牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺损伤转化生长因子-β_1及其受体表达的影响

目的观察牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺损伤转化生长因子 β1及其受体表达的影响。方法静脉注射脂多糖内毒素 (1 5mg/kg)、腹腔注射D 氨基半乳糖 (10 0mg/kg)造成内毒素休克模型 ,用牛珀至宝微丸干预处理 ,并用免疫组化方法检测转化生长因子 β1及其受体在肺组织内的表达。结果牛珀至宝微丸可以使内毒素休克大鼠肺转化生长因子 β1及其受体表达增强 ,肺损伤减轻。结论牛珀至宝微丸减轻内毒素休克肺损伤的机理可能与其增强肺组织转化生长因子

牛珀至宝微丸对内毒素休克鼠肺组织中一氧化氮合酶活性的影响

【目的】观察牛珀至宝微丸(由水牛角、麝香、地黄、朱砂、牛黄、郁金等组成)对内毒素休克时肺损伤的保护作用和肺一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。【方法】静脉注射脂多糖(LPS)1.5mg/kg、腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gal)100mg/kg造成内毒素休克模型,用牛珀至宝微丸和氨基胍(AG)作对照干预处理,用硝酸还原酶法检测血浆一氧化氮(NO)浓度,同位素标记法测肺组织匀浆NOS活性,免疫组化方法检测诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在肺组织内的表达。【结果】牛珀至宝微丸可以降低内毒素休克时血浆NO浓度,降低肺组织iNOS活性,使肺内iNOS表达减弱、eNOS表达增强,肺损伤减轻。【结论】牛珀至宝微丸可以减轻内毒素休克造成的肺损伤,这种保护作用可能是通过调节肺组织NOS表达而产生的。

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑神经型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠脑神经型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxide synthase,nNOS)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、牛珀至宝微丸组。模型组静 脉注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)1.5mg/kg、腹腔注射D 氨基半乳糖(D galactosamine, D GalN)100mg/kg造成内毒素休克模型,牛珀至宝微丸组用药7d后再作以上处理。用免疫组织化学方法 检测各组nNOS在不同脑区的表达。结果:nNOS阳性细胞广泛分布于大脑皮质Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ层,海马分子层, 齿状回多形层,脑干网状结构,小脑分子层、颗粒层和普尔基涅细胞层。在大脑皮质、海马、脑干及小脑各部 位,牛珀至宝微丸组的nNOS阳性细胞数略高于正常对照组,但明显低于模型组(P<0.05)。结论:牛珀至 宝微丸有部分下调内毒素休克所致广泛脑区nNOS过度表达的作用。

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的:观察牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box-1 protein,HMGB1)表达的影响。方法:30只SPF级Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、内毒素组和牛珀至宝微丸组。牛珀至宝微丸组大鼠每天以含生药量3mg的牛珀至宝微丸生理盐水悬液3mL灌胃,连续7d,正常组予生理盐水。模型组和牛珀至宝微丸组大鼠用静脉注射内毒素(1.5mg/kg)联合腹腔注射D-氨基半乳糖(100mg/kg)方法建立内毒素休克模型。采用二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)显色和异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)荧光标记的免疫组织化学染色以及蛋白印迹等方法检测大鼠肺组织内HMGB1的表达。结果:正常组HMGB1表达较弱,仅有少量细胞呈阳性,阳性部位多在细胞核;内毒素组HMGB1表达增加,阳性部位主要在细胞质;牛珀至宝微丸组HMGB1表达更高,阳性部位主要在细胞核。结论:牛珀至宝微丸能使HMGB1定位于细胞核内,从而可能避免被分泌出胞,产生毒性,这可能是其治疗感染性休克的作用机制之一。

牛珀至宝微丸对内毒素致急性肺损伤纤维化大鼠辅助性T细胞的影响

目的：观察牛珀至宝微丸对内毒素致急性肺损伤纤维化（RPF）大鼠辅助性T细胞（Th细胞）的影响。方法将224只健康Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、地塞米松组（地米组）和牛珀至宝微丸组（牛丸组），每组56只。采用内毒素“三次打击”造成RPF模型。于制模前3 d和制模后7 d牛丸组给予牛珀至宝微丸500 mg/kg灌胃，每日2次，共用10 d；地米组腹腔注射地塞米松3.0 mg/kg，每日1次，连用7 d；对照组给予等体积蒸馏水灌胃。于给药后1、3、7、9、14、21、28 d 7个时间点取血和支气管肺泡灌洗液（BALF），用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清及BALF中γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）含量；然后取肺组织用苏木素-伊红（HE）染色及Van Gieson法染色，光镜下观察肺组织形态学变化。结果 HE染色显示，模型组肺间质增厚，肺泡腔内大量炎性渗出，腔内微血栓形成；地米组肺间质增厚，炎性渗出减少明显；牛丸组渗出较地米组稍增多，肺间质基本正常。Van Gieson法染色显示：模型组胶原纤维表达明显；地米组胶原纤维表达减少不明显；牛丸组胶原纤维表达显著减少。ELISA试验显示：模型组BALF和血清中IFN-γ显著升高，地米组7 d时最低，14 d上升至治疗前水平，21 d逐渐下降；牛丸组IFN-γ持续处于高水平后缓慢回落，给药后7 d起各时间点BALF和血清中IFN-γ水平即明显高于模型组和地米组〔BALF（ng/L）：140.47±4.22比149.23±8.35、90.67±6.65；血清（ng/L）：140.47±4.15比100.43±11.05、99.35±7.85，P＜0.05或P＜0.01〕。各组BALF和血清中IL-4显著升高，7 d时最高，以后逐渐降低，给药后28 d牛丸组显著低于模型组和地米组〔BALF（ng/L）：6.60±1.05比7.20±1.25、8.55±1.05，血清（ng/L）：6.75±1.05比7.21±1.25、8.25±1.15，P＜0.05或P＜0.01〕。结论牛珀至宝微丸通过促进IFN-γ分泌、抑制IL-4分泌，调整Th细胞失衡，以达到抗炎、减轻肺损伤、抑制肺纤维化的作用。

牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血后大鼠脑组织一氧化氮合酶的影响

目的 :探讨牛珀至宝微丸对大鼠局灶性脑缺血后脑组织一氧化氮合酶 (NOS)的作用。方法 :采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血模型 ,应用免疫组织化学技术检测脑组织NOS 3种亚型 (eNOS、nNOS、iNOS)的表达 ,观察牛珀至宝微丸对脑缺血后NOS 3种亚型表达的影响 ,并进行神经病学评分。结果 :牛珀至宝微丸组的缺血侧大脑皮层nNOS、iNOS表达显著低于缺血对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,eNOS表达高于缺血对照组 (P <0 0 5 ) ,并可减轻神经损伤症状 (P <0 0 5 )。结论 :牛珀至宝微丸能下调脑缺血所致nNOS、iNOS的异常表达 ,上调eNOS表达 ,这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。