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人免疫缺陷病毒早期蛋白Nef的表达、纯化及免疫原性研究
1
作者
陆柔剑
齐建国
+5 位作者
邓瑶
王世峰
王文玲
辛伟
李仁清
阮力
《生物技术通讯》
CAS
2008年第3期358-361,共4页
目的:通过原核细胞表达人免疫缺陷病毒(HIV)Nef抗原,制备特异抗血清,为Nef抗原检测提供技术方法。方法:以HIV Botswana毒株基因组为模板,用PCR法获得Nef蛋白编码基因,将其克隆到pET30a载体中,在大肠杆菌中表达Nef融合蛋白;用纯化的融合...
目的:通过原核细胞表达人免疫缺陷病毒(HIV)Nef抗原,制备特异抗血清,为Nef抗原检测提供技术方法。方法:以HIV Botswana毒株基因组为模板,用PCR法获得Nef蛋白编码基因,将其克隆到pET30a载体中,在大肠杆菌中表达Nef融合蛋白;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得抗血清,用真核表达的Nef抗原对其特异性进行分析。结果:构建的Nef融合基因在大肠杆菌中获得表达,相对分子质量约为36×103,免疫BALB/c小鼠获得针对融合蛋白的高效价抗血清,ELISA抗体滴度为1∶6400;免疫荧光和Western blot检测表明,该抗血清能特异地与重组痘苗病毒表达的Nef抗原反应。结论:在大肠杆菌中表达了HIV Nef融合蛋白,制备了Nef融合蛋白的高效价小鼠免疫血清,该血清能特异性识别HIV Nef抗原,为HIV Nef抗原检测提供了技术方法。
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关键词
人免疫缺陷病毒
nef
抗原
原核表达
抗血清
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职称材料
题名
人免疫缺陷病毒早期蛋白Nef的表达、纯化及免疫原性研究
1
作者
陆柔剑
齐建国
邓瑶
王世峰
王文玲
辛伟
李仁清
阮力
机构
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2008年第3期358-361,共4页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2001AA215031)
文摘
目的:通过原核细胞表达人免疫缺陷病毒(HIV)Nef抗原,制备特异抗血清,为Nef抗原检测提供技术方法。方法:以HIV Botswana毒株基因组为模板,用PCR法获得Nef蛋白编码基因,将其克隆到pET30a载体中,在大肠杆菌中表达Nef融合蛋白;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得抗血清,用真核表达的Nef抗原对其特异性进行分析。结果:构建的Nef融合基因在大肠杆菌中获得表达,相对分子质量约为36×103,免疫BALB/c小鼠获得针对融合蛋白的高效价抗血清,ELISA抗体滴度为1∶6400;免疫荧光和Western blot检测表明,该抗血清能特异地与重组痘苗病毒表达的Nef抗原反应。结论:在大肠杆菌中表达了HIV Nef融合蛋白,制备了Nef融合蛋白的高效价小鼠免疫血清,该血清能特异性识别HIV Nef抗原,为HIV Nef抗原检测提供了技术方法。
关键词
人免疫缺陷病毒
nef
抗原
原核表达
抗血清
Keywords
HIV
nef antigen
prokaryotie expression
antiserum
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人免疫缺陷病毒早期蛋白Nef的表达、纯化及免疫原性研究
陆柔剑
齐建国
邓瑶
王世峰
王文玲
辛伟
李仁清
阮力
《生物技术通讯》
CAS
2008
0
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