暗纹东方鲀非01霍乱弧菌的鉴定及毒力基因检测

在对养殖暗纹东方病害调查中,从呈典型症状病鱼腹腔和肠道粘液中分离到2株(J-1和H-3)菌株,经生化特性和血清型鉴定为非01群霍乱弧菌(Non-01Vibrio cholerae)。注射、创伤和浸泡3种方式进行人工感染试验表现出较强的致病性,出现症状与自然发病鱼相同。为进一步确认分离菌株的分类地位,使用P1、P2引物,以非01群霍乱弧菌N92001菌株和01群霍乱弧菌N16961菌株为对照,对分离菌株进行PCR扩增,得到451bp的DNA片段。根据现有霍乱弧菌肠毒素ctxA基因序列设计引物P3,P4,以N16961菌株为阳性对照,PCR扩增结果均得到大小为400bp的DNA片段。在对H-3菌株的扩增片段进行纯化、克隆和测序,得到407bp序列,该菌株与N16961菌株中肠毒素ctxA基因序列的完全一致,证实该片段源于ctxA基因。进一步说明从暗纹东方体内分离到的J-1和H-3菌株具有霍乱肠毒素ctxA,有一定的致病力。

霍乱弧菌O1胶体金免疫层析快速检测法的建立

目的建立一种快速、简易的检测霍乱弧菌O1群的胶体金免疫层析法(GICA)。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测霍乱弧菌O1群,对该法进行敏感性、特异性和稳定性分析。与细菌培养法对比检测208份临床标本。结果该法能在10分钟内完成检测;该试纸条仅与霍乱弧菌O1群阳性样品发生特异性反应;检测霍乱弧菌O1群的最低检出浓度为1×105cfu/mL;与细菌培养法对比检测208份临床标本,特异性和灵敏度均达100%。结论新建立的霍乱弧菌O1群胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查。

养殖对虾弧菌病致病菌——非01群霍乱弧菌的生物学性状与致病性

本文对养殖对虾所患的一种弧菌病作了研究报道。这种病的病原是非01群霍乱弧苗。这是一种菌体短的无芽孢杆菌,弧状,单个,有时联成S状。以一根单极毛运动,鞭毛有外鞘。草兰氏染色阴性。生化反应和已知的01霍乱弧苗基本相同,但不被01霍乱弧菌多价血清凝集。这种病的症状是行动呆滞,时而浮头或在水面上翻滚;眼球肿胀,由黑变暗以至溃烂仅留眼柄,随着病情加重全身肌肉发白。一般在一周内死亡。

01群与非01群0139型霍乱弧菌毒力的对比研究

非０１群０１３９型霍乱弧菌是近年引起南亚次大陆霍乱流行的新型病原体，将其与０１群霍乱弧菌的毒力特性进行对比研究对于了解其特性及研制相关的菌苗具有重要意义。本文报告了４株０１３９型霍乱弧菌与０１群霍乱弧菌菌株的对比测定结果。发现０１３９型霍乱弧菌与０ｌ群霍乱弧菌有所不同，呈不透明的菌落形态，光学显微镜及电子显微镜镜检显示有荚膜的表型，在体内具有较高的繁殖能力并产生肠毒素，体内侵袭试验结果表明所有４株０１３９型菌株均能形成菌血症，补体抵抗力测定证实０１３９型菌株具有高度抵抗正常人血清杀菌作用的能力及较高的小鼠致死性。据信荚膜是一种重要的毒力决定簇，是保护菌体免受宿主防御机制作用的重要因子。经０１３９株死菌苗免疫的小鼠产生了抵抗同型菌株攻击的能力，表明０１３９株死菌苗可提供抗同型菌株感染的保护作用。

中国对虾糠虾幼体病原菌(非01群霍乱弧菌)的研究

本文对中国对虾糠虾幼体的一种病原菌———非０１群霍乱弧菌作了研究报道。这种病的症状是病虾运动能力差、趋光性弱、镜检发现肠道肿胀。从垂死病虾中分离到５株细菌，经感染健康糠虾幼体得到与病虾相同症状。５株细菌的４７项形态及生理生化特性与霍乱弧菌相同，但不被０１群霍乱弧菌多价血清凝集。血清学分型结果均为不同的ＶＢＯ血清型ＶＢＯ５，１４，２６，４７，５６。用ＤＮＡ霍乱ＣＴ基因探针菌落原位杂交及小鼠肠结扎法测肠毒素，表明菌株有强毒力。分离菌株对小鼠的ＬＤ５０为１５８×１０８个／只。

