脑溢安对缺氧大鼠脑微血管内皮细胞VEGF蛋白表达的影响

目的:观察脑溢安血清对体外缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法:大鼠用脑溢安浸膏连续灌胃3d后,心脏内采血分离出血清;用新生7dSD大鼠脑内分离培养的微血管内皮细胞(RCMEC)移入厌氧培养箱造成缺氧模型;MTT法测定细胞活性;免疫细胞化学及Wersternblotting研究脑微血管内皮细胞VEGF蛋白表达。结果:缺氧18h脑溢安组OD值较对照组增高(P<0. 05)。缺氧损伤的脑微血管内皮细胞内VEGF蛋白表达增强,脑溢安血清组VEGF蛋白的表达水平高于对照组(P<0. 01)。结论:缺氧可诱导脑微血管内皮细胞VEGF蛋白的表达;脑溢安可以上调VEGF蛋白的表达,这可能是脑溢安对缺氧的脑微血管内皮细胞的保护作用机制之一。

脑溢安颗粒剂主要药效学研究

口服脑溢安颗粒剂预防性给药，能使兔偏瘫记分下降，减轻脑水肿，ｉｇ５４．３２ｇ／ｋｇ·ｄ（以生药量计，以下同）能明显降低兔脑组织丙二醛ＭＤＡ的含量，升高超氧化物歧化酶ＳＯＤ含量，能使去甲肾上腺素ＮＥ含量下降。

脑溢安对大鼠缺氧神经干细胞丝氨酸/苏氨酸激酶磷酸化的影响

目的 :观察脑溢安 (NYA)对大鼠神经干细胞 (neuralstemcell,NSC)缺氧损伤后磷酸化丝氨酸 /苏氨酸激酶 (phosphorylatedserine/threoninekinase,phosph Akt)表达的影响 ,探讨该药对缺氧神经干细胞的保护作用机制。方法 :用分离、培养的神经干细胞造成缺氧模型 ,以正常大鼠血清和含脑溢安的大鼠血清对缺氧后的神经干细胞进行干预 ,用含NYA血清、正常血清、无血清的培养液干预缺氧的神经干细胞 ,Westernblotting检测神经干细胞缺氧损伤后Akt的磷酸化情况并用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法 [terminal(TdT) mediateddUTP biotinnickendlabeling ,TUNEL]检测细胞凋亡情况。结果 :NYA血清缺氧神经干细胞组Akt磷酸化较无血清、正常血清缺氧神经干细胞组明显增加 (P <0 .0 5 ) ,TUNEL阳性细胞数明显减少 (P <0 .0 5 )。结论 :用脑溢安血清干预缺氧损伤的神经干细胞 ,可上调Akt的磷酸化 ,减少缺氧的神经干细胞凋亡 。

实验性脑出血大鼠脑内皮质核因子-κB的表达及脑溢安的保护作用

目的研究实验性脑出血大鼠脑内核因子 —κB(NF—κB)p6 5及IκBα表达的变化及脑溢安对其影响。方法 95只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和脑溢安组。Ⅶ型胶原酶立体定位法建立脑出血模型 ,术后 3h、6h、1 2h、1d、4d、7d分别观察NF—κBp6 5和IκBα免疫组织化学的变化。结果模型组术后 3h即可见NF—κBp6 5和IκBα表达增强 ,1d后显著增多 ,4d达高峰 ,7d迅速下降。脑溢安组表达规律与模型组一致 ,但与模型组比较能明显降低NF—κBp6 5的表达和增加IκBα的表达 (P <0 .0 1 )。结论实验性脑出血大鼠脑内NF—κBp6 5和IκBα表达增强 。

脑溢安对脑出血大鼠脑内BDNFm RNA表达的影响

目的 观察脑出血模型大鼠脑内脑源性神经营养因子mRNA（BDNF mRNA）的分布以及中药脑溢安对其影响。方法 通过微量注射器向苍白球内注入Ⅶ型胶原酶0．4u制作脑出血模型，用原住杂交法观察脑出血后2、6、12h和l、4、7d共6个时间点BDNF mRNA的表达变化．以阳性细胞计数作为观察指标。结果 正常组、假手术组大鼠脑内皮质、海马、纹状体等处有BDNFmRNA的表达。脑出血后2h上迷部位BDNFIrIRNA的表达增高，但血肿中心区域未见表达信号，6h后上述部位表达信号继续增强，ld后达高峰，4d后表达开始减弱，7d后其表达水平继续下降但仍高于正常，14d后BDNFmRNA阳性细胞数量厦表达水平降至基础水平。两者的阳性细胞主要表达于神经元，其中在6h、1d,4d3个时间点上，两组阳性细胞计数比较有显著性差异（P〈0.01）。结论 脑溢安可促进脑出血后BDNF mRNA的表达。

脑溢安对脑出血肝阳化风证患者血浆内皮素和一氧化氮水平的影响

目的 :探讨脑溢安颗粒剂 (NYA)治疗脑出血的作用机制。方法 :6 5例急性脑出血患者随机分为 NYA组 (31例 )和西药组 (34例 )。分别采用 NYA或西药进行治疗 ,观察患者血浆内皮素 (ET)和一氧化氮 (NO)含量的变化及临床疗效。结果 :NYA组基本痊愈加显效率为 80 .6 % ,总有效率为 93.5 % ;西药组分别为 5 2 .9%及76 .5 %。急性期血浆 ET含量明显增高 ,NO含量明显降低 ;治疗 4周后 ,NYA组 ET和 NO基本恢复到正常范围。NYA组疗效明显优于西药组 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论 :NYA通过调节 ET和 NO水平来改善脑血管功能状态 。

脑溢安对过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用

目的 建立体外培养大鼠脑微血管内皮细胞过氧化氢损伤模型 ,并观察含脑溢安血清对其影响。方法 体外培养大鼠脑微血管内皮细胞 ,并用 6个浓度的过氧化氢分别作用 4个时间点 ,用MTT比色法根据测得的OD值选择适宜的损伤条件。用含脑溢安血清及PDTC干预培养细胞 ,再进行过氧化氢损伤 ,运用MTT法记录OD值。结果 0 12 5mmol/L过氧化氢作用 3 0min即可造成培养大鼠脑微血管内皮细胞损伤 ,用 5 %含脑溢安血清及 5 0 μmol/LPDTC提前干预后其OD值明显高于模型组 ( P <0 0 1)。结论 建立一种简便的大鼠脑微血管内皮细胞活性氧损伤模型 。