遵义地区淋病奈瑟菌多抗原序列分型及耐药性分析

目的了解遵义地区淋病奈瑟菌(NG)流行的分子型别及耐药特征。方法用淋病奈瑟菌多抗原序列分型(NG-MAST)法对2013年遵义医学院附属医院分离的65株NG进行基因分型。同时用琼脂稀释法测定NG对青霉素、阿奇霉素等6种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果 NG-MAST分型鉴定出37种ST型别,其中15种为新发现ST型别,包含≥2株细菌的簇群有9个,最大的簇群是ST3285。药敏结果显示,本地区流行的NG对环丙沙星、四环素、青霉素、阿奇霉素、大观霉素的耐药率分别为96.9%、92.3%、67.7%、3.1%、1.5%;未发现对头孢曲松耐药的菌株。NG的耐药模式以同时对青霉素、环丙沙星和四环素耐药的多重耐药株为主,占52.3%。结论 ST3285、ST2083、ST1768、ST1766等NG簇群为遵义地区流行的主要基因型别,需加强对相应菌株的流行趋势及耐药特征的定期监测。本地区流行的NG对阿奇霉素、大观霉素、头孢曲松的敏感性较好,可以推荐这些药物作为淋病的治疗药物。

中国部分地区淋球菌耐药监测点产青霉素酶淋球菌及其 blaTEM-135突变体的流行调查

目的：了解中国不同地区淋球菌耐药监测点产青霉素酶淋球菌（PPNG）的比例及 blaTEm-135突变体在 PPNG 中的分布，比较 PPNG 及 blaTEm-135突变体淋球菌多抗原测序分型（NG-MAST）的型别分布，了解不同地区 PPNG blaTEm-135突变体的差异与联系。方法2012年在江苏、上海、浙江、天津、广东、广西6个淋球菌耐药监测点共收集572株淋球菌，经过分离纯化及鉴定后，采用头孢噻吩纸片法测定 PPNG；菌株培养后利用试剂盒提取 DNA，通过错配扩增突变分析 PCR（MAMA PCR）鉴定 blaTEm-135突变体，采用 NG-MAST 进行分型研究。结果572株淋球菌中 PPNG 总阳性率为38.1%（218/572），PPNG 中相应 blaTEm-135突变体的总比例为52.3%（114/218）。监测点中 PPNG 阳性率从高至低分别为：浙江（45/87，51.7%）、上海（36/79，45.6%）、广东（78/205，38.0%）、广西（12/32，37.5%）、江苏（24/77，31.2%）、天津（23/92，25%）；PPNG 中相应 blaTEm-135突变体的阳性率从高至低分别为：浙江（31/45，68.9%）、江苏（14/24，58.3%）、广东（39/78，50.0%）、上海（17/36，47.2%）、天津（9/23，39.1%）、广西（4/12，33.3%）。 NG-MAST 分型研究显示，blaTEm-135突变体中流行菌株型别有 ST2318、ST1768、ST1866、ST1053、ST8726等，其中 ST1768、ST1053和 ST8726与 blaTEm-135突变体有较强的对应关系。天津 PPNG 菌株及 blaTEm-135突变体 ST 分布与其他各监测点有显著差异，江浙沪地区菌株 ST 有一定联系。结论中国淋球菌耐药监测点 PPNG 及相应 blaTEm-135突变体阳性率处于较高水平，不同地区间 PPNG 及相应 blaTEm-135突变体阳性菌株 ST 型别分布差异有统计学意义。

性伴间淋球菌的opa分型及Ng—MAST基因分型

目的评价淋球菌opa分型及Ng—MAST对淋球菌分离株进行基因分型的能力，分析性伴分离淋球菌基因型别之间的关系。方法本研究中24株淋球菌野生株于2006年2月至2007年8月从华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科门诊分离获得，经Thayer Martin（T—M）培养基选择分离培养后通过革兰染色和氧化酶试验等方法确证。PCR扩增其opa基因以HpaⅡ酶切及聚丙烯酰胺凝胶电泳银染显色分析，并用NG—MAST方法从分子水平上进行基因分型。结果24株野生株淋球菌中，Ng—MAST区分出10种ST型，而使用opa分型则呈现12种OT型；新发现的ST（217—86％同源178）是国内特有的流行株。结论淋病患者一性伴组除了45／46之外，每对菌株的ST型及OT型均相同，表明患者与性伴相互接触传染。淋球菌opa分型能力高于Ng—MAST，ST型别可进一步的分成opa—types（OT）亚型。