外膜蛋白(ompw)引物扩增技术在非01群霍乱检测中的应用

〔目的〕采用霍乱弧菌外膜蛋白合成一对引物 ,建立一种灵敏、特异的PCR方法检测非 0 1群霍乱弧菌。〔方法〕在实验室对 42株来自外环境和病人中分离出的非 0 1群霍乱弧菌采用PCR技术作了效果观察 ,并以大肠、痢疾、沙门菌等作为阴性对照其敏感性和特异性进行了验证。〔结果〕42株非 0 1群霍乱弧菌采用外膜蛋白引物行PCR扩增 ,阳性率为 10 0 %,扩增片段为 5 88bp ,阴性对照扩增均为阴性。〔结论〕霍乱弧菌外膜蛋白引物快速检测非 0

由一起暴发性食物中毒患者粪便中分离出VBO_2型非01群霍乱弧菌的研究

本文报告了由暴发性食物中毒患者粪便中分离出非01群霍乱弧菌的研究结果。结果表明,在收集到的7例住院患者的粪便中有6例检出了相同血清型—VBO_2型非01群霍乱弧菌。在患者恢复期血清中,该菌相应抗体呈低度升高,用毒力基因探针检测表明,所有分离菌株均有霍乱溶血毒素同源性基因,但未发现霍乱肠毒素基因,提示了该菌致病因子的复杂性。

非O1/O139群霍乱弧菌致肝硬化患者血流感染

目的 探讨肝硬化患者血液培养中分离培养的霍乱弧菌的鉴定和分型。方法 通过革兰染色和VITEK2 Compact全自动细菌鉴定分析系统,鉴定1名肝硬化患者血标本中霍乱弧菌,用血清凝集试验鉴定血清型,纸片琼脂扩散法(K-B法)测定药物敏感性。结果 检出的霍乱弧菌为非O1/O139群霍乱弧菌,不引起霍乱。菌株对哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、美罗培南、左氧氟沙星、四环素、复方新诺明等药物敏感。结论 非O1/O139群霍乱弧菌引起的血流感染可发生于有肝病或免疫力低下的患者。

滕州市致病性弧菌检测报告

报道了1995年以来,滕州市致病性弧菌种类、分布等病原学检测情况。共检疑似霍乱病人粪便1562人份,检出致病性弧菌127株,检出率为8.13％,其中非01群霍乱弧菌居首位83株占65.35％,其次为麦氏弧菌13株占10.4％,溶藻弧菌11株,河弧菌9株,副溶血弧菌6株,弗尼斯弧菌5株。83株非01群霍乱弧菌可分型者61株,分布8个血清型,定型率为73.49％,127株致病性弧菌产类霍乱肠毒素(G)47株占37.00％,以非01群霍乱弧菌产生类CT所占比例为最高,从而说明它在毒力和致病性方面占有重要地位。

2006年鸭绿江水及水产品中检出霍乱弧菌报告

〔目的〕通过对鸭绿江水及水产品中O1群和O139群霍乱弧菌检测,了解霍乱弧菌在其中的存活及菌型分布情况,为制定防治措施提供依据。〔方法〕采集鸭绿江水及水产品进行霍乱弧菌分离培养,血清学诊断符合O1群和O139群霍乱弧菌者,按国标法进行系统菌株鉴定。〔结果〕从216份(江水189份、水产品27份)标本中检出9株O1群霍乱弧菌,全部为江水中检出,总检出率为4.17%。其中稻叶型2株,占22.2%;小川型7株,占77.8%。〔结论〕检出的9株O1群霍乱弧菌均属非流行株,江水中霍乱弧菌的检出率高于水产品的检出率。总检出率较高,提示在今后霍乱监测中,鸭绿江水应继续作为重点。