补心方对慢性心衰大鼠心肌Na^+-K^+ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)ATP酶及琥珀酸脱氢酶的作用研究

目的研究补心方对心梗后早期大鼠Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和琥珀酸脱氢酶(Succinate Dehydrogen-ase,SDH)的影响。方法清洁级大鼠60只,采取结扎冠状动脉左前降支中上1/3部,造成AMI模型,手术成功存活动物随机分为心阳高、中、低剂量组及曲美他嗪组、模型组、假手术组共6组,均予灌胃给药或蒸馏水8周。8周后采用分光光度计检测心梗后早期大鼠心肌Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶以及SDH水平。结果对心肌细胞ATP酶的影响:模型组大鼠ATP酶含量及SDH活性较假手术组降低(P<0.01)。补心方干预后,心阳高剂量、中剂量、低剂量组Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和SDH活性较模型组均升高(P<0.01),但低于假手术组及曲美他嗪组,且随剂量增加,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶含量和SDH活性逐渐增强。结论补心方可增强与Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶含量,提高SDH活力,改善线粒体功能,从而保护心肌,改善慢性心衰大鼠症状,延缓慢性心衰的发生发展。

中药补肾方对心力衰竭大鼠Na^+-K^+ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)ATP酶和琥珀酸脱氢酶的作用研究

目的研究补肾方对心力衰竭大鼠Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和琥珀酸脱氢酶(SDH)的作用。方法 60只大鼠随机分为模型组、假手术组、曲美他嗪组、补肾低、中、高剂量组,每组10只。采用结扎冠状动脉前降支法制备心力衰竭大鼠模型,术后2周开始灌胃,分别给予药物干预8周。8周后通过颈动脉插管记录大鼠血流动力学改变,包括左室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVEDP)、左室内压上升下降最大速率(±LVdp/dtmax);采用分光光度计检测心力衰竭大鼠心肌Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶以及SDH水平。结果模型组大鼠心肌LVSP和+LVdp/dtmax较假手术组明显降低(P<0.01),而LVEDP和-LVdp/dtmax明显升高(P<0.05);补肾方干预后,中、高剂量大鼠心肌收缩、舒张功能明显优于模型组(P<0.01),以高剂量补肾方改善心力衰竭大鼠心功能明显。补肾方干预后,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和SDH活力高于模型组,但低于假手术组,且随补肾方剂量增加,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和SDH活力逐渐增强。结论补肾方可改善心力衰竭大鼠的心功能,可能与Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶以及SDH活力增强相关。

高胆红素血症大鼠脑干听觉诱发电位与脑组织NO含量及Na^+-K^+ATP酶活性的变化

目的:探讨脑干听觉诱发电位(BAEP)在早期监测高胆红素血症听力和脑损伤中的作用及脑组织一氧化氮(NO)与胆红素诱导的听力和脑损伤的关系。方法:15dSD大鼠腹腔注射不同剂量(30mg/kg、60mg/kg、90mg/kg、120mg/kg和150mg/kg)胆红素溶液以制备高胆红素血症动物模型,微量胆红素测定仪测定血清胆红素浓度,重氮法测定脑组织胆红素浓度,定磷法测定脑组织中Na+-K+ATP酶活性,硝酸酶还原法测定脑组织NO含量,诱发电位仪检测BAEP。结果:建模后高剂量组(120mg/kg和150mg/kg)部分大鼠出现异常神经行为活动;建模6h后,除低剂量(30mg/kg)组外,各实验组大鼠血清和脑组织胆红素浓度及脑组织NO含量显著升高,脑组织Na+-K+ATP酶活性显著降低,BAEP的波峰潜伏期(PL)和波峰间潜伏期(IPL)显著延长;且BA-EP的PL与IPL和脑组织NO含量与Na+-K+ATP酶活性的变化均与脑组织胆红素水平显著相关。结论:BAEP的PL和IPL是早期监测高胆红素血症听力和脑损伤的无创性指标,NO的过量产生可能参与了胆红素诱导的听力和脑损伤的发病过程。

