GRIM-19及其靶基因产物STAT3与结直肠癌恶性程度的关系

背景与目的:干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid-interferon-induced mortality-19,GRIM-19)属转录信号转导子与激活子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)特异性抑制蛋白,STAT3及其介导的信号转导通路参与调节细胞的增殖、凋亡与分化,并介导细胞的恶性转化。本研究分析GRIM-19及其靶基因STAT3在结直肠癌组织中的表达情况,探讨GRIM-19及其靶基因产物在结直肠癌发病中的作用。方法:采用免疫组织化学染色及Western blot检测40例结直肠正常组织及癌组织中GRIM-19、STAT3、p-STAT3蛋白表达,对各表达情况与不同临床病理特征进行统计学分析。采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法及测序检测结肠癌细胞系SW480及23例结直肠正常组织及癌组织中GRIM-19mRNA有无基因突变及在mRNA的表达情况。结果:在结直肠癌组织中STAT3及p-STAT3蛋白均高表达,而GRIM-19mRNA及蛋白表达在癌组织中明显低于正常组织,且GRIM-19蛋白表达水平与结直肠癌分化程度和临床分期相关(P<0.05)。GRIM-19与STAT3和p-STAT3在结直肠癌组织中表达情况呈负相关,GRIM-19基因阳性时,STAT3基因趋向阴性(χ2=9.95,P<0.01),p-STAT3基因也趋向阴性(χ2=5.10,P=0.02)。结直肠癌组织中GRIM-19mRNA无基因突变情况。结论:GRIM-19蛋白在结直肠癌组织中的低表达或缺失与结直肠癌的发生、发展及侵袭性相关,而与基因突变无关。在结直肠癌组织中存在STAT3的持续高表达和GRIM-19的低表达共存现象,可能与细胞更易发生恶性转化和异常增殖,促进了结直肠癌的发生发展相关。

新辅助化疗对胃癌微卫星不稳定性的影响

背景与目的:多数胃癌新辅助化疗的临床试验结果是肯定的,而微卫星不稳定性(microsatelliteinstability,MSI)已被认为是细胞癌变的新机理。本文拟探讨新辅助化疗对胃癌MSI的影响。方法:选取D2S123、D3S1298两个微卫星位点,从48例已行氟尿嘧啶/醛氢叶酸(5-FU/CF)术前化疗胃癌患者的石蜡标本中提取DNA,经PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银盐染色,采用自身对照的方法,比较化疗前后胃癌组织MSI的表现;采用!2检验分析新辅助化疗对胃癌MSI的影响。结果:术前标本两个位点共检出MSI阳性15例,检出率31.3%。术后标本检出MSI阳性6例,检出率为12.5%。共有9例样本由化疗前的MSI阳性变为MSI阴性,无MSI阴性转为MSI阳性的病例。经!2检验,化疗前后的MSI阳性率有显著性差异(31.3%vs.12.5%,P=0.026)。结论:5-FU/CF新辅助化疗方案对胃癌MSI有影响。新辅助化疗后,部分MSI阳性的病例可以表现为阴性,但对MSI阴性病例无影响。

