老年结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达变化和意义

目的探讨染色体凝缩蛋白复合物I(NCAP)D2、Krüppel样因子(KLF)5蛋白及跨膜受体蛋白Notch1 mRNA对老年结肠癌患者预后的预测价值。方法选取老年结肠癌患者85例,术中采集肿瘤组织和正常组织(距离肿瘤组织5 cm以上),Western印迹检测组织标本中NCAPD2、KLF5蛋白表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织标本中Notch1 mRNA表达。收集老年结肠癌患者的人口学特征和临床病理资料;以患者出院时日期为随访起点,进行3年随访,记录患者生存情况,分为预后良好组(生存),不良组(死亡)。结果老年结肠癌患者结肠癌组织中NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于正常组织(P<0.01)。NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平在不同病理分期、分化程度、淋巴结转移情况、远端转移情况的结肠癌患者差异均有统计学意义(P<0.01);其中,浸润程度T3~T4、有淋巴结转移、有远端转移的结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于浸润程度T1~T2、无淋巴结转移、无远端转移的结肠癌患者(P<0.01);随着分化程度的降低,结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平逐渐升高(P<0.01)。不良组NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于预后良好组(P<0.01)。构建受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平对老年结肠癌患者预后均具有较高的预测价值(P<0.01);各指标联合检测对老年结肠癌患者预后的预测价值最高。结论老年结肠癌患者肿瘤组织中NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA高表达,且与浸润程度、分化程度及转移情况密切相关,联合检测可用于患者预后评估。

非小细胞肺癌中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达及意义

目的探讨Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织的表达及其临床病理学意义。方法采用免疫组化SP法和原位杂交法分别检测65例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达。结果Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌中阳性表达率分别为81.5%(53/65)、96.9%(63/65)、93.8%(61/65)、73.8%(48/65),均明显高于正常支气管上皮组织阳性表达率(P<0.05);NSCLC中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达均与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Notch1、HIF-1与VEGF蛋白间均正相关;Notch1蛋白与Notch1 mRNA的表达呈正相关。结论Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在NSCLC中均表达上调,提示在肺癌的发生、发展中可能起重要作用;检测NSCLC组织Notch1蛋白及mRNA可作为判断肿瘤侵袭与转移的重要指标。

P210阳性慢性髓系白血病中Notch1与ASB2基因mRNA异常表达的研究

目的:研究P210阳性慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者骨髓中单个核细胞Notch1和ASB2基因mRNA的表达,探讨P210阳性CM L患者中Notch信号通路与蛋白泛素化作用的相关性,为研究白血病发生发展的分子机制和临床治疗提供有价值的参考。方法:收集初诊的32例P210阳性CML患者以及34例非白血病和健康人(对照组)骨髓,采用实时荧光定量PCR检测骨髓中Notch1和Asb2 mRNA表达情况。结果:CML患者骨髓中Notch1 mRNA表达量相对于对照组升高了337.8倍,差异有统计学意义(t=36.3,P<0.01),CML患者骨髓中ASB2 mRNA表达量高于对照组(t=19.4,P<0.01)。Notch1与ASB2 mRNA表达量具有相关性(r=0.504,P<0.01)。结论:P210阳性CM L患者骨髓中可能存在Notch1和ASB2的异常表达,这种异常表达可能参与CM L的发生发展。

miRNA-34a及Notch1对浸润性膀胱尿路上皮癌细胞转移潜能的影响

目的探讨微小RNA(miRNA)-34a(miR-34a)及Notch1对浸润性膀胱尿路上皮癌(invasive bladder urothelial carcinoma,IBUC)细胞株转移潜能的影响。方法体外培养IBUC细胞系T24与5637细胞,分别以miR-34a表达质粒与其对照质粒及小干扰RNA(siRNA)Notch1表达质粒与其对照质粒转染IBUC细胞珠T24与5637细胞,以便经miRNA载体过表达miRNA-34a及RNA干扰技术沉默Notch1。通过细胞转染实验、细胞增殖实验、细胞迁移实验以及细胞侵袭实验研究抑癌因子miR-34a及沉默癌基因Notch1对IBUC细胞转移潜能的影响。结果 miR-34a表达质粒与siRNA Notch1表达质粒的转染结果:转染miR-34a后,T24细胞与5637细胞的miR-34a表达均显著增高,分别为转染对照质粒的T24细胞与5637细胞的10.69倍与14.27倍(P均<0.01);转染si-Notch1后,Notch1蛋白的表达水平下降;MTS法检测结果显示,转染miR-34a后及转染si-Notch1后,T24及5637细胞的增殖均受到明显抑制,增殖速率均减慢,(P均<0.01);转染miR-34a的T24与5637细胞迁移细胞与侵袭细胞数量均减少,同株细胞的组间计数比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论在IBUC的T24与5637细胞株中,过表达miR-34a与沉默Notch1均能抑制T24与5637两种细胞株的迁移、侵袭能力,依据我们前期实验的结果推测,在IBUC中,miR-34a可靶向调节Notch1继而对细胞的迁移、侵袭发挥抑制作用。miR-34a有望作为一个新的肿瘤抑制因子,为IBUC的早期诊疗及预后评价提供理论参考。