变的减小,没有Na+,K+-ATP酶的参与。

ZnO纳米粒子通过线粒体通路抑制小鼠光感受器细胞Na^＋/K^＋-ATP酶表达和活性的作用研究

氧化锌(ZnO)纳米粒子已被发现具有生物毒性,氧化应激被认为是最重要的因素之一。前期实验证实,ZnO纳米粒子能显著减少锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)蛋白的表达,降低Mn SOD活性。本文通过检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、线粒体活性氧(ROS)水平和膜电位(Δφm)、延迟整流钾电流变化和Na^+/K^+-ATP酶的表达及活性等变化,检测ZnO纳米粒子对小鼠光感受器细胞的细胞毒作用。结果表明,ZnO纳米粒子可显著增强小鼠光感受器细胞中LDH的释放、增加线粒体内ROS水平并下调Δφm、阻断延迟整流钾电流,同时降低Na^+/K^+-ATP酶的表达及活性,从而对小鼠视网膜光感受器细胞产生细胞毒作用,提示ZnO纳米粒子可通过线粒体通路引起氧化应激,从而抑制小鼠光感受器细胞Na^+/K^+-ATP酶表达和活性,产生细胞毒性,导致细胞死亡。本文的研究结果有助于理解ZnO纳米粒子引起细胞毒性的作用机理。

α-青心酮对损伤的脑线粒体Na^+,K^+-ATPase活性和脑细胞耗氧的作用(英文)

目的 研究α- 青心酮对抗坏血酸和硫酸亚铁诱导脑线粒体Na+,K+ ATPase活性和脑细胞耗氧的作用。方法 采用无机磷法测定Na+,K+ ATPase活性,分光光度法检测脑线粒体膨胀和脂质过氧化物,氧电极法测定脑细胞耗氧量。结果 在抗坏血酸和硫酸亚铁的作用下,鼠脑线粒体Na+,K+ ATPase活性降低,线粒体膨胀和脑细胞脂质过氧化物升高。α- 青心酮抑制其抗坏血酸和硫酸亚铁诱导脑线粒体和细胞的损伤,增加Na+,K+ ATPase活性,降低脑线粒体膨胀和脑细胞脂质过氧化物生成。α- 青心酮还具有减少ADP刺激的脑细胞耗氧的作用。结论 α- 青心酮通过清除自由基和抗氧化作用保护脑细胞结构和功能的完整。

Na^(+)/K^(+)-ATPaseβ亚基研究进展

Na^(+)/K^(+)-ATP酶(Na^(+)/K^(+)-ATPase,NKA)是细胞膜上主要由α、β亚基组成的异二聚体,具有酶的活性和转运功能。α为催化亚基、β为调节亚基。其中α亚基研究的较为广泛。随着研究的深入,近年来对β亚基有了许多新的认识。β亚基不仅参与细胞内外Na^(+)/K^(+)交换的离子泵功能,还参与细胞连接和信号转导功能。深入研究β亚基分子结构特征、功能为疾病的发生发展及诊断等提供实验依据。

盐度胁迫对彩虹明樱蛤存活、抗氧化酶和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性的影响

为探究彩虹明樱蛤(Moerella iribescens)对盐度胁迫的适应能力和调节机制,对其进行急性盐度胁迫实验,在盐度5~50之间设定10个盐度梯度(5,6,8,11,14,18,23,30,39,50),观察死亡情况。结果显示,盐度胁迫96 h后,盐度50组死亡率为100%,盐度39、30、23、6、5死亡率分别为43.3%、6.7%、3.3%、1.7%、8.3%,而盐度8~18之间的4个组中未发现死亡个体。根据急性胁迫实验结果设置5个盐度梯度(6、12、18、24、30),测定0、24、48、72、96 h鳃和消化腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性变化。结果显示,在同一盐度胁迫下,彩虹明樱蛤鳃和消化腺的SOD、CAT、GSH-Px和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性随时间的变化呈先上升后下降并趋于稳定的变化趋势,不同盐度组SOD、CAT和GSH-Px活性在24 h或48 h达到高峰,不同盐度组Na^(+)/K^(+)-ATP活性在48 h或72 h达到高峰。研究表明,彩虹明樱蛤的适宜盐度为8~18,3种抗氧化酶对盐度胁迫响应时间短于Na^(+)/K^(+)-ATP酶。研究从生存适应和应激相关酶活性角度探讨了彩虹明樱蛤对盐度的响应,可为其养殖和保育提供科学依据。

