银苓消肿丸联合碳酸氢钠对痛风性关节炎患者骨破坏因子及NLRP3、NF-κB信号通路的影响

目的探讨银苓消肿丸联合碳酸氢钠在痛风性关节炎治疗中的效果及可能机制。方法选取2022年7月至2023年7月该院收治的98例痛风性关节炎患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组与研究组,每组49例,对照组采用碳酸氢钠治疗,研究组在碳酸氢钠基础上联合银苓消肿丸治疗,比较两组临床疗效、关节疼痛、肿胀及活动障碍评分[关节压痛疼痛视觉模拟评分(VAS)、肿胀、活动障碍];比较两组骨破坏因子[破骨细胞分化因子(RANKL)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、β-胶联降解产物(β-CTX)]、炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、核转录因子-κB(NF-κB)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)水平,以及不良反应(消化不良、头晕、血压升高、肌肉疼痛)发生情况。结果研究组、对照组总有效率分别为95.92%、77.55%,研究组明显高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=7.184,P=0.007)。治疗后,两组VAS、肿胀、活动障碍评分均降低,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组RANKL、TRACP-5b、β-CTX水平均降低,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组IL-1β、TNF-α、NF-κB、NLRP3水平均降低,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在痛风性关节炎的治疗中应用银苓消肿丸联合碳酸氢钠能够改善关节症状及功能,降低炎症因子水平,有效调节NLRP3、NF-κB信号通路,临床应用价值较高,值得推广。

P2X7R过表达的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达观察

目的观察嘌呤能受体P2X配体门控离子通道7的配体(P2X7R)过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞单钠尿酸盐(MSU)晶体诱导痛风炎症反应过程中NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白、IL-1β、TNF-α表达情况。方法取人单核细胞白血病细胞系THP-1,并随机分为过表达组、空白组、模型组、对照组;过表达组和空白组分别转染P2X7R过表达质粒、空白载体质粒,转染5 d,将过表达组、空白组、模型组THP-1细胞用100 ng/mL的PMA刺激3 h后分化为巨噬细胞,另将MSU晶体用氢氧化钠溶解配制成浓度为100μg/mL的MSU乳糜状悬液加入培养液中孵育6 h;对照组正常培养。分别采用RT-PCR法和Western blot法测算巨噬细胞P2X7R mRNA、蛋白,ELISA法检测巨噬细胞上清液IL-1β、TNF-α,Western blot法测算巨噬细胞NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白。结果与对照组比较,过表达组、空白组、模型组P2X7R mRNA和蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与模型组、空白组比较,过表达组P2X7R mRNA、蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论P2X7R过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达增加,IL-1β、TNF-α水平升高可能通过激活NLRP3蛋白来实现。

miR-155-5p通过调控心肌细胞焦亡对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响及机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-155-5p对心肌缺血-再灌注损伤(IRI)大鼠心肌细胞焦亡的影响及机制。方法60只SD大鼠随机分为假手术(sham)组、IRI组、agomir-NC组、miR-155-5p agomir组、antagomir-NC组和miR-155-5p antagomir组,每组10只。采用超声心动图仪测定大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)。酶联免疫吸附试验检测大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平,心肌组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-18和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;苏木素-伊红染色观察大鼠心肌组织病理学变化;实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠心肌组织miR-155-5p和沉默信息调节因子1(SIRT1)信使RNA(mRNA)表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-155-5p与SIRT1的靶向关系;蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织SIRT1、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Cleaved Caspase-1)和GSDMD蛋白表达水平。结果与sham组比较,IRI组大鼠LVEDD和LVESD升高,LVEF和LVFS降低,血清CK-MB、LDH和cTnT水平升高,心肌组织IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平升高,心肌组织结构破坏严重,心肌纤维排列紊乱,NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量升高,SIRT1蛋白相对表达量降低(均为P<0.05/5)。与IRI组比较,miR-155-5p agomir组大鼠LVEDD和LVESD升高,LVEF和LVFS降低,血清CK-MB、LDH和cTnT水平升高,心肌组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平升高,心肌组织病变程度加重,NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量升高,SIRT1蛋白相对表达量降低;miR-155-5pantagomir组大鼠LVEDD和LVESD降低,LVEF和LVFS升高,血清CK-MB、LDH和cTnT水平降低,心肌组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平降低,心肌组织病变程度减轻,NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量下降,SIRT1蛋白相对表达量升高(均为P<0.05/5)。miR-155-5p与SIRT1在大鼠心肌组织中的表达水平呈负相关,且SIRT1是miR-155-5p的靶基因。结论miR-155-5p可能通过靶向下调SIRT1促进NLRP3介导的心肌细胞焦亡参与调节大鼠心肌IRI。

