Lingo-1及其相关传导通路在神经系统修复中的研究进展

富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白结构域的Nogo受体作用蛋白-1（Lingo-1）在神经元与少突胶质细胞修复、神经突延长、轴突再生等过程中，通过NgR/p75/Lingo-1或NgR/TROY/Lingo-1、WNK1、Myt1与Myt1l等通路发挥明确的负性调节作用，阻断Lingo-1及其通路可促进损伤的中枢神经系统再生，提示Lingo-1有可能成为治疗神经精神系统疾病的新靶点。

血塞通注射液及NEP1-40对脑梗死大鼠大脑皮层及血清炎症因子表达的影响

目的:分析血塞通注射液及Nogo胞外肽端残基1-40(NEP1-40)对SD大鼠脑梗死大脑皮层及血清中促炎因子与抑炎因子表达的影响。方法:25只雄性健康SD大鼠,依据随机数字表法分成模型组、NEP1-40组、血塞通组、假手术组及NEP1-40联合血塞通组(P+N组),每组5只。依据改良Longa线栓栓塞法建立脑梗死模型,各给药组分别给予相应药物,干预28天后处死大鼠,观察大鼠术后体质量和神经功能评分改变状况及血清、脑组织内白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠术后7、14、28天体质量明显下降;神经功能评分明显上升;血清TNF-α、TGF-β1含量上升,IL-10含量下降;脑组织TNF-α、IL-1β、TGF-β1蛋白表达上升,IL-10蛋白表达下降;差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,NEP1-40组、血塞通组及P+N组大鼠术后7、14、28天体质量显著上升,神经功能评分明显下降,血清TNF-α含量下降,IL-10含量上升;P+N组大鼠血清IL-β1含量下降;血塞通组及P+N组大鼠脑组织TNF-α、IL-1β蛋白表达下降,TGF-β1、IL-10蛋白表达上升;NEP1-40组大鼠脑组织TNF-α、IL-1β蛋白表达下降,IL-10蛋白表达上升;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:血塞通注射液及NEP1-40通过调整促炎、抑炎因子表达来加快脑梗死大鼠神经功能恢复。

NEP1-40和NT-3基因共转染施万细胞来源外泌体对神经干细胞存活与分化的影响

目的 观察Nogo胞外肽端残基1-40(Nogo extracellular peptide residues 1-40,NEP1-40)和神经营养因子3(neurotrophin 3,NT-3)基因共转染施万细胞来源外泌体(Schwann cell-derived exosome,SCDE)对神经干细胞(neural stem cell,NSC)存活与分化的影响,为SCDE与NSC共移植的体内试验奠定基础。方法 通过慢病毒载体将NEP1-40及NT-3双基因转染入施万细胞,收集SCDE进行鉴定。选取传代3次的NSC,将其接种到接种板中,分为常规培养组、单纯外泌体培养组(加入空载质粒修饰SCDE进行培养)和双基因外泌体培养组(加入双基因修饰SCDE进行培养)。检测各组细胞的活性,并通过免疫荧光检测神经元特异核蛋白(neuronal nuclei,NeuN)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和半乳糖神经酰胺酶(galactosylceramidase,GALC)阳性的细胞来评价NSC的存活与分化情况。结果 双基因转染后荧光强度均较高且细胞状态较好。双基因组NEP1-40和NT-3的信使RNA和蛋白相对表达水平均高于空载质粒组(P<0.05)。双基因组SCDE中NEP1-40和NT-3的蛋白相对表达水平均高于空载质粒组(P<0.05),两组的SCDE中CD63的蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。细胞活性方面,双基因外泌体培养组细胞活性最强,单纯外泌体培养组次之,常规培养组最弱,组间两两比较差异有统计学意义(1.28±0.04 vs. 0.72±0.09 vs. 0.41±0.04,P<0.05)。细胞存活情况方面,双基因外泌体培养组的NeuN阳性细胞(5.23±0.22 vs. 2.36±0.09 vs. 1.00±0.01)和GALC阳性细胞(2.29±0.06 vs.1.75±0.02 vs.1.00±0.04)存活情况最佳,单纯外泌体培养组次之,常规培养组最差,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);常规培养组的GFAP阳性细胞存活情况最佳,单纯外泌体培养组次之,双基因外泌体培养组最差(1.00±0.04 vs. 0.52±0.04 vs. 0.30±0.01),组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。细胞分化情况方面,双基因外泌体培养组的NeuN阳性细胞(0.44±0.02 vs. 0.29±0.01 vs. 0.16±0.01)和GALC阳性细胞(0.38±0.07 vs. 0.23±0.02 vs.0.12±0.01)分化情况最佳,单纯外泌体培养组次之,常规培养组最差,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);常规培养组的GFAP阳性细胞分化情况最佳,单纯外泌体培养组次之,双基因外泌体培养组最差(0.52±0.05 vs.0.42±0.03 vs. 0.30±0.09),组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 通过慢病毒载体可将NEP1-40及NT-3双基因成功转染入施万细胞,能有效提高SCDE中相关蛋白含量,且该外泌体在体外能有效促进NSC的存活与分化。