首次从新疆无名热病人分离到8株新环状病毒(BANNA)

从新疆境内的生产建设兵团124团采集到不明原因发烧病人血清98份,分离到8株病毒。感染2～4日龄乳小白鼠和三周龄小白鼠不发病。可引起C6/36细胞病变。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径63～69nm,核衣壳直径为49～54um。超薄切片在感染细胞中常见到大量颗粒状包涵体,磷钨酸负染可见到排列整齐的壳粒结构,显示了典型的环状病毒形态特征。该病毒对酸、氯仿、胰蛋白酶及热敏感;1.1MMgCl_2在50℃作用15分钟可使其感染力提高,在-30℃作用1小时可使其感染力丧失;抵抗乙醚和5-碘脱氧尿苷。血清学鉴定,新分离病毒与披膜病毒科(Togaviridae)、黄病毒科(Flaviviridae)及布尼亚病毒科(Banyaviridae)的某些病毒的免疫腹水及免疫血清都不发生反应。与新环病毒(BANNA)的免疫腹水及免疫血清发生反应。用新环病毒酶标单克隆抗体(McAb)做酶标中和试验为阳性,中和指数为1023.3～18620.9。经初步鉴定,分离的8株病毒的抗原性与近年从我国南方分离的新环状病毒(BANNA)相一致。

从云南省无名热病人和脑炎病人分离到新环状病毒

从云南省西双版纳傣族自治州3家医院采集到发热病人血清106份,脑炎病人脑脊液5份,从中分离到27株病毒。经血清学鉴定,该类病毒与披膜病毒科、黄病毒科、布尼亚病毒科某些病毒的免疫腹水,以及呼肠孤病毒科环病毒属M14、YN187病毒的免疫腹水,都不发生反应。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径65.49±3.11nm,其核衣壳直径为51.79±2.01nm。在感染细胞中常见到大量颗粒状包涵体。负染中可见排列整齐的壳粒结构,显示了典型的环状病毒形态特征。该类病毒对酸和热敏感,抵抗5—Id?和乙醚。27株病毒的基因组均由12条RNA片段组成,其带形均相同,分子量约为0.25×10~6～2.5×10~6道尔顿。该类病毒的带形与文献报道的任何一种环状病毒的RNA带形都不同。病人双份血清中对该环状病毒特异IgM抗体滴度显示4倍以上升高。对该类病毒在分类学上的地位和对无名热和脑炎的病原学意义进行了讨论,目前暂定名为BANNA病毒。

云南省猪牛体内发现人源同型新环状病毒

1987年夏,从云南省西双版纳傣族自治州医院采集的无名热和脑炎病人血清和脑脊液中,曾分离到多株新环状病毒。本文报道同年从版纳州医院附近的个体屠宰场采集到猪血清13份、牛血清53份,从中共分离到20株病毒。血清学鉴定,该病毒与人血清分离的新环状病毒BANNA582株病毒的两株单克隆抗体有很强的交叉反应。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,毒粒大小和结构与BANNA新环状病毒相同。20株病毒的基因组皆由12条RNA片段组成,其带形与BANNA新环状病毒完全相同。本文还就猪牛等脊椎动物传播和扩散该类环状病毒的意义进行了讨论。

首次从新疆的蜱和病牛血清分离到新环状病毒

1990年3～8月从新疆北部和西部地区采集全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)、银盾革蜱(Dermacentor niveus)、森林革蜱(D.silvarum)、边缘革蜱(D.marginatus)、草原革蜱(D.nuttalli)、刻点血蜱(Haemaphysalis punctata)、残缘璃眼蜱(Hyalomma detritum)等共2132只,分离病毒17株;采集病牛血清3份,分离病毒1株。从两地区共分离病毒18株。经血清学鉴定,该类病毒与披膜病毒科(Togaviridae)、黄病毒科(Flavirdae)、布尼亚病毒科(Bunyavirdae)某些病毒的免疫腹水及免疫血清都不发生反应。与新环状病毒(BANNA)的免疫腹水、免疫血清及酶标单克隆抗体(McAb)发生反应,中和指数为4.22～5.03。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径为63～69nm,核衣壳直径为49～54nm。超薄切片在感染细胞中见到大量颗粒状包涵体,磷钨酸负染可见到排列整齐的壳粒结构,显示了典型的环状病毒形态特征。新分离的病毒对酸、氯仿、胰蛋白酶及热敏感;抵抗乙醚和5-碘脱氧尿苷。该病毒可引起白纹伊蚊(Aedes albopictus)传代细胞 C_6l_(36)细胞收缩、融合、脱落及颗粒增多等病变;感染传代细胞Vero株及BHK-21株未见明显的细胞病变。感染2～4日龄乳小白鼠及2～4周龄小白鼠,均无明显发病症状。初步鉴定证实,新分离病毒属新环状病毒(BANNA)。

首次在云南省哨兵牛上分离出一种新型西藏环状病毒

西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV)为环状病毒属新成员,2009年首次在西藏墨脱县多斑按蚊中发现,目前该病毒对动物健康和公共卫生的危害尚不清楚,本文首次报道了牛体上一株新型TIBOV的分离。2019年在云南省景洪市设置哨兵牛3头,每周采血进行虫媒病毒的监测与病毒分离。监测期的第4周,其中一头牛采集的血液样本接种C6/36细胞盲传3代出现细胞病变,提取病毒核酸进行琼脂糖凝胶电泳,显示病毒基因组为10节段双链RNA,呈"3-3-3-1"的带型特征。电镜观察可见直径约70 nm,具有环状病毒属病毒典型形态特征的病毒粒子,将分离的病毒命名为V298/YNJH/2019。对决定环状病毒种属的基因节段及其编码蛋白(Seg-3/T2)序列分析显示,分离毒株的Seg-3/T2与其它TIBOV毒株的核酸(nt)与氨基酸序列(aa)相似度分别在79.6%~79.9%与96.3%~96.4%之间,其T2蛋白在系统发生树上与其它TIBOV聚为一簇;对决定病毒血清型的基因节段及其编码蛋白(Seg-2/OC1)的序列分析显示,分离毒株与其它TIBOV毒株Seg-2/OC1的序列相似度分别在42.3%~43.4%(nt)与29.3%~31.7%(aa)之间,其OC1蛋白形成独立于其它TIBOV毒株的进化分支,以上结果提示V298/YNJH/2019为一种新血清型TIBOV。通过实时荧光定量RT-PCR与血清中和试验,对病毒在牛上感染特征的回溯分析显示:在分离到病毒的前一周,动物血液中可检到低水平的病毒核酸,在分离到病毒的当周,血液中病毒核酸含量处于高峰,但两周后检测结果为阴性;动物在病毒感染后第2周开始产生中和抗体,在随后两周达到高峰,在感染后4个月仍保持较高水平。本研究首次报道了一种新型TIBOV在牛体上的分离,丰富了我国流行TIBOV多样性与感染特性的认知,为TIBOV的流行病学、致病性与诊断试剂的研究提供了基础。