Ndfip1蛋白对神经细胞凋亡的保护作用探讨

目的探讨神经细胞损伤后高表达的Ndfip1蛋白对神经细胞凋亡的抑制作用及其可能机制。方法以SN-MC-1细胞(过表达Ndfip1的神经母细胞瘤细胞)及SH-SY5Y细胞作为研究对象,分别经过细胞培养及奥沙利铂作用后,通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 MTT法检测细胞增殖发现奥沙利铂对SH-SY5Y细胞、SN-MC-1细胞的增殖具有抑制效应,且具有剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测细胞凋亡实验发现高表达Ndfip1的SH-SY5Y(SN-MC-1)细胞凋亡率有所下降。结论奥沙利铂能够抑制神经细胞增殖,其增殖抑制效应可能是通过诱导细胞凋亡而实现,SN-MC-1细胞过表达的Ndfip1可能与NEDD4家族蛋白结合,通过泛素化清除错误折叠的蛋白,通过抗凋亡作用来保护神经细胞。

桂皮酸联合Ndfip1对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖与凋亡的协同效应

目的通过分别检测不同浓度不同作用时间的桂皮酸联合Ndfip1蛋白对人肝癌SMMC-7 721细胞增殖及凋亡作用的影响,阐述中药桂皮酸与Ndfip1蛋白对该肿瘤细胞的作用。方法采用MTT法检测不同浓度不同作用时间的桂皮酸单独及联合Ndfip1对人肝癌细胞SMMC-7 721增殖作用的影响;采用流式细胞术检测不同浓度不同作用时间的桂皮酸单独及联合Ndfip1对人肝癌细胞SMMC-7 721凋亡作用的影响。结果不同浓度的桂皮酸单独及联合Ndfip1作用于人肝癌SMMC-7 721细胞均可造成对细胞增殖的抑制及对细胞凋亡的促进,且联合作用优于单独作用,2者相比具有显著性差异。结论桂皮酸联合Ndfip1蛋白作用时,对人肝癌SMMC-7 721细胞增殖的抑制及对凋亡的促进均较桂皮酸单独作用有明显增强,表明2者的作用可能具有协同效应,这为进一步探索桂皮酸联合Ndfip1蛋白对肝癌细胞的作用奠定了基础。

人Ndfip1基因在转染MES23.5细胞中的表达

目的应用携带人Ndfip1(Nedd4family interacting protein 1)基因的质粒pCMV6-XL5-Ndfip1转染MES 23.5多巴胺能神经细胞,检测其在细胞中的表达。方法应用Lipofectamine法转染MES 23.5细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MES 23.5细胞中Ndfip1mRNA的表达。结果该表达载体转染MES23.5细胞后,细胞内Ndfip1mRNA的表达水平明显增加(t=-8.295,P<0.01)。结论 Ndfip1基因可在MES23.5细胞内表达,从而为进一步研究Ndfip1在神经元保护中的作用奠定了基础。