颅脑损伤术后颅脑感染血清NLRP3、SAA及NFκB的临床意义

目的探讨血清寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、淀粉样蛋白A(SAA)及核转录因子(NFκB)在颅脑损伤术后颅脑感染中的诊断价值。方法选择2020年6月至2022年6月江苏省如皋市人民医院接诊的70例颅脑损伤患者为研究对象,根据感染情况将感染者设为感染组(n=19),未感染者设为对照组(n=51),分析血清NLRP3、SAA及NFκB在颅脑损伤术后颅脑感染中的诊断价值。结果感染组患者血清NLRP3、SAA及NFκB水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);NLRP3、SAA及NFκB水平:轻度感染<中度感染<重度感染,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良组患者血清NLRP3、SAA及NFκB水平显著高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC结果显示,血清NLRP3预测颅脑损伤术后颅脑感染的AUC为0.634,灵敏度为63.43%,特异度为67.40%,截断值为114.02 pg/mL;血清SAA预测颅脑损伤术后颅脑感染的AUC为0.715,灵敏度73.50%,特异度为69.00%,截断值为30.99 mg/L;血清NFκB预测颅脑损伤术后颅脑感染的AUC为0.914,灵敏度为81.40%,特异度为70.00%,截断值为38.27μg/mL,联合检测较单独检测特异度、准确度更高(P<0.05)。结论血清NLRP3、SAA及NFκB在颅脑损伤术后颅脑感染患者中均异常高表达,且三指标联合检测颅脑损伤术后颅脑感染诊断效能更高,临床应用价值高。

NOD小鼠视网膜VEGF表达和视网膜细胞凋亡(英文)

目的:研究NOD小鼠早期糖尿病视网膜VEGF表达和视网膜细胞凋亡情况,以及二者间的关系。方法:NOD小鼠分为对照组(非糖尿病小鼠)(2,4,6,8,12wk组,n=30)和糖尿病组(2,4,6,8,12wk组,n=30)。每组小鼠在规定时间处死,提取血液标本,摘除眼球,分离视网膜备用。ELISA法检测视网膜VEGF和血液VEGF。透射电子显微镜检测小鼠视网膜细胞凋亡情况。结果:糖尿病组血液和视网膜VEGF表达与对照组相比明显增高(12wk,血液标本:4.9±0.4μg/gvs0.19±0.1μg/g,P<0.01;视网膜,165.0±9.0μg/gvs18.0±4.0μg/g,P<0.01)。NOD小鼠早期糖尿病视网膜VEGF表达和血液VEGF表达呈正相关(γ=0.9902,P=0.001)。糖尿病组视网膜神经节细胞和血管内皮细胞凋亡明显增加P<0.01。结论:视网膜VEGF表达增加可能与视网膜凋亡增多有关。早期糖尿病NOD小鼠视网膜VEGF表达增加是多因素的。