5-氮杂-2'-脱氧胞苷和曲古抑菌素A对卵巢癌顺铂耐药细胞中hMLH1表达及DNA甲基化的影响

背景与目的:顺铂能造成细胞内DNA的损伤,而DNA错配修复蛋白能发现顺铂导致的DNA损伤,产生损伤信号,诱导细胞凋亡,从而摧毁肿瘤细胞。hMLH1是DNA错配修复系统的一个重要成员,其缺失能导致肿瘤对顺铂的耐受。本研究目的在于探讨卵巢癌顺铂耐药细胞中hMLH1表达及其基因启动子区DNA甲基化状态,同时探讨去甲基化制剂—5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'——deoxycytidine,5-Aza-dC)和组蛋白脱乙酰化酶抑制剂——曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对hMLH1表达及DNA甲基化的逆转作用。方法:应用5-Aza-dC和TSA作用于卵巢癌细胞COC1与其顺铂耐药细胞COC1/DDP,应用甲基化特异性PCR、RT-PCR和Western blot检测上述两种细胞中hMLH1基因启动子区DNA甲基化、hMLH1 mRNA和hMLH1蛋白表达的变化。MTT法检测药物对细胞增殖的影响。结果:COC1细胞存在hMLH1 mRNA和蛋白的表达,其启动子区域表现为DNA非甲基化。单独应用5-Aza-dC、TSA及联合应用5-Aza-dC和TSA对COC1细胞中hMLH1 mRNA、hMLH1蛋白表达和DNA甲基化均没有影响(P>0.05),细胞形态变化不明显。COC1/DDP细胞中hMLH1 mRNA和蛋白表达缺失,启动子区域表现为DNA甲基化。5-Aza-dC不但能使COC1/DDP细胞中hMLH1基因发生DNA去甲基化,而且能使表达缺失的hMLH1 mRNA和hMLH1蛋白重新表达。TSA对COC1/DDP细胞中hMLH1 mRNA、hMLH1蛋白表达和DNA甲基化均没有影响(P>0.05)。联合应用5-Aza-dC和TSA不但能使hMLH1基因发生DNA去甲基化,而且与单独应用5-Aza-dC相比较,对hMLH1 mRNA和hMLH1蛋白表达的影响更明显(P<0.05)。5-Aza-dC单用及联合应用TSA对COC1/DDP细胞生长抑制率明显高于COC1组、阴性对照组(P<0.05)。结论:COC1/DDP细胞对顺铂的耐药性与hMLH1mRNA和蛋白的表达缺失有关,而hMLH1基因和蛋白的表达缺失与其基因启动子区DNA甲基化相关,5-Aza-dC单用及联合TSA使hMLH1基因发生DNA去甲基化,促进hMLH1的表达,逆转COC1/DDP细胞对DDP的耐药性。

腹腔镜肝脏手术治疗肝脏占位性病变

目的 :探讨腹腔镜肝脏手术的可行性、适应证及方法。方法 :分析 1998年 6月至 2 0 0 2年 8月腹腔镜下肝脏手术 2 3例的临床资料。结果 :2 3例手术均在腹腔镜下完成 ,其中肝左外叶切除术 2例 ,肝癌局部切除术 7例 ,肝局限性结节状增生局部切除术 3例 ,肝血管瘤摘除术 1例 ,肝癌射频治疗 2例 ,肝囊肿开窗引流术 +胆囊切除术 7例 ,肝脓肿引流术 1例。平均手术时间 16 5min ,平均出血 12 0ml,术后 4 8h内胃肠功能恢复 ,术后平均住院 7.6d ,痊愈出院 ,无严重并发症发生。结论 :腹腔镜下肝脏手术 ,包括肝切除术是一种安全、有效、微创的手术 。

NT4p53(N15)Ant融合基因重组腺病毒的构建及其体外抑瘤作用

背景与目的:有研究发现P53氨基端15肽与穿膜肽(antennapedia,Ant)的融合肽能迅速穿透细胞膜,直接、快速引起乳腺癌、胰腺癌细胞坏死而非凋亡,但对正常细胞几乎没有毒性。本研究构建缺陷型腺病毒载体表达NT4p53(N15)Ant融合基因,研究其体外抑瘤作用。方法:应用Ad-EasyTM系统,在大肠杆菌同源重组,构建NT4p53(N15)Ant腺病毒表达载体,在HEK-293细胞内成功包装并鉴定后,感染肝癌细胞株HepG2,用倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态学变化、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验及培养基中的乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)测定研究其体外抑瘤作用。结果:Ad-NT4p53(N15)Ant对肝癌细胞株HepG2有明显抑制作用,48、72、96h细胞存活率分别为36.67%、20.47%、17.82%,与空病毒处理组比较差异有统计学意义(P<0.05);电镜观察到感染的HepG2细胞胞膜、核膜破坏,胞浆内出现囊泡状物质,染色质聚集。Ad-NT4p53(N15)Ant处理HepG2细胞24、48、72、96h时培养液中LDH释放分别为94、236、267、313U/L,较空病毒处理组明显增加,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:构建的腺病毒载体Ad-NT4p53(N15)Ant感染HepG2细胞后能抑制细胞增殖。