Ad-HIF-1α双突变体对大鼠缺血心肌及Na^+-K^+ ATP酶的影响

目的:研究重组腺病毒低氧诱导因子-1α双突变体基因对心肌梗死大鼠缺血心肌损伤程度及Na^+-K^+ATP酶的影响.方法:36只雄性SD大鼠建立急性心肌梗死模型,随机分成3组,分别为生理盐水组(Saline组,n=12)、腺病毒空载体组(Ad-Null组,n=12)、Ad-HIF-1α-564/402组(n=12).在术后即刻分别肌注生理盐水、AdNull、Ad-HIF-1α-564/402 0.1 m L,病毒滴度1.0×108PFU.术后7 d,记录大鼠24 h饮食量、饮水量及体质量,观察大鼠的精神及运动状况.检测血清中肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白I、B型利钠肽浓度.进行血流动力学检测,测量左室收缩压、左室舒张末压、左室最大上升/下降速率.采用分光光度计法检测心肌梗死大鼠心肌Na^+-K^+ATP酶水平.结果:基因转染后7 d,3组大鼠饮食量、饮水量、体质量无统计学差异.Ad-HIF-1α-564/402组大鼠较Saline组、AdNull组反应更为灵敏,活动耐量增加.CK-Mb、c Tn I、BNP血清浓度在Ad-HIF-1α564/402组均较其他两组为低,3组间有统计学差异(P<0.05).Ad-HIF-1α-564/402组大鼠LVSP、±LVdp/dtmax明显高于Saline组、Ad-Null组(P<0.05).Ad-HIF-1α-564/402组大鼠LVEDP明显高于Saline组、Ad-Null组(P<0.05),上述指标Saline组、Ad-Null组均无统计学差异(P>0.05).分光光度计结果显示:Na^+-K^+ATP酶水平3组间无统计学差异(P>0.05).结论:AdHIF-1α-564/402能减轻心肌细胞梗死程度,保护心脏功能,对Na^+-K^+ATP酶水平无明显影响.

X射线辐射对小鼠肾组织中乳酸脱氢酶、Na^+-K^+ATP酶活性及Caspase-3蛋白、Bax蛋白表达的影响

为了探究X射线辐射对小鼠肾组织乳酸脱氢酶(LDH)、Na+-K+ATP酶活性及Caspase-3蛋白、Bax蛋白表达的影响,对96只成体小鼠用不同剂量的X射线(0、1、3、5Gy)进行全身辐射,分别于辐射后5、10、15d和20d,用比色法测量小鼠肾组织结构中乳酸脱氢酶、Na+-K+ATP酶的活性变化,用免疫组化法测量小鼠肾组织结构中Caspase-3蛋白、Bax蛋白表达的变化.结果发现:经X射线辐射后小鼠肾组织乳酸脱氢酶活性有不同程度增加,Na+-K+ATP酶活性有不同程度的降低,Caspase-3蛋白和Bax蛋白的表达增强.据此认为,X射线辐射剂对小鼠肾脏组织细胞有明显的损伤效应.

Aβ_(1-40)脑内注射对大鼠海马Na^+-K^+-ATP和Ca^(2+)-ATP酶活性的影响及加减地黄饮子的干预作用

目的观察加减地黄饮子对Aβ1-40脑内注射对大鼠脑组织Na+-K+-ATP酶的影响。方法以大鼠海马注射β淀粉样蛋白导致的老年性痴呆模型,并以正常老龄鼠为空白对照,西药脑复康为阳性对照,对加减地黄饮子预防组和加减地黄饮子治疗组从Na+-K+-ATP和Ca2+-ATP酶活性的影响进行了研究。结果加减地黄饮子具有提高三磷酸腺苷酶活性的作用。结论提高三磷酸腺苷酶活性的可能是加减地黄饮子防治老年性痴呆的机制之一,为补肾活血化痰开窍治疗老年性痴呆的观点提供了部分实验依据。

熏洗一号方对大鼠失神经支配骨骼肌乙酰胆碱酶与Na^+-K^+-ATP酶影响的实验研究

目的:研究中药熏洗一号方对失神经支配骨骼肌乙酰胆碱酶与Na+-K+-ATP酶的影响。方法:雄性SD大鼠120只,造模成功后随机分为熏洗一号方组、丹参组、模型组和空白对照组,每组各30只。各组实验动物分别在术后7d、14d和21d处死,股直肌肌腹组织块取材,常规HE染色,分别观察失神经支配后骨骼肌结构,乙酰胆碱酯酶活性和骨骼肌匀浆液Na+-K+-ATP酶改变。结果:⒈HE染色:按优劣排列依次为熏洗一号方组、丹参组、模型组。⒉乙酰胆碱酯酶活性:随着试验观察时间的推移,熏洗一号方组乙酰胆碱酯酶活性逐渐增强,最后接近正常水平,染色均匀,运动终板结构规则,呈椭圆形或卵圆形花纹状结构,与空白组相比(P>0.05);模型组和丹参组乙酰胆碱酯酶活性弱,与空白对照组相比(P<0.01)。⒊骨骼肌匀浆液Na+-K+-ATP结果:术后7d各组Na+-K+-ATP酶组间比较没有统计学意义(P>0.05)。术后14d熏洗一号方组与空白对照组对比(P<0.05)。术后21d,熏洗一号方组与空白对照组对比(P<0.01),且熏洗一号方组Na+-K+-ATP酶含量最高。结论:熏洗一号方能延缓神经肌肉运动终板(Motor endplate,MEP)与效应器的变性,改善失神经支配骨骼肌的营养供应、延缓骨骼肌的萎缩。