盐度驯化对史氏鲟鳃Na^+/K^+-ATP酶活力、血清渗透压及离子浓度的影响

对史氏鲟在盐度驯化过程中鳃Na+/K+-ATP酶活力、血清渗透压及血清离子(Na+、K+、Cl-)浓度进行了检测和分析,探讨了史氏鲟驯化过程中血清渗透压调节机制。研究表明:史氏鲟在不同盐度(10、20、25)下经过驯化,鳃Na+/K+-ATP酶活力显著高于对照组鳃Na+/K+-ATP酶活力(P<0.05),其活力是对照组的2~2.5倍。驯化过程中,3种不同盐度阶段下鳃Na+/K+-ATP酶活力首先表现为下降,随着驯化时间的延长,活力逐渐增加,最后下降并趋于平稳。血清渗透压也随盐度的增加而上升,盐度10时最高,达到(328.77±26.78)mmol.kg-1,此后逐渐下降并稳定在290mmol.kg-1左右,略高于淡水中血清渗透压。不同盐度下,血清渗透压和鳃Na+/K+-ATP酶活力的变化趋势相同。3种不同盐度下史氏鲟血清K+浓度平均值保持在3.00~3.30mmol.L-1之间,与对照组相比无显著差异(P>0.05)。3种盐度下血清Na+和Cl-浓度变化趋势基本一致,随着盐度的增高而增高,盐度20时达到最高。盐度20以下血清Na+和Cl-含量没有显著差异(P>0.05)。史氏鲟血清渗透压调节可以分为3个阶段:一是应激反应阶段,主要表现为鳃Na+/K+-ATP酶活力受到抑制,陡然下降;二是主动调节阶段,鳃Na+/K+-ATP酶被重新激活,且活力逐渐上升;三是适应阶段,鳃Na+/K+-ATP酶趋于平稳。

卵磷脂对花尾胡椒鲷幼鱼Ca^(2+)-ATP酶和Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

为探索卵磷脂影响幼鱼生长存活的作用机制 ,采用不同卵磷脂添加量的配合饲料投喂花尾胡椒鲷(Plectorhynchuscinctus)幼鱼 ,采用孔雀绿比色法同步测定幼鱼的Ca2 + ATP酶和Na+,K+ ATP酶活性。结果表明 ,饲料中添加适量卵磷脂可显著提高花尾胡椒鲷幼鱼Ca2 + ATP酶和Na+,K+ ATP酶活性 ,且卵磷脂含量为3 %的配合饲料投喂的花尾胡椒鲷幼鱼Ca2 + ATP酶活性最高 ,而卵磷脂含量为2 %的Na+,K+

NaCl对咸海卡拉白鱼血清离子、皮质醇和组织Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

将卡拉白鱼(Chalcalburnus chalcoides aralensis)在分别含NaCl 0,2,4,6,8 g/L的水体中饲养30 d后发现,NaCl质量浓度2 g/L和4 g/L组鱼相对增重率与对照组相比无显著性差异,生长良好;6 g/L和8 g/L组鱼相对增重率低于对照组(P<0.05),生长受抑制。血清渗透压随盐度升高而增高(P>0.05);NaCl 4,6,8 g/L组血的Na+,Cl-浓度高于对照组(P<0.05);6 g/L和8 g/L组血K+浓度低于对照组(P<0.05);鳃Na+,K+-ATP酶活性除8 g/L组下降外,其余各组鱼均高于对照(P<0.05);血清皮质醇水平随NaCl的升高而呈线性增加的趋势(P>0.05)。