辛芷通窍颗粒对慢性鼻窦炎小鼠鼻窦黏膜的保护机制研究

目的:探讨辛芷通窍颗粒对慢性鼻窦炎(CRS)小鼠鼻窦黏膜的保护作用及相关机制。方法:将50只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、辛芷通窍低剂量组、辛芷通窍中剂量组、辛芷通窍高剂量组。采用开放上颌窦后接种3型荚膜型肺炎链球菌的方法建立CRS小鼠模型。辛芷通窍低剂量组予以1.4 g/kg辛芷通窍颗粒灌胃、辛芷通窍中剂量组予以2.8 g/kg辛芷通窍颗粒灌胃、辛芷通窍高剂量组予以5.6 g/kg辛芷通窍颗粒灌胃治疗。利用ELISA法检测小鼠外周血炎症因子水平;采用RT-qPCR、Western blot法检测鼻窦黏膜中相关因子表达。结果:与假手术组相比,辛芷通窍低剂量组、辛芷通窍中剂量组、辛芷通窍高剂量组小鼠外周血炎症因子水平明显低于给药前,且窦黏膜组织中TNF-α、IL-6、IL-10、IL-16、IFN-γ的mRNA及蛋白相对表达低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。与模型组相比,辛芷通窍低剂量组、辛芷通窍中剂量组、辛芷通窍高剂量组小鼠鼻窦黏膜组织中HMGB1、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1蛋白表达降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:辛芷通窍颗粒呈剂量依赖性地抑制HMGB1/NLRP3信号通路激活,抑制CRS小鼠鼻窦黏膜炎症水平。

根瘤菌NOD因子的感知与信号传导

根瘤菌是一类引起豆科植物结瘤固氮的土壤细菌。根瘤中的类菌体固定空气中的氮气为宿主植物提供充足的氮源。共生体系的建立始于细菌与宿主植物间复杂的信号交换过程。植物产生类黄酮诱导相应的根瘤菌合成分泌结瘤因子 ,后者进而诱导宿主植物根系形态变化以及早期根瘤素基因表达。以下将就宿主植物结瘤因子的特异识别和早期信号传导进行讨论。

紫草素调节HIF-1α/NLRP3信号通路对蛛网膜下腔出血大鼠神经功能损伤的影响

目的探究紫草素调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠神经功能损伤的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、YC-1(HIF-1α抑制剂,5 mg/kg)组、紫草素低剂量组(4 mg/kg)、紫草素高剂量组(25 mg/kg)、紫草素高剂量(25 mg/kg)+AG1(HIF-1α激活剂,10 mg/kg)组,每组15只。采用颈内动脉刺破法制备SAH模型。采用Zea-Longa评分法评估6组大鼠神经功能;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和IL-1β水平;HE染色观察大鼠海马组织形态学变化,TUNEL染色法检测海马神经元凋亡率;伊文思蓝染色检测血脑屏障通透性;商品化试剂盒检测大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(MDA)、丙二醛(CAT)水平,Western blot检测大鼠脑组织Bax、Bcl-2、HIF-1α、NLRP3蛋白表达。结果假手术组大鼠海马神经元形态结构正常;与假手术组相比,模型组大鼠海马神经元有大量水肿、结构模糊,有细胞核溶解,变型固缩,部分细胞核消失,大鼠神经功能评分、血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平、海马神经元凋亡率、伊文思蓝渗出量、脑组织MDA水平、Bax、HIF-1α、NLRP3水平显著增加,脑组织SOD、CAT水平、Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,紫草素低剂量组、紫草素高剂量组和YC-1组鼠海马神经元病理损伤显著改善,大鼠神经功能评分、血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平、海马神经元凋亡率、伊文思蓝渗出量、脑组织MDA水平、Bax、HIF-1α、NLRP3水平显著降低,SOD、CAT水平、Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05);与紫草素高剂量组比较,紫草素高剂量+AG1组大鼠海马神经元病理损伤显著加重,大鼠神经功能评分、血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平、海马神经元凋亡率、伊文思蓝渗出量、脑组织MDA水平、Bax、HIF-1α、NLRP3水平显著增加,SOD、CAT水平、Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论紫草素抑制HIF-1α/NLRP3信号通路以降低氧化应激和炎性反应,进而改善SAH大鼠神经功能损伤。