有氧游泳运动对小鼠心肌Na^+-K^+-ATP酶活性的影响

目的观察有氧游泳运动对小鼠心肌Na^+-K^+-ATP酶的影响。方法雄性ICR小鼠30只,随机分为正常对照组、有氧运动组、力竭运动组。观察有氧运动对小鼠体重、脏器系数、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及心肌肌浆网Na^+-K^+-ATP酶活性的影响。结果与正常对照组比较,有氧运动可显著提高小鼠血清SOD水平(P<0.05),降低MDA水平(P<0.05),增加小鼠心肌Na^+-K^+-ATP酶的活性(P<0.05)。结论有氧运动可以增强小鼠心肌Na^+-K^+-ATP酶的活性,可能与其降低机体自由基水平有关。

力竭性运动对大鼠红细胞Na^+-K^+-ATP酶活性与红细胞免疫功能的影响

对大鼠进行力竭性跑台运动的实验研究,测定大鼠红细胞Na+-K+-ATP酶的活性与红细胞免疫功能的变化情况。结果表明力竭性跑台运动引起大鼠红细胞Na+-K+-ATP酶活性与红细胞免疫功能显著下降,两者具有显著的相关性。

黄竹清脑颗粒对痰热腑实证脑出血大鼠IL-6、Na^+-K^+-ATP酶活性及脑含水量的影响

目的:探讨黄竹清脑颗粒对痰热腑实型脑出血大鼠模型血清中IL-6、Na+-K+-ATP酶的活性及脑含水量的影响。方法:采用脑内注射胶原酶I-肝素混合液配合大鼠自体粪便灌胃的方法建立大鼠脑出血痰热腑实证模型,将SD大鼠随机分为空白对照组、黄竹清脑颗粒大、中、小剂量组、二陈汤提取液组、鲜竹沥口服液组、痰热腑实证模型组,分别采用放免法及光化学比色法测定各组大鼠血清中IL-6、脑组织匀浆中Na+-K+-ATP酶的活性及脑组织含水量的变化。结果:(1)模型组与空白组相比,血清中IL-6水平及脑组织含水量明显升高(P<0.01),脑组织中Na+-K+-ATP酶明显降低(P<0.01);(2)黄竹清脑颗粒大、中剂量组疗效均明显优于二陈汤组、鲜竹沥组及黄竹清脑颗粒小剂量组。结论:黄竹清脑颗粒可显著提高脑组织中Na+-K+-ATP酶的活性,降低血清中IL-6的含量,具有减轻细胞内水肿、抑制炎性反应,保护脑神经细胞的作用;并对痰热腑实型脑出血有明显的改善作用。

Na^+-K^+-ATP酶α1亚基DR多肽单克隆抗体的制备和应用

目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^+-ATPaseα1亚基DR mAb。ELISA测定杂交瘤细胞上清中mAb效价,斑点免疫杂交、Western blot法及免疫荧光细胞化学染色法检测单克隆的特异性,采用Senso LyteFDP蛋白磷酸酶定量试剂盒检测Na^+-K^+-ATPase活性,高糖细胞损伤实验检测DR mAb对高糖引起细胞损伤的保护作用。结果成功制备3株稳定分泌抗体的阳性细胞株。选择强阳性DRm217细胞株,制备腹水进一步验证。免疫荧光细胞化学染色、免疫斑点杂交及Western blot法结果显示,DRm217 mAb能够特异性结合在细胞膜表面,识别Na^+-K^+-ATPase的DR多肽。DRm217能够提高Na^+-K^+-ATPase活性,对高糖引起的细胞损伤具有一定的保护作用。结论成功制备了针对Na^+-K^+-ATPase DR多肽的mAb。

宁心律康颗粒调节Na^+-K^+-ATP酶抗心律失常的实验研究

目的:观察宁心律康颗粒对静脉注射哇巴因诱发心律失常模型豚鼠的的治疗作用,并探讨其对Na+-K+-ATP酶的影响。方法:采用静脉注射哇巴因法制备心律失常豚鼠模型,观察宁心律康颗粒用药后对模型豚鼠出现室性早搏、心室颤动和心脏停搏时哇巴因用量,及心肌组织Na+-K+-ATP酶的影响。结果:①宁心律康颗粒能够显著增加诱发豚鼠出现心律失常时哇巴因的剂量;②宁心律康颗粒能够显著提高模型豚鼠心肌组织Na+-K+-ATP酶活力。结论:宁心律康颗粒能够通过调节心肌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶活力,达到抗心律失常的作用。