喹乙醇对鲤鳃组织Na^+、K^+-ATP酶活性及血浆生化指标的影响

用含不同喹乙醇剂量的饲料饲喂健康鲤鱼种,研究饲料中不同喹乙醇剂量对鲤体成分含量、血浆生化指标以及鲤鳃组织Na+、K+ ATP酶活性的影响,探讨喹乙醇对鲤的生化毒性。试验分成6 个喹乙醇处理组(0、200、400、800、1 600、3 200 mg/kg),试验期60 d。试验结束时分别从各组中采血、取全鱼样和鱼鳃样,进行不同指标测试。结果表明,喹乙醇使鱼体脂肪含量轻度上升,使灰分沉积量显著降低,并呈现剂量-反应关系。与对照组比较,在较高喹乙醇剂量下,谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)活性降幅较大,血浆中葡萄糖(GLU)、胆固醇(CHO)、总胆红素(T-B)、直接胆红素(D-B)、高密度脂蛋白(HDL)、白蛋白(ALB)、K+、Ca2+、P含量升高, 肌酐(CRE)和CO2含量降低,其他测定指标变化不明显。鳃组织中Na+、K+ ATP酶活性随喹乙醇剂量的升高而呈逐渐下降的趋势,呈现剂量效应关系,喹乙醇剂量达1 600 mg/kg以上时,Na+、K+ ATP酶活性显著降低。结论:1 600 mg/kg以上的喹乙醇剂量可以明显干扰鲤的正常生化代谢功能。

家兔循经组织不同温度改变对Na^+/K^+-ATP酶活性及P物质含量的影响

目的 :观察循经温度现象与Na+/K+ ATP酶活性变化及血管调控物质SP功能活动的关系。方法 :①用红外热像技术观察循经出现的温度变化。② )用酶学方法测定Na+/K+ ATP酶活性 ,放射免疫方法测定P物质 (SP )含量。结果 :①左后肢外侧和右后肢内侧循经高温区组织Na+/K+ ATP酶活性均高于对照区组织 (P <0 .0 5、P <0 .0 1 ) ;②左后肢外侧和右后肢内侧循经高温区组织的SP含量较对照区组织有升高趋势 ,但均无统计学差异 (P >0 .5,>0 .1 )。结论 :①家兔循经出现温度较高组织的Na+/K+ ATP酶活性较非高温区组织的代谢活跃 ;②家兔循经高温区组织P物质水平有一定增高 。

辣椒碱对小菜蛾的驱避活性及其体内谷胱甘肽-S-转移酶和Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

采用常规生测方法和酶活力测定方法,初步研究了辣椒碱对小菜蛾Plutella xylostella L.的产卵忌避和拒食作用,及其对小菜蛾体内谷胱甘肽-S-转移酶、Na+,K+-ATP酶活性的影响,以期阐明辣椒碱对害虫的作用机制。结果表明,辣椒碱对小菜蛾表现出较强的产卵忌避活性和拒食活性。在6.25×104mg/L浓度下,处理24h辣椒碱对小菜蛾的非选择性产卵忌避率达96.55%,选择性产卵忌避率为84.30%;在相同浓度下,处理48h辣椒碱对小菜蛾的非选择性拒食率达81.47%,选择性拒食率为69.69%。另外,经1.25×105mg/L辣椒碱不同时间处理后,小菜蛾体内的谷胱甘肽-S-转移酶酶活力和Na+,K+-ATP酶活力与对照相比均产生了波动,处理18h时小菜蛾体内GSTs活力最高,为152.01U·mg-1pro·min-1,处理1h时小菜蛾体内Na+,K+-ATP酶活力最高,为19.99U·mg-1pro·min-1。结果说明辣椒碱能够影响小菜蛾产卵和取食行为,并且对其体内的酶系也产生了影响。

脑缺血和NBP预处理对脑缺血沙鼠NGB和mit-Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

目的探讨丁基苯酞(NBP)对脑缺血沙鼠脑红蛋白(NGB)和线粒体N a+,K+-ATP(m it-N a+,K+-ATP)酶活性的影响。方法将蒙古沙鼠66只随机分为假手术组、脑缺血组、NBP预处理组。采用颈总动脉结扎的方法制作脑缺血模型。分别采用免疫组化染色及化学比色法检测NGB阳性细胞数和m it-N a+,K+-ATP酶活性。结果NBP预处理组NGB表达量在缺血1、10、30 m in时较脑缺血组显著增多(P<0.05);两组在缺血1、5、30、60 m in时m it-N a+,K+-ATP酶活性有统计学差异(P<0.05);NBP预处理组m it-N a+,K+-ATP酶活性与NGB表达量呈负相关(P<0.01)。结论NBP可促进脑缺血时NGB的表达,维持m it-N a+,K+-ATP酶活性。