秦艽鳖甲散调控Toll样受体4信号通路改善银屑病小鼠皮损作用机制研究

目的:研究秦艽鳖甲散改善银屑病小鼠皮肤损伤和炎症反应的分子机制。方法:将60只小鼠按照随机数字表法随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组(1 mg/kg)及低剂量、中剂量、高剂量秦艽鳖甲散组(0.98、1.95、3.90 g/kg)。除对照组仅剔除毛发,其余各组均使用咪喹莫特构建银屑病小鼠模型。苏木精-伊红(HE)染色检测皮损组织病理变化;银屑病面积与严重性指数评分(PASI)评估皮损程度;酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清炎症介质水平;实时萤光定量PCR(qRT-qPCR)检测白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-6(IL-6)、Toll样受体4(TLR4)mRNA表达水平;免疫组织化学检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达水平;蛋白免疫印迹检测NLRP3、TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果:与模型组比较,甲氨蝶呤组及低剂量、中剂量、高剂量秦艽鳖甲散组小鼠皮损状态明显改善;PASI评分明显降低;血清炎症介质水平、NLRP3及TLR4/NF-κB通路相关蛋白水平明显降低(均P<0.05)。结论:秦艽鳖甲散能够改善银屑病小鼠皮肤损伤和炎症反应,可能与抑制TLR4/NF-κB通路,下调NLRP3表达有关。

急性脑梗死患者血清miR-22-3p、NLRP3水平与炎性因子及预后不良的关系

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)水平与炎性因子及预后不良的关系。方法选取2021年1月—2022年12月上海中医药大学附属第七人民医院神经内科收治ACI患者106例为ACI组,根据预后情况分为预后不良亚组37例和预后良好亚组69例,另选取同期体检健康者60例为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-22-3p水平,酶联免疫吸附法检测血清NLRP3和炎性因子[白介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。通过Pearson相关性分析ACI患者血清miR-22-3p、NLRP3与IL-1β、IL-18、TNF-α的相关性。分析ACI患者预后不良的影响因素,绘制2项指标的受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测预后的价值。结果与健康对照组比较,ACI组血清miR-22-3p水平降低,NLRP3、IL-1β、IL-18、TNF-α水平显著升高(t/P=18.698/<0.001、27.091/<0.001、30.154/<0.001、35.104/<0.001、39.834/<0.001)。Pearson相关性分析显示,ACI患者血清miR-22-3p与NLRP3、IL-1β、IL-18、TNF-α水平呈负相关(r/P=-0.733/<0.001、-0.719/<0.001、-0.683/<0.001、-0.680/<0.001),血清NLRP3与IL-1β、IL-18、TNF-α水平呈正相关(r/P=0.716/<0.001、0.715/<0.001、0.707/<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,NIHSS评分、IL-1β、IL-18、TNF-α、NLRP3升高为ACI患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.244(1.034~1.497)、1.373(1.067~1.767)、1.047(1.011~1.086)、1.577(1.061~2.343)、1.084(1.022~1.149)],miR-22-3p升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.933(0.888~0.980)]。ROC曲线分析显示,血清miR-22-3p、NLRP3水平联合预测ACI患者预后不良的曲线下面积为0.875,大于两者单独预测的0.786、0.759(Z/P=2.405/0.016、2.517/0.012)。结论ACI患者血清miR-22-3p水平降低和NLRP3水平升高,与炎性因子水平升高和预后不良密切相关,血清miR-22-3p、NLRP3水平联合对ACI患者预后不良的预测价值较高。