替吉奥联合三维适形放疗治疗局部晚期胰腺癌的临床观察

【目的】探讨替吉奥同步放疗并维持化疗治疗局部晚期胰腺的有效性和安全性。【方法】收集28例经病理证实或符合临床诊断标准的局部晚期胰腺癌患者。放疗方案为应用10MV-X，肿瘤大体靶区（GTV）为肿瘤组织和转移淋巴结，放疗剂量（DT）为50Gy／25次（5周内），1次／日，同时予以替吉奥胶囊40～60mg／d，1次／日（根据患者体表面积计算：〈1．25m^2，40mg／d；≥1．25～1．5m^2，50mg／d；≥1．5m^2，60mg／d），共35d，放化疗结束后2周开始予以替吉奥单药化疗80-120mg／d，分2次服用（根据患者体表面积计算：〈1．25m^2，80mg／d;≥1．25～1．5m^2，100mg／d；≥1．5m^2，120mg／d），连续14d，休息7d为1周期，口服化疗直至病情进展或不能耐受其毒性。用实体瘤疗效反应评价标准评价治疗效果，用美国国立癌症研究所的常规毒性判定标准评价毒副反应。【结果】共入组病例28例，其中26例患者按计划治疗直至病情进展，近期治疗有效率（CR＋PR）为38．4％（10／26），肿瘤控制率（CR＋PR＋SD）为80．8％（21／26），临床获益率53．9％（14／26）。随访提示中位无进展生存期和中位生存期分别为6．3个月和12．8个月，1年生存率为46．3％。治疗过程中最常见的毒副反应为1～2度血液学毒性，非血液毒副反应主要为恶心、食欲减退。【结论】替吉奥同步放疗并维持化疗治疗局部晚期胰腺癌安全，毒副反应轻，患者临床症状可得到改善，生存改善，是一种安全有效的治疗模式，但长期治疗效果及毒副反应有待进一步研究。

磷脂酰肌醇-3-羟基激酶抑制剂LY294002对肝细胞生长因子促人结肠癌细胞SW620增殖和迁移行为的影响

目的探讨磷脂酰肌醇-3-羟基激酶(PI3K)抑制剂LYZ94002在肝细胞生长因子(HGF)促进结肠癌细胞SW620增殖、侵袭中所起的作用。方法分别用噻唑蓝比色法(MTT)、流式细胞术及划痕实验检测结肠癌细胞增殖、细胞周期、凋亡及移行情况。结果 (1)MTT法结果显示,LY294002≥20μmol/L实验组与对照组吸光度(OD)值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)流式细胞术结果显示,LY294002≥20μmol/L实验组与对照组凋亡率及增殖指数比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)划痕实验结果显示,LY294002≥40μmol/L实验组与对照组移行距离比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PI3K信号通路抑制剂能够阻断HGF对人结肠癌细胞增殖、凋亡、移行的促进作用。

Fas及其配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞表达的研究

目的研究Fas和Fas配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞的表达。方法采用免疫组织化学方法了解Fas和Fas配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞的表达情况。结果免疫组织化学正常卵巢上皮Fas表达阳性率85.7%,Fas配体完全不表达;而卵巢上皮癌Fas表达阳性率31.9%,Fas配体表达阳性率8.5%。结论Fas在卵巢上皮癌细胞低表达,可能是肿瘤细胞逃避Fas介导的宿主免疫的机制。

组织蛋白酶D与下咽癌侵袭转移的相关性研究

目的:研究组织蛋白酶D(CD)在下咽鳞状细胞癌组织中的表达与下咽鳞状细胞癌的侵袭转移之间的关系。方法:用免疫组织化学法研究5 9例下咽鳞状细胞癌组织标本和9例正常的下咽黏膜中CD和Ki- 6 7的表达;分析CD在下咽鳞状细胞癌细胞中和间质细胞中的表达与肿瘤生物学特性之间的关系。结果:CD在颈淋巴结转移阳性组肿瘤细胞中的表达率较阴性组织高,CD在肿瘤间质细胞中的表达在颈淋巴结转移阳性组的表达率较阴性组高。结论:CD表达与肿瘤侵袭转移的生物特性密切相关,可以作为下咽鳞状细胞癌侵袭转移的预后指标。

46例原发性消化道肿瘤的细胞遗传学研究

采用两次连续低渗及大幅度缩短细胞固定时间，解决了实体瘤染色体分散不良及显带困难的问题。用此改良法进行了１４例食道鳞状上皮癌，２４例胃腺癌及８例结肠腺癌的细胞遗传学研究。食道癌染包体改变复杂，以１号，３号，７号和１２号染色体最常累及。胃癌和结肠癌患者可分二类：一类具简单染色体变化，只涉及一至几条染色体，以三体为主。另一类患者涉及广泛的染色体数目及结构异常，其中，胃癌中７ｑ￣－最常见，结肠癌中１ｐ￣－最常见。