人参皂甙对犬心肌Na^+、K^+-ATP酶活力的影响

人参茎叶总皂甙(GNS)和人参根总皂甙(GRS)10、20和40mg/kg,显著抑制犬心肌细胞膜Na^+,K^+-ATP酶的活力;人参茎叶二醇组皂甙(PDS)和三醇组皂甙(PTS)5、10和20mg/kg,也显著抑制Na^+,K^+-ATP酶的活力。离体实验表明:GNS、GRS、PDS和PTS在0.01、0.10和1.00g/L,对犬心肌细胞膜Na^+,K^+-ATP酶的活力均具有抑制作用。提示人参的正性肌力作用可能与其对心肌Na^+,K^+-ATP酶的抑制有关。

海枫藤提取物对Na^+,K^+-ATP酶活力的影响

目的通过该研究确证彝族传统草药——海枫藤中是否含具有强心作用的活性成分,并初步了解该活性成分的存在部位及药效。方法运用大鼠心肌Na+,K+-ATP酶活力测定方法检测海枫藤提取物中是否具有强心类物质。结果海枫藤茎、叶中均含有抑制Na+,K+-ATP酶活力的物质;茎提取物的抑制效果明显优于其它,且其强心活性与剂量呈正相关;同强心苷类物质地高辛比较,海枫藤茎水提取物与地高辛对心肌Na+,K+-ATP酶活力的抑制作用无显著性差异。结论海枫藤提取物中具有类似于强心苷的活性成分存在,该活性物质主要存在于茎中,且茎的水提取物中含有的强心成分与地高辛的强心作用相近。

大鼠全脑缺血再灌注损伤神经元Na^+,K^+-ATP酶α亚基的变化

目的:研究大鼠全脑缺血再灌注损伤后,神经元Na+,K+-ATP酶α亚基三种异构体的变化.方法:采用四血管闭塞法(Pu lsinelli 4-VO)制作全脑缺血15 m in再灌注30m in损伤模型,采用免疫组织化学技术和RT-PCR的方法,检测缺血及再灌注损伤Na+,K+-ATP酶α亚基的改变.结果:缺血及再灌注损伤后,神经元明显水肿;假手术组海马和皮层神经元上主要表达有α1和α3亚基,且α3的含量较α1多,缺血15 min及再灌注30 min后,海马神经元α1和α3亚基的表达明显减少(P<0.05,P<0.01),缺血15 min后,皮层神经元α1和α3亚基的表达无明显改变,而再灌注30 min后表达减少(P<0.05);缺血及再灌注时α1和α3亚基在mRNA水平上的表达与假手术组相比无明显改变.结论:Na+,K+-ATP酶α1和α3亚基可能参与了缺血再灌注脑损伤.

几种人参皂甙对大鼠肾脏微粒体Na^+,K^+-ATP酶的抑制作用

人参皂甙Rg组、Rb组、Rg_1、Rb_1对大鼠肾脏微粒体Na^+,K^+—ATP酶均有抑制作用,IC_(50)分别为402,74μg/ml,15和50μmol/L。Rb组、Rg_1和Rb_1的抑酶作用可逆;增加K^+可竞争性拮抗Rg_1和Rb_1的抑酶作用,但Na^+对此作用无明显影响。动力学研究表明,Rg_1和Rb_1抑制Na^+,K^+—ATP酶,对底物ATP似为反竞争性抑制剂。

久效磷对黄鳝过氧化氢酶和Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

采用静态急性毒性试验方法,研究了久效磷对黄鳝的鳃、肝脏和肾脏组织中过氧化氢酶(CAT)和Na+,K+-ATP酶活性的影响.结果表明:在水温为(20±2)℃的条件下,久效磷对黄鳝的96 h LC50为3.27 mg/L.经0.25,0.50,1.00和2.00 mg/L的久效磷暴露96 h后,0.25和0.50 mg/L暴露组黄鳝3种组织中的CAT活性均比对照组高,其中0.25 mg/L暴露组有显著升高(P<0.05);1.00和2.00 mg/L暴露组的CAT活性受到明显抑制,其中2.00 mg/L暴露组与对照组相比抑制作用显著(P<0.05);不同质量浓度的久效磷对黄鳝3种组织中的Na+,K+-ATP酶活性均表现出抑制作用,Na+,K+-ATP酶活性对久效磷的敏感性由大到小的顺序为鳃>肾脏>肝脏.