NGAL及自噬在大鼠肾脏缺血/再灌注损伤中的表达及意义

目的明确大鼠肾脏缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤后不同时间中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)表达水平及肾组织自噬状态的变化情况及意义。方法建立大鼠肾脏I/R损伤模型,将30只Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)和I/R组,按照再灌注时间,将I/R组分为2h组、6h组、24h组和48h组。在上述不同时间点分别留取大鼠血、尿及肾组织标本。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)检测血和尿中NGAL水平;全自动生化分析仪检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BU)和血肌酐(serum creatinine,SCr)水平;苏木精-伊红染色法检测肾组织损伤程度并进行损伤程度积分;应用原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡情况;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测自噬相关基因LC3及Beclin-1的表达。结果血和尿中NGAL表达水平在I/R损伤后2h即开始升高,6h达到高峰,24h后呈下降趋势。BU及Scr在I/R损伤后6h开始升高,24h达到高峰。TUNEL阳性细胞于I/R损伤后6h开始增加,24h数量达峰值。苏木精-伊红染色显示,I/R损伤后各组均有不同程度的肾小管上皮细胞肿胀、坏死。从I/R损伤后6h开始,LC3和Beclin-1基因表达呈上升趋势,24h后LC3和Beclin-1基因表达量达高峰。结论大鼠肾脏I/R损伤早期NGAL表达水平即升高,早于BU、SCr水平的变化,可以作为早期诊断肾脏I/R损伤的分子指标。大鼠肾脏I/R损伤加重过程中NGAL表达呈增加趋势,自噬被激活,提示NGAL蛋白及自噬均在I/R损伤过程中发挥一定的作用。

肺部感染患者外周血中性粒细胞黏附分子CD11b CD18髓过氧化物酶的变化及临床意义

目的了解肺部感染患者外周血中性粒细胞功能即表达黏附分子CD11b、CD18、髓过氧化物酶(MPO)的变化及临床意义。方法应用流式细胞仪检测30例普通肺部感染患者治疗前后、18例重症肺部感染患者治疗前外周血中性粒细胞表面表达黏附分子CD11b、CD18、MPO的变化,并与25例健康人进行比较。结果①普通组和重症组患者外周血中性粒细胞黏附分子CD11b、CD18表达明显高于正常对照组,有统计学意义(P<0.05或P<0.01);普通组MPO表达明显高于正常对照组和重症肺炎组,有统计学意义(P<0.01);重症组MPO明显低于普通组,有统计学意义(P<0.01)。②普通组常规治疗10 d后CD11b、CD18与治疗前相比变化不明显(P>0.05);治疗10 d后普通组MPO表达较治疗前明显降低,有统计学意义(P<0.01);治疗后各组数据均较治疗前有所降低,但仍未降至正常对照组水平,有统计学意义。结论肺部感染患者外周血中性粒细胞处于活化状态,表达黏附分子CD11b、CD18增多;中性粒细胞杀菌功能增强,表现为MPO表达增多;重症肺部感染可抑制MPO表达,从而影响中性粒细胞的杀菌功能,对患者预后不利。

血清胱抑素C联合尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对脓毒症合并急性肾损伤的早期诊断价值

目的探讨血清胱抑素C(sCys-C)联合尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(uNGAL)水平在脓毒症合并急性肾损伤(AKI)患者中的早期诊断价值。方法收集2017年1月-2019年5月南京医科大学附属南京医院急诊ICU收治的205例脓毒症患者临床资料,将合并AKI的112例患者设为AKI组,未发生AKI的93例患者设为非AKI组。分别留取入选患者确诊脓毒症后0、6、12、24、48、72 h的空腹血液和尿液标本,测定各时间点患者血清肌酐(sCr)、sCys-C和uNGAL水平,绘制ROC并计算AUC。结果两组患者的性别构成、年龄、慢性基础病比例的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。AKI组急性生理学与慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分、死亡病例数比例显著高于非AKI组(P值均<0.05);AKI组血流感染和消化系统感染患者比例均显著高于非AKI组(P值均<0.05)。AKI组sCys-C和uNGAL分别在确诊脓毒症后24、12 h达峰值水平,在12~72 h各时间点与非AKI组的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。sCr的AUC为0.820 (95%CI为0.762~0.878),其灵敏度和特异度分别为0.791和0.753;以sCys-C值1.95 mg/L为诊断截点预测脓毒症患者合并AKI的灵敏度和特异度分别为0.755和0.889,AUC为0.887(95%CI为0.841~0.933);以uNGAL值231.1μg/L为诊断截点时的灵敏度和特异度分别为0.873和0.802,AUC为0.897(95%CI为0.853~0.941);uNGAL联合sCys-C诊断的灵敏度和特异度分别为0.955和0.963,AUC为0.984(95%CI为0.978~0.991)。Pearson相关分析显示,uNGAL、sCys-C的表达与sCr皆呈正相关(r=0.803、0.777,P值均<0.001)。结论脓毒症合并AKI患者sCys-C与uNGAL水平显著升高,两者诊断脓毒症合并AKI的灵敏度和特异度均高于sCr,且两者联合应用能更早、更准确地预测AKI的发生。