枸杞糖肽对角膜碱烧伤小鼠角膜炎症反应及愈合的作用及其机制研究

目的探讨枸杞糖肽(LbGp)在角膜碱烧伤损伤愈合中的作用及其机制。方法根据治疗方式不同将45只健康、SPF级、6~8周、雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(N组)、损伤对照组(PBS组)、LbGp治疗组(LbGp组),每组15只。PBS组和LbGp组小鼠右眼复制碱烧伤模型,采用点眼联合结膜下注射的方式分别给予PBS溶液或LbGp溶液(10 mg/mL)治疗。治疗后第3天采用裂隙灯显微镜及HE染色观察各组小鼠角膜上皮修复情况和角膜组织结构;实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting及免疫组织化学染色技术检测各组小鼠角膜组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、髓过氧化物酶(MPO)的表达及核转录因子κB(NF-κB)的磷酸化水平。治疗后的第14天采用裂隙灯显微镜对角膜混浊程度进行评分,HE染色观察角膜组织结构。结果治疗后第3天LbGp组小鼠角膜上皮愈合速度快于PBS组(P<0.05)。N组、PBS组及LbGp组的NF-κB-p65、NLRP3、IL-1β及IL-6基因和蛋白相对表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05),PBS组均高于N组(P<0.05),LbGp组均低于PBS组(P<0.05)。LbGp组角膜基质中MPO染色阳性的中性粒细胞的浸润较PBS组减轻。治疗后第14天LbGp组小鼠角膜混浊评分低于PBS组(P<0.05)。结论LbGp治疗可以抑制小鼠角膜碱烧伤后NF-κB的激活及NLRP3、IL-1β的表达,从而减轻过度的炎症反应,促进小鼠角膜上皮再生及角膜结构恢复,有助于恢复角膜的透明性和完整性。

慢病毒介导的B区缺失的人凝血因子Ⅷ在NOD/SCID小鼠中的持续表达(英文)

近年来,基因治疗作为一种新的治疗方法给血友病A的治疗提供了新的思路。本研究旨在探讨在体外和NOD/SCID小鼠中应用慢病毒载体介导的血友病A基因疗法的可能性。构建含有B区缺失的人凝血因子Ⅷ(BDDhFⅧ)基因和IRES-eGFP编码序列的慢病毒表达载体pXZ9/BDDFⅧ。通过3质粒共转染293FT包装细胞,包装后感染293FT,HLF,Chang-liver和人骨髓间充质干细胞。在感染后分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA),一期法,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和聚合酶链反应(PCR)法检测凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性,FⅧ抗原,FⅧ的mRNA转录和基因整合情况。超速离心收集病毒颗粒,并通过门静脉注射感染NOD/SCID小鼠。ELISA分析小鼠血浆FⅧ抗原,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,转导后1个月RT-PCR分析小鼠肝脏人FⅧ的转录情况。结果表明:成功制备高浓度的重组慢病毒,并能在体外高效转导靶细胞。感染后72 h能检测到高水平的FⅧ活性和FⅧ抗原。RT-PCR和PCR法能敏感检测到人FⅧ基因转录和整合至感染后的细胞中。在所有接受重组慢病毒颗粒注射后的NOD/SCID小鼠肝脏中均能检测到人FⅧ基因的转录,同时重组慢病毒也能在体内高效转导小鼠肝细胞。在感染后72 h小鼠血浆中人FⅧ水平为(49±6)mU,1周后为(54±8)mU,1个月后为(23±4)mU。结论:携带BDDhFⅧ基因的慢病毒颗粒在体内外能高效转导靶细胞,且所有被转导的靶细胞都能有效的分泌人FⅧ。经过门静脉注射慢病毒颗粒的NOD/SCID小鼠可以持续表达人FⅧ。