低温胁迫对黄姑鱼(Nibea albiflora)抗氧化酶、Na^＋/-K^＋-ATP酶及Hsp70 蛋白含量的影响

为探讨低温处理对黄姑鱼幼鱼生理机能的影响,以18℃为对照组,设置8℃、10℃和14℃3个低温胁迫组,测定不同温度急性胁迫对黄姑鱼幼鱼(Nibea albiflora)超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、Na^+/-K^+-ATP酶活力以及热休克蛋白70(Hsp70)蛋白含量的影响。研究结果表明,低温胁迫组(8℃、10℃和14℃)的SOD和CAT酶活力随着胁迫温度的降低及其胁迫时间的延长呈先升高后降低的趋势,在72 h时恢复到对照组水平。肌肉中的Na^+/-K^+-ATP酶活力则随处理时间的延长呈现先降低后升高的趋势,10℃和14℃组能够在72 h时恢复到对照组水平,而8℃组则在72 h仍显著低于对照组。低温胁迫下黄姑鱼肌肉的Hsp70含量随着处理时间的延长呈先升高后降低趋势,10℃和14℃组能够在72 h时恢复到对照组水平,而8℃组则在72 h仍显著高于对照组。由此说明,SOD、CAT、Na^+/-K^+-ATP以及Hsp70蛋白参与了黄姑鱼低温胁迫应答过程,可以作为其低温胁迫应答的标志物。

男性不育患者AsAb及精液中No水平与Na^+-K^+-ATP酶检测的临床评价

目的探讨抗精子抗体(AsAb)及精液中一氧化氮(NO)水平Na+-K+-ATP酶活性与男性不育的关系。方法分别采用ELISA法、硝酸还原酶法、钼蓝分光光度法测定132名男性不育患者及56名正常生育男性血清AsAb(IgGI、gM、IgA),精液中NO水平及Na+-K+-ATP酶活性。结果男性不育组AsAb阳性率37.12%,显著高于正常生育组3.57%(P<0.0 1);男性不育组精液中N0水平151.6±29.7μmol/L,显著高于正常生育组78.9±23.5μmol/L(P<0.01);男性不育组精液中Na+-K+-ATP酶活性为24.42±8.47μmol Pi/mg(Prot).h-1,显著低于正常生育组46.63±9.41μmolPi/mg(Prot).h-1(P<0.05)。结论血清AsAb是男性不育的确诊指标之一,精液中高水平NO与低Na+-K+-ATP酶活性可能是导致男性不育的原因之一。

力竭游泳运动对肠组织MDA、Free-SH、ATP含量、Na~＋-K~＋-ATPase和Ca^(2＋)-ATPase活性的影响

探讨力竭性运动引起的氧化应激对肠功能的影响及运动性肠功能紊乱的原因,32只SD雄性大鼠随机分为4组:即对照组(C);运动后即刻组EX;运动后30min组(EX30);运动后60min组(EX60),测定力竭性游泳后不同时相肠组织匀浆MDA、游离巯基和ATP含量。结果:运动后肠组织MDA含量在运动后30min、60min显著性增加(P<0.01);运动后Free-SH含量在运动后30min(P<0.05)和运动后60min后(P<0.01)显著下降;运动后30min组ATP含量显著下降(P<0.01);运动后30min,Ca2+-ATPase活性下降(P<0.05);运动后60min,Na+-K+-AT-Pase和Ca2+-ATPase活性均显著下降(P<0.05)。结论:运动源性自由基产生增加,使肠组织中游离巯基被氧化,导致ATP含量下降,Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性下降,可能是造成运动性肠功能紊乱的重要因素之一。

扶正助脉方对缓慢性心律失常大鼠一氧化氮、Na^+-K^+-ATP酶的影响

目的研究扶正助脉方对阳虚瘀阻证缓慢性心律失常大鼠一氧化氮(NO)、Na+-K+-ATP酶的影响,探讨其治疗缓慢性心律失常的作用机制。方法采用皮下注射氢化可的松造肾虚模型的基础上强迫大鼠游泳诱导劳倦过度并注射盐酸可乐定的方法,建立阳虚瘀阻证缓慢性心律失常大鼠模型。随机将大鼠分为高、中、低剂量组、模型对照组及空白对照组,测定大鼠心率及血清NO含量、Na+-K+-ATP酶活性。结果与模型对照组相比,高、中剂量组大鼠血清NO含量降低;低、中剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性升高,高剂量组大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性明显升高。结论扶正助脉方很可能是通过降低缓慢性心律失常大鼠血清NO含量,增高其Na+-K+-ATP酶活性达到抗心律失常作用。