舌癌组织中MMP-2、9的表达及意义

目的:研究MMP-2、9在人舌鳞癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化法检测98例舌鳞癌和18例舌正常组织标本中MMP-2、9蛋白的表达,统计分析MMP-2、9的阳性表达与患者临床病理因素的关系。结果:①98例舌鳞癌标本中MMP-2、9的阳性表达率分别是57.1%(56/98)和61.2%(60/98)。正常舌组织中MMP-2、9则均为阴性表达,和舌癌组织相比,差异有显著性(P=0.0000);有颈淋巴结转移者MMP-2、9的阳性率显著高于无转移者(P=0.015,0.048);Logistic回归分析结果表明,MMP-2、9的阳性表达均为影响患者肿瘤复发的独立危险因素(P=0.026,0.002);MMP-9表达还与隐匿性淋巴结转移相关(P=0.044)。结论:Ⅳ型胶原酶在舌鳞癌中有较高的阳性表达率。Ⅳ型胶原酶的蛋白表达与舌鳞癌患者的颈淋巴结转移及肿瘤复发密切相关,MMP-9表达还与隐匿性淋巴结转移相关。

超声在乳腺肿瘤诊断中的应用

目的探讨超声在乳腺肿瘤鉴别诊断中的应用价值。方法对70例乳腺肿块患者（72个肿块）行超声检查，分析其二维声像图、血流信号、流速等，并与术后病理做对照，从而探讨超声在乳腺肿瘤诊断中的价值。结果病理结果：30例良性，42例恶性。本研究高频声像图及能量多普勒、频谱多普勒超声对乳腺肿瘤诊断的符合率94．4％。结论超声对乳腺良恶性肿瘤的诊断价值较高。可作为乳腺肿瘤鉴别诊断的首选检查方法之一。

TACE联合HIFU治疗老年原发性肝癌的临床研究

目的探讨经动脉化学治疗栓塞术(TACE)联合高强度聚焦超声(HIFU)对比单一TACE治疗老年(年龄大于或等于60岁)原发性肝癌的临床疗效。方法回顾性分析重庆医科大学附属第二医院72例老年原发性肝癌患者的临床资料,按治疗方式分为TACE联合HIFU治疗组(联合组,n=36)与TACE治疗组(TACE组:n=36),比较两组治疗后肿瘤缩小情况,甲胎蛋白(AFP)水平及肝功能变化,中位生存时间,1、2、3年生存率等指标。结果联合组较TACE组肿瘤缩小更明显(P<0.05),术后AFP值减小更多(P<0.05);联合组及TACE组中位生存时间,1、2、3年生存率分别为:(32.0±6.9)个月、83.1%、57.3%、42.6%和(21.0±6.3)个月、62.9%、41.4%、22.3%,联合组中位生存时间及各对应时间点生存率较TACE组高(P<0.05);两组术后均无严重并发症。结论 TACE联合HIFU治疗老年原发性肝癌是安全、有效的,较单一TACE治疗更能使老年肝癌患者获益。

一种^(11)C-acetate肝脏PET动态成像的逐像素参数估计算法

目的针对^(11) C-acetate在肝脏中的PET动态图像,提出逐像素的动力学参数估计方法。方法对^(11)C-acetate在肝脏中的PET动态图像进行分块;针对每一图像分块,使用三房室模型建模,并采用图形化非线性最小二乘法(GNLS)方法估计动力学参数;缩小肝脏中PET动态图像分块的大小,以三房室模型估计的参数值为基准设定新的参数约束条件。重复以上步骤,当PET图像分块大小为单个像素时,终止算法。将以上方法用于仿真及临床验证,评价效果。结果仿真结果表明,相对于传统的GNLS方法,逐像素参数估计方法在保证参数估计准确度的同时,提升了参数估计的可靠性。临床研究显示,通过该方法获得的肿瘤组织与正常组织的对比度相对于静态PET图像有显著提升。结论采用逐像素参数估计方法可获得更加准确、可靠的参数图谱,可显示肿瘤的细节信息,有助于临床对肝癌的诊断与评估。

胃癌病人脉管内癌栓与临床病理因素及预后的关系

目的分析胃癌病人脉管内癌栓与淋巴结转移等病理特征的关系及其对疾病预后影响。方法回顾性分析375例胃癌病人术后临床及病理资料,其中脉管内癌栓阳性者54例,阴性者321例,分析脉管内癌栓与疾病分期、淋巴结转移等的关系,并比较同期癌栓阳性组与阴性组病人3年及5年生存率的差异。结果不同UICC分期、肿瘤浸润深度、组织分化程度、淋巴结转移程度胃癌病人脉管内癌栓的发生率比较,差异皆有显著意义（χ^2=7.355-20.066,P〈0.05）。脉管内癌栓阴性病人Ⅰb＋Ⅱ期、Ⅲ期的3年、5年生存率高于同期阳性组,差异有统计学意义（χ^2=3.950-5.632,P〈0.05）。结论脉管内癌栓是胃癌病人重要的预后因素,应予以高度重视。