天麻素对大鼠分娩镇痛及新生鼠缺血、缺氧性脑损伤的影响及相关机制

目的探讨天麻素(gastrodin,GAS)对大鼠分娩镇痛及新生鼠缺血、缺氧性脑损伤的影响及可能的作用机制。方法将60只妊娠大鼠随机分为空白组、GAS低剂量组、GAS中剂量组、GAS高剂量组和阳性对照组,各12只。产程开始后GAS低剂量组、GAS中剂量组和GAS高剂量组分别腹腔注射50、100、150 mg·kg^(−1) GAS注射液(用生理盐水配制),阳性对照组尾静脉注射盐酸瑞芬太尼5μg·kg^(−1),空白组给予等量生理盐水。用热水甩尾法测定大鼠分娩痛阈值;用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平;用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,RTqPCR)和蛋白印迹法(Western blotting)检测大鼠脊髓组织中核因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核因子-κB p65(p-NF-κB p65)、NOD样受体蛋白3(NOD like receptor protein 3,NLRP3)mRNA和蛋白表达的情况;用Morris水迷宫实验评定各组新生鼠的学习记忆能力;测定各组新生鼠脑组织的含水量;用HE染色观察各组新生鼠海马组织CA1区的病理变化。结果与空白组比较,GAS高、中、低剂量组和阳性对照组大鼠痛阈值、新生鼠跨台次数升高,TNF-α、IL-1β、IL-6、p-NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65 mRNA表达、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平、新生鼠逃避潜伏期和脑组织含水量均明显降低(P<0.05)。与GAS低剂量组比较,GAS中剂量组、GAS高剂量组和阳性对照组的TNF-α、IL-1β、IL-6、p-NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65 mRNA表达、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平、新生鼠逃避潜伏期和脑组织含水量均明显降低(P<0.05)。与GAS中剂量组比较,GAS高剂量组和阳性对照组TNF-α、IL-1β、IL-6、p-NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65 mRNA表达、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平、新生鼠逃避潜伏期和脑组织含水量也明显降低(P<0.05),而GAS高剂量组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论GAS能够降低分娩大鼠产程中对疼痛的敏感度,减少促炎因子表达,改善神经炎症,缓解新生鼠脑损伤,可能是通过抑制NFκB/NLRP3信号通路发挥作用的。

术前血清NF⁃κB、NLRP3水平对脑胶质瘤切除术患者的预后预测价值

目的探究术前血清核因子⁃κB(NF⁃κB)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平对脑胶质瘤切除术患者的预后预测价值。方法选取2020年1月至2023年1月山西白求恩医院收治的80例脑胶质瘤切除术患者为研究对象,随访1年,根据有无复发、死亡等预后情况分为预后良好组(63例)和预后不良组(17例)。对比两组患者术前血清NF⁃κB、NLRP3水平,采用多因素Logistic回归分析影响脑胶质瘤切除术患者预后的影响因素,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估血清NF⁃κB、NLRP3水平对脑胶质瘤切除术患者预后的预测价值。结果预后不良组患者年龄、肿瘤最大径、肿瘤分级、血清NF⁃κB、NLRP3水平与预后良好组患者相比,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、肿瘤最大径、肿瘤分级、血清NF⁃κB、NLRP3水平均为脑胶质瘤切除术患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,单一术前血清NF⁃κB、NLRP3水平及两者联合预测脑胶质瘤切除术患者预后不良的曲线下面积分别为0.734、0.746、0.812,特异度分别为68.91%、72.21%、78.63%,灵敏度分别为75.62%、73.05%、80.68%。结论术前血清NF⁃κB、NLRP3水平与脑胶质瘤切除术患者预后不良有关,可用于预测脑胶质瘤切除术患者的预后,且两项指标联合具有较好的预测效能。