力竭运动对大鼠心肌肌浆网Na^+-K^+-ATP和Ca^(2+)-ATP酶活性的影响

目的以力竭运动大鼠为模型,探讨力竭运动对大鼠心肌损伤的可能机制。方法将筛选后的雄性SD大鼠30只随机分为3组:安静对照组、有氧运动组、力竭运动组,每组10只。运动组每周运动5d,持续4周,于每周末次运动结束后称量大鼠体重。于实验结束后取大鼠心肌组织和血清,检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸(LD)及心肌组织中SOD、MDA、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的变化;观察骨骼肌LD含量;采用定磷法检测心肌肌浆网Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶的活性。结果与对照组比较,有氧运动组和力竭运动组血清和骨骼肌中的乳酸含量增加(P<0.05),血清SOD活力降低、MDA含量增加(P<0.05),心肌组织SOD、GSH-PX活性降低、MDA含量增加(P<0.05),心肌肌浆网Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活力降低(P<0.05);与有氧运动组比较,力竭运动组血清和骨骼肌乳酸含量增加(P<0.05),血清SOD活力降低不明显(P>0.05)、MDA含量增加(P<0.05),心肌SOD和GSH-PX活力降低、MDA含量增加(P<0.05),心肌肌浆网Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活力降低(P<0.05)。结论力竭运动可以降低机体抗氧化酶活性,增加自由基的产生,使心肌肌浆网Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活力降低。

丹红注射液对糖尿病大鼠肾脏NO和Na^+-K^+-ATP酶活性的影响

目的:探讨丹红注射液对糖尿病大鼠肾脏NO和Na^+-K^+-ATP酶活性的影响。方法:清洁雄性SD大鼠,STZ诱导糖尿病大鼠20只,随机分为糖尿病组和丹红治疗组,另设正常对照组10只,丹红治疗组腹腔注射2m L/kg丹红注射液,其余给予等量生理盐水。4周后,检测血糖、血肌酐、血尿素氮,放射免疫法检测24h尿白蛋白定量,测定肾组织NO水平、NOS和Na^+-K^+-ATP酶活性。结果:与正常组比较,糖尿病大鼠血糖、蛋白尿、血肌酐、血尿素氮升高,肾组织NO、NOS升高,Na^+-K^+-ATP酶活性降低;与DM组相比,丹红治疗组蛋白尿、血肌酐、血尿素氮减轻,NO、NOS降低,Na^+-K^+-ATP酶活性升高。结论:丹红注射液可能通过抑制NO水平和Na^+-K^+-ATP酶活性保护糖尿病大鼠的肾脏。

温病湿热证大鼠模型肝线粒体K^+-Na^+-ATP酶活力变化的对比研究

[目的]探讨多因素复合造模方法对模型大鼠能量代谢的影响。[方法]分为正常组、湿热模型组(高脂+高温高湿+大肠杆菌)、模型对照组(普食+高温高湿+大肠杆菌);运用定磷法测肝线粒体Na+-K+-AT Pase活性。[结果]模型组与模型对照组肝线粒体Na+-K+-AT Pase活性均较正常组显著降低,但两者比较无显著性差异。[结论]肝线粒体Na+-K+-AT Pase活性显著降低,是湿热证模型的病理基础之一,与是否高脂饮食无关。

心肌Na^+,K^+-ATP酶在抑郁症时的活性及mRNA表达

目的探讨Na+,K+-ATP酶在抑郁症发病中的作用及其和单胺类神经递质之间的关系。方法对SD大鼠进行慢性随机刺激建立抑郁症模型,检测大鼠心肌Na+,K+-ATP酶的活性及mRNA表达,海马组织及血液中去甲肾上腺素(NA)和5-羟色胺代谢物5羟-吲哚乙酸(5-H IAA)水平。结果抑郁症大鼠心肌Na+,K+-ATP酶的转录水平下调(P<0.01);酶的活性明显降低(P<0.01);海马及血浆中的NA及5-H IAA水平显著下降(P<0.01)。结论推测抑郁症时神经体液因素的变化可能是引起心肌细胞Na+,K+-ATP酶分子变化的原因之一,该酶在抑郁症的发病机制中有一定的生理和病理意义。