【目的】初步建立乌鲁木齐10号冷泉泉水细菌群落的定量分析体系。【方法】选用地震前与地震后的乌鲁木齐10号冷泉水样,以及无震时期的水样做为三种处理方式,利用构建克隆子的方法制作标准样品,并对实时荧光定量PCR标准曲线的线性(R^2)...【目的】初步建立乌鲁木齐10号冷泉泉水细菌群落的定量分析体系。【方法】选用地震前与地震后的乌鲁木齐10号冷泉水样,以及无震时期的水样做为三种处理方式,利用构建克隆子的方法制作标准样品,并对实时荧光定量PCR标准曲线的线性(R^2)、斜率(S)、扩增效率(E)等相关参数进行优化。【结果】标准曲线的线性R^2=0.993、以及斜率S=-3.415,E=1.963均基本符合参数要求。震前冷泉水体细菌16 S rDNA片段拷贝数达到1.893×10~5 cop/mL,震后冷泉水体细菌16 S rDNA片段拷贝数达到1.43×10~6 cop/mL无震时期水体细菌16 S rDNA片段拷贝数达到9.931×10~6 cop/mL。【结论】建立的实时荧光定量PCR检测体系符合参数要求,并且可以灵敏地、快速地定量未知模板的乌鲁木齐10号泉细菌数。展开更多
文摘【目的】初步建立乌鲁木齐10号冷泉泉水细菌群落的定量分析体系。【方法】选用地震前与地震后的乌鲁木齐10号冷泉水样,以及无震时期的水样做为三种处理方式,利用构建克隆子的方法制作标准样品,并对实时荧光定量PCR标准曲线的线性(R^2)、斜率(S)、扩增效率(E)等相关参数进行优化。【结果】标准曲线的线性R^2=0.993、以及斜率S=-3.415,E=1.963均基本符合参数要求。震前冷泉水体细菌16 S rDNA片段拷贝数达到1.893×10~5 cop/mL,震后冷泉水体细菌16 S rDNA片段拷贝数达到1.43×10~6 cop/mL无震时期水体细菌16 S rDNA片段拷贝数达到9.931×10~6 cop/mL。【结论】建立的实时荧光定量PCR检测体系符合参数要求,并且可以灵敏地、快速地定量未知模板的乌鲁木齐10号泉细菌数。