达原饮对Hp感染模型大鼠胃组织和口周皮肤TLR4/NF-κB/NLRP3通路的影响

目的:观察达原饮对幽门螺杆菌(Hp)感染模型大鼠胃组织和口周皮肤Toll样受体4/核因子-κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)信号通路,以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)等炎症因子的影响,探讨达原饮治疗Hp感染的机制。方法:选取44只雄性SD大鼠,随机分为空白组8只及造模组36只,造模组予以Hp菌液灌胃造模,造模成功后,将造模组随机分为模型组、达原饮高剂量组、达原饮低剂量组、西药组,每组各8只,分别予以相应药物灌胃,空白组、模型组予以等量生理盐水灌胃,灌胃2周。观察大鼠造模前后一般情况改变,苏木精-伊红(HE)染色观察口周皮肤和胃组织病理学变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠口周皮肤和胃组织TLR4、NF-κB、NLRP3表达以及血清中TNF-α、IL-1β表达水平。结果:给药干预后,与模型组相比,西药组、达原饮高剂量组、达原饮低剂量组大鼠皮毛柔顺光泽,饮食水量增加,大便逐渐成型,胃黏膜上皮细胞层次基本分明,排列较整齐,炎症细胞浸润减少,口周皮肤角化过度、棘层增厚、毛囊周围轻度炎症细胞浸润等情况均有不同程度改善。与模型组相比,西药组、达原饮高剂量组、达原饮低剂量组大鼠胃组织和口周皮肤TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白表达水平均有不同程度的下调(P<0.05或P<0.01),血清炎症因子TNF-α、IL-1β表达明显下降(P<0.01)。结论:达原饮可能通过干预TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路,抑制TLR4、NF-κB、NLRP3及下游炎症因子的表达,减轻Hp感染模型大鼠胃组织和口周皮肤炎症损伤。

TLR4/NF-κB/NLRP3通路抑制炎症反应作用的研究

Toll样受体(TLRs)是参与非特异性免疫的一类重要的蛋白质,是表达与固有免疫细胞最重要的模式识别受体之一,可识别来源于微生物的具有保守结构的分子,即病原体相关分子模式(PAMAs),从而激活机体产生免疫应答。核因子κB(NF-κB)在几乎所有类型的细胞和组织中都有表达,在调节对外部刺激的显著多样性的反应中起着关键作用,因此是多个生理和病理过程中的关键因素。而核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3),即NLRP3炎性小体通路在脑缺血再灌注和焦亡中具有重要意义,如NLRP3在脑缺血再灌注损伤时在小胶质细胞中被激活,随后在神经元和微血管内皮细胞中表达。由TLRs激活、NF-κB传递、NLRP3启动形成的TLR/NF-κB/NLRP3信号通路在机体各器官炎症反应中起到关键性作用,本文探讨了各类药物通过抑制该通路炎症反应,起到保护身体各大重要器官的作用。

新发糖尿病病人胰腺癌风险预测模型的研究进展

从新发糖尿病发生胰腺癌的危险因素、现有模型的预测能力等方面综述国内外4种新发糖尿病发生胰腺癌风险预测模型,旨在构建更为优化的风险预测模型提供借鉴,为新发糖尿病病人发生胰腺癌风险开展早期筛查与医疗护理决策提供更可靠的依据。

SIRT1-NLRP3轴介导的细胞焦亡在瑞芬太尼抗肝脏缺血-再灌注损伤中的作用研究

目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)-NOD样受体蛋白3(NLRP3)轴在瑞芬太尼抗大鼠肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、IRI组、IRI+瑞芬太尼预处理组(IRI+RPC组)、IRI+SIRT1抑制剂EX-527组(IRI+EX-527组)和IRI+RPC+EX-527组,每组8只。检测各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平;观察肝组织病理;检测大鼠肝细胞凋亡率;检测大鼠肝组织SIRT1、NLRP3、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase-1)和Gasdermin D(GSDMD)蛋白表达。结果与sham组比较,IRI组大鼠肝组织病理评分及肝细胞凋亡率升高,血清ALT、AST、LDH、IL-1β、IL-18水平升高,肝组织SIRT1蛋白相对表达量降低,NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量升高(均为P<0.05)。与IRI组比较,IRI+RPC组肝组织病理评分及肝细胞凋亡率下降,血清ALT、AST、LDH、IL-1β、IL-18水平降低,肝组织SIRT1蛋白相对表达量升高,NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量降低;IRI+EX-527组肝组织病理评分及肝细胞凋亡率升高,ALT、AST、LDH、IL-1β、IL-18水平升高,肝组织SIRT1蛋白相对表达量下降,NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量升高(均为P<0.05)。与IRI+RPC组比较,IRI+RPC+EX-527组肝组织病理评分及肝细胞凋亡率升高,ALT、AST、LDH、IL-1β、IL-18水平升高,肝组织SIRT1蛋白相对表达量下降,NLRP3、Cleaved Caspase-1、GSDMD蛋白相对表达量升高(均为P<0.05)。结论SIRT1可通过抑制NLRP3介导的细胞焦亡参与调节瑞芬太尼抗大鼠肝脏IRI。