淋病奈瑟菌NG-MAST基因分型方法的流行病学应用

目的调查福建省三明市及泉州市淋病奈瑟菌基因型的分布状况,以获得更多的淋球菌的性传播网络信息。方法收集2010-2012年三明、泉州淋病初诊者的共185株淋病奈瑟菌以及这些菌株的流行病学资料,用淋球菌多抗原序列分型法(NG-MAST)进行基因分型。结果 185株样本中有112个不同的ST型,其中51个为新型别,占45.54%,39个ST型包含2~8株淋球菌。12对性伴侣间ST型一致并且与流行病学资料调查显示的性接触史相符。对185株菌株进行系统树分析表明临床株可分为两大群,尚未呈现明显的地区聚集性,其中ST1766在澳大利亚和加拿大均已发现,反映了淋病的全球传播趋势。结论 NGMAST分型法对传染源的追踪提供了一种补充方法,有可能在性伴背景资料不全的情况下构建淋球菌的传播网络。

淋病奈瑟球菌对头孢菌素类药物的敏感性及多抗原序列分型研究

目的了解广州市临床分离淋病奈瑟球菌（NG）的分子型别及其对头孢菌素类抗生素的敏感性。方法收集广东省皮肤性病防治中心临床分离的121株NG，用琼脂稀释法测定菌株对头孢曲松和头孢克肟的最小抑菌浓度（MIC），并进行NG多抗原测序分型（NG—MAST）。结果未发现NG对头孢曲松和头孢克肟耐药的菌株，但它们的低敏率分别达到13．2％（16／121）和2．5％（3／121）。121株NG共有82个型别，其中STl768共6株，ST2083、ST5062和ST10229各4株，ST1766、ST1866和ST10339各3株，有12个ST族群包含2株菌株，其余63个型别仅含1株菌株，占76．8％（63／121）。对头孢曲松低敏的13株菌株中，ST10339和ST10242各2株，其余9株均为单一型别。结论121株NG对头孢曲松、头孢克肟的敏感性较高。菌株NG—MAST型别具有较高的多样性。

尿液标本淋球菌多抗原序列分型研究

目的探讨江苏常州、扬州，广西梧州、贺州，海南三亚、琼海，广东江门、茂名淋球菌多抗原序列分型（NG—MAST）的型别分布。方法88份淋球菌核酸检测阳性的男性性病门诊就诊者（MSP）的尿液标本，用Qiagen试剂盒提取DNA，并进行2次PCR扩增porB、出加基因片段，扩增成功的标本测序后登陆NG—MAST网站进行序列比对，获取菌株基因型别信息。结果对88份阳性标本提取DNA进行单次PCR，扩增porB、tbpB基因的效率分别为13．6％和14．8％，共有12份标本比对成功，得到菌株基因型别，分型效率为13．6％（12／88）；进行2次PCR扩增后，porB、tbpB基因的PCR扩增效率分别为71．6％和72．7％，分别增长了58．0％和57．9％，共有62份标本比对成功得到菌株基因型别，分型效率为70．5％（62／88），分型效率提高了56．9％。62份标本共分出45个基因型，其中40个型为已知型别，5个为新型别。所有型别中，STl866型丰度最高，有6份标本为此型别，STl972、ST3356各有4份标本，都集中于江苏项目点。ST532有3份，集中于广东项目点。ST2221有2份，集中于广西项目点，其余各基因型均只有1份标本，散在分布于各省。5个新型别为：porB基因型为892、tbpn基因型98％相似于46型的标本，且丰度较高，仅发现于江苏项目点；porB基因型为903、tbpB基因型99％相似于958型；porB基因型为130、tbpB基因型96％相似于504型；porB基因型为2790、a,pB基因型99％相似于32型；porB基因型为1053、tbpB基因型99％相似于856型。结论尿液标本可以用于NG—MAST分型研究，2次PCR扩增可以提高尿液标本的分型效率，不同地区淋球菌NG—MAST型别表现为多样性。

广西地区淋病奈瑟菌对头孢菌素的耐药性及多抗原测序分型

目的了解广西地区淋病奈瑟菌对两种头孢菌素药物的耐药性及对应菌株多抗原测序分型(NGMAST)情况。方法从2012-2014年广西地区性病门诊患者尿道或宫颈收集分泌物培养共195株淋病奈瑟菌,经过分离纯化及鉴定后,用琼脂稀释法测定其对头孢曲松和头孢克肟的最小抑菌浓度(MIC),并进行淋病奈瑟菌多抗原测序分型(NG-MAST),数据统计采用SPSS13.0软件分析。结果2012-2014年从性病门诊淋病患者中收集临床分离菌株195株,其对头孢曲松的MIC≥0.060mg/L的菌株比例为8.21%;对头孢克肟的MIC≥0.060mg/L的菌株比例分别为11.28%。NG-MAST分型结果显示,195株淋病奈瑟菌共有147个型别,型别多样性很高,其中118种为已知型别,29种为新型别。所有菌株中以ST10380(n=5),ST621(n=4),ST1927(n=4),ST2318(n=4),ST3741(n=4),ST4539(n=4),ST1768(n=3),ST2770(n=3),ST6312(n=3)为优势型别。结论广西地区淋病奈瑟菌NGMAST型别具有丰富多样性,某些型别与头孢曲松和头孢克肟的MIC值有较强对应关系。NG-MAST分型可用于本地区淋病奈瑟菌耐药监测的辅助工具。