一种简便快速工艺制备重组人胸腺肽α_1

将构建的含有胸腺肽α1融合蛋白的编码基因插入表达质粒pET28a(+)中,并在大肠杆菌BL21中进行表达,该菌经IPTG诱导融合蛋白高表达后,离心收集菌体,超声波破碎,包含体裂解,目标蛋白质的体外变性复性后,经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化,每升菌液中可获得260 mg融合蛋白。经重组肠激酶酶切反应、Ni-Sepharose亲和层析,Sephadex G-25柱纯化后,得到了纯度达97%的重组人胸腺肽α1,该纯化工艺简单快速,经三步层析即可得到纯度达97%的重组人胸腺肽α1,且产量达82 mg/L,为大批量用细菌表达重组人胸腺肽α1及纯化提供了参考。