滋膵益肾汤对老年糖尿病肾病疗效及外周血NOD样受体蛋白3炎性小体和血管内皮生长因子的影响

【目的】研究滋膵益肾汤对老年糖尿病肾病疗效及外周血NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体和血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。【方法】将112例老年糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证患者随机分为研究组和对照组,每组各56例。2组患者均给予降压、调脂、降糖、纠正电解质紊乱、应用肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)抑制剂和补充优质蛋白质等基础治疗,在此基础上,研究组给予口服滋膵益肾汤治疗,疗程为3个月。观察2组患者治疗前后糖代谢指标、肾功能指标、血液流变学指标及血清NLRP3、VEGF水平的变化情况,评价2组患者的中医证候疗效及安全性。【结果】(1)中医证候疗效方面:治疗3个月后,研究组的总有效率为89.3%(50/56),对照组为75.0%(42/56),组间比较,研究组的中医证候疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)糖代谢指标方面:治疗后,2组患者的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平均较治疗前降低(P<0.05),且研究组的降低作用均明显优于对照组(P<0.05)。(3)肾功能指标方面:治疗后,2组患者的肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白量均较治疗前明显改善(P<0.05),且研究组的改善作用均明显优于对照组(P<0.05)。(4)血液流变学指标方面:治疗后,2组患者的全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度均较治疗前明显改善(P<0.05),且研究组的改善作用均明显优于对照组(P<0.05)。(5)血清NLRP3、VEGF水平方面:治疗后,2组患者血清NLRP3、VEGF水平均较治疗前明显下降(P<0.05),且研究组的下降作用均明显优于对照组(P<0.05)。(6)安全性方面:治疗期间,2组患者均未发生严重不良反应,也均无严重胃肠道不适及过敏反应等情况发生。【结论】滋膵益肾汤治疗老年糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证患者疗效确切,能够有效降低患者FBG、2h PG、HbA1c水平,改善肾功能,减少24 h尿蛋白量,降低血黏度和体内NLRP3、VEGF水平。

抑郁症患者胶质细胞源性神经营养因子、Nod样受体蛋白3炎症小体表达水平及其诊断价值

目的探究抑郁症患者胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体表达水平变化及其诊断价值。方法选择2018年1月~2019年6月浙江省宁波市康宁医院(以下简称“我院”)情感障碍科收治的100例抑郁症患者作为抑郁症组,另选择同期在我院进行常规体检的60名健康人群作为对照组。比较两组患者以及不同严重程度的抑郁症患者GDNF表达情况及血清NLRP3炎症小体水平,分析抑郁严重程度与GDNF、血清NLRP3炎症小体水平的相关性,计算GDNF、NLRP3炎症小体单项检测以及联合检测在诊断抑郁症中的诊断效能。结果抑郁症组GDNF水平明显低于对于对照组,血清NLRP3炎症小体水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。不同严重程度抑郁症患者的GDNF及NLRP3炎症小体水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与轻度抑郁组比较,中度抑郁组、重度抑郁组GDNF水平降低、NLRP3炎症小体水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),与中度抑郁组比较,重度抑郁组GDNF水平降低、NLRP3炎症小体水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。GDNF表达水平与抑郁症严重程度均呈负相关(r=-0.603,P<0.05),血清NLRP3炎症小体表达水平与抑郁症严重程度均呈正相关(r=0.762,P<0.05)。GDNF、NLRP3炎症小体联合检测诊断抑郁症的敏感度和特异度明显高于GDNF、NLRP3炎症小体单项检测,且有较好的特异度。结论GDNF及血清NLRP3炎症小体的异常表达与抑郁症的发生、发展密切相关,GDNF、NLRP3炎症小体联合检测有助于抑郁症诊断和病情评估。