老年妇科恶性肿瘤78例诊疗分析

【目的】探讨老年妇科恶性肿瘤患者的临床特点及诊治经验。【方法】对78例老年妇科恶性肿瘤（观察组）的临床资料进行回顾性分析，并与同期手术住院的96例老年子宫肌瘤（对照组）进行对照。【结果】观察组恶性肿瘤的前三位分别是卵巢癌26例（占33．3％），宫颈癌25例（占32．1％），子宫内膜癌17例（占21．8％）；其术中出血量、输血量、手术持续时间及术后住院时间均高于对照组，两组比较差异有显著性（P〈0．05）。【结论】老年妇科恶性肿瘤以卵巢癌、子宫内膜癌和宫颈癌为主，较良性肿瘤而言需要更完善的围术期处理方能安全渡过手术危险期。

三氧化二砷对人肺癌A549细胞凋亡及耐药基因表达的影响

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人肺癌细胞株的诱导凋亡作用及对耐药基因LRP表达的影响。方法应用人肺腺癌A549细胞株，运用体外细胞培养法、MTT法、流式细胞术检测As2O3对人肺癌细胞株抑制及诱导凋亡作用；用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测LRP mRNA的表达。结果As2O3对人肺癌A549细胞具有抑制作用，其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、3．0μmol／L的As2O3可下调LRPmRNA的表达。结论As2O3具有抑制肿瘤细胞生长及诱导细胞凋亡作用，其机制与下调LRPmRNA表达有密切关系。

新疆维吾尔自治区肿瘤放射治疗工作发展现状调查

目的调查新疆维吾尔自治区肿瘤放射治疗工作发展现状。方法仍延用第1次调查表，通过信件、电子邮件、电话及传真发送表格的方法，调查新疆维吾尔自治区医疗机构放射治疗学科设置、人员配备、放疗设备配置情况及业务规范化开展情况。结果截至2015年1月底，全区共拥有医用电子直线加速器30台，模拟定位机21台，近距离后装治疗机10台，放射治疗计划31套，γ刀／X刀5台。共有20家医疗机构开展放射治疗，其中14家已开展三维适形放疗技术，9家拥有调强验证系统。2家医院开展了容积调强技术，3家开展立体定向放疗，10家开展了后装近距离治疗技术。从事放疗的人员（不含护士）280人，其中医师159人，物理师40人，技师81人。开放病床1167张，日均治疗855人次。结论虽然本区放射治疗人员有所增加，设备情况有了明显的改善，床位数和治疗患者数也有增加，但精确放射治疗技术开展不均衡，需要进一步改善。

DWI对前列腺癌诊断与Gleason评分的相关性分析

目的探讨磁共振扩散加权成像(DWI)对前列腺癌检出率与Gleason评分的相关性。方法收集91例有完整病理资料且临床怀疑前列腺癌的患者,行常规序列(T1WI/T2WI)与DWI(b值为600s/mm^2)检查。对病理诊断为前列腺癌的病例行Gleason评分。结果 91例中,前列腺增生44例(以下称前列腺增生组)、前列腺癌47例(以下称前列腺癌组)。前列腺增生组与前列腺癌组的表观扩散系数(ADC)值分别为(1.250±0.263)×10^(-3) mm^2/s和(0.955±0.191)×10^(-3) mm^2/s。前列腺癌组根据Gleason评分分为高分化、中分化和低分化3个组,其ADC值分别为(1.158±0.173)×10^(-3) mm^2/s、(1.050±0.192)×10^(-3) mm^2/s和(0.891±0.241)×10^(-3) mm^2/s。ADC值对前列腺癌高分化组、中分化组和低分化组的诊断准确率分别为63.6%、78.3%、84.6%。前列腺癌不同病理分组的ADC值与Gleason评分呈负相关;DWI诊断前列腺癌的准确率与Gleason评分呈正相关。结论前列腺癌分化程度越低,Gleason评分分值越高,DWI诊断的准确性也越高。