lncRNA NEAT1对脂多糖所致肺泡巨噬细胞NF-κB活化的影响

目的检测沉默lncRNA NEAT1对LPS所诱导的NR8383肺泡巨噬细胞炎症因子IL-6分泌,NF-κB核移位的影响,探讨NEAT1调控肺泡巨噬细胞炎症反应的可能机制。方法NR8383肺泡巨噬细胞分为对照组,LPS(10 mg/L)组,LPS(10 mg/L)+siNC组,LPS(10 mg/L)+siNEAT1组。分别在6h后收集各组细胞和培养上清,RT-qPCR检测细胞内IL-6 mRNA和NEAT1表达,ELISA检测上清中细胞因子IL-6蛋白表达分泌,Western blot实验检测细胞核内NF-κB p65表达。结果LPS刺激NR8383肺泡巨噬细胞后,与对照组相比,细胞内NEAT1和IL-6 mRNA表达上调,培养上清中IL-6蛋白分泌增加(均P<0.05);siRNA沉默NEAT1后,巨噬细胞内NEAT1表达下调;与LPS组比较,siNEAT1组培养上清中IL-6分泌减少,NF-κB p65蛋白在细胞核内表达减少(均P<0.05)。结论肺泡巨噬细胞沉默lncRNA NEAT1可抑制IL-6分泌和NF-κB核转位,推测NEAT1通过此机制减轻NR8383肺泡巨噬细胞炎症反应。

针灸调控TNF-α/TLR4/NF-κB改善顺铂小鼠肝损伤的作用机制

目的通过观察针灸对顺铂(Cisplatin,DDP)所致肝损伤小鼠与肝细胞炎症反应相关的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)表达含量的变化,以及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和谷氨酸脱氢酶(GLDH)活性变化,并结合小鼠肝脏病理变化,阐释针灸对DDP引起肝损伤小鼠的作用机制。方法选用SPF雄性KM小鼠,随机分为4组,按照10 mL·kg^(-1)空白组腹腔注射0.9%NaCl溶液,其余3组按照体质量腹腔注射同剂量DDP溶液,24 h后模型成功。干预组采用“大椎”“肝俞”“肾俞”“足三里”,分别给予针刺和艾灸干预,其余两组陪同固定不干预,每天1次,持续5天。断食1天后取材,生化检测血清中ALT、AST、GLDH含量,Western blot测定肝脏中TNF-α、TLR4、NF-κB蛋白表达含量。结果与空白组比,模型组血清中ALT、AST、GLDH活性增高,肝脏中TNF-α、TLR4、NF-κB蛋白表达升高,均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比,针刺组和艾灸组ALT、AST、GLDH活性和TNF-α、TLR4、NF-κB蛋白表达均降低,均有统计学意义(P<0.05)。与针刺组比,艾灸组血清中ALT、AST活性降低,GLDH活性升高,TNF-α蛋白表达降低,但均无统计学意义(P>0.05),TLR4、NF-κB蛋白表达降低,有统计学意义(P<0.05)。结论针灸可能通过抑制TNF-α、TLR4的过度表达,从而降低NF-κB过度表达,减少炎症因子的过度释放,从而减轻DDP小鼠肝脏炎症的发生,降低DDP对肝脏产生的毒副作用,对肝脏起到有效的保护作用。

核因子-κB在慢性髓细胞白血病急变期前后的变化

目的探讨核因子-κB（NF—κB）在慢性髓细胞白血病（CML）急变期前后的表达及意义。方法选择2011年2月～2013年2月于新疆喀什人民医院血液科住院治疗的25例慢性髓细胞白血病慢性期（CML—CP）（CML—CP组）、16例慢性髓细胞白血病急变期（CML—BC）患者（CML—BC组）、30例缺铁性贫血或巨幼细胞性贫血患者（对照组）为研究对象。采用凝胶迁移或电泳迁移率实验检测三组人骨髓细胞中NF-κB的表达。结果对照组患者的NF—KB活性测定均为阴性．CML—CP组也仅4例患者检测到NF—KB活性增强，CML—BC组14例患者的NF—KB活性增强。CML—BC组患者NF—κB活化率明显高于CML—CP组及对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；CML—CP组活化率高于对照组，差异有高度统计学意义（P〈0．01）。CML—BC组患者NF—KBmRNA表达水平（22．91±0．15）明显高于对照组（0）及CML—CP组（11．19±0．03），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论与慢性髓细胞白血病慢性期比较．急变期NF-κB活性增强。表达增加，可作为慢性髓细胞白血病急性病变的重要标志物。

莱菔硫烷对人肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制

目的探讨莱菔硫烷(SFN)对人肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法体外培养人肾癌细胞786-O,并将其分为4组:空白对照组、SFN低浓度组(5μmol/L)、SFN中浓度组(10μmol/L)、SFN高浓度组(20μmol/L),用CCK-8检测肾癌细胞786-O增殖活化的情况;分别用细胞划痕、Transwell迁移实验观察SFN对肾癌细胞786-O迁移能力的影响;用Transwell侵袭实验观察SFN对肾癌细胞786-O侵袭能力的影响;运用Western blot和qRT-PCR方法检测SFN对上皮间质转化(EMT)相关蛋白和mRNA表达的影响;用Western blot检测SFN对NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。结果SFN处理24、48、72 h后,肾癌细胞786-O的增殖活性随着SFN浓度的升高而下降;与对照组相比,SFN处理组的肾癌细胞迁移和侵袭能力均显著降低;此外,随着SFN浓度的升高,肾癌细胞786-O中E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平逐渐升高,而N-cadherin、Vimentin的mRNA及蛋白表达水平随之降低;NF-κB信号通路相关蛋白磷酸化的p65和磷酸化的IκBα的蛋白水平随SFN浓度增加而降低。结论SFN能够显著抑制人肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭的能力,其可能通过抑制NF-κB信号通路进而阻碍肾癌的EMT进程来发挥抗肿瘤作用。

抗阻训练联合有氧运动在急性心肌梗死患者PCI术后康复中的应用效果

目的:探讨抗阻训练联合有氧运动在急性心肌梗死患者PCI术后康复中的应用效果。方法:回顾性分析2019年1月至2021年1月在该院行PCI术治疗的80例急性心肌梗死患者的临床资料,按术后康复锻炼方法不同将其分为对照组与观察组各40例。两组均于PCI术后给予常规康复训练指导,在此基础上对照组采用有氧运动训练,观察组采用抗阻训练联合有氧运动训练,比较两组训练前后的心功能指标[左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)和左室射血分数(LVEF)]水平,血清可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)、核因子κB(NF-κB)水平,中国心血管病人生活质量问卷(CQQC)评分及6 min步行距离(6MWD)。结果:训练后,观察组LVEDD、LVESD、sICAM-1、NF-κB水平低于对照组,LVEF水平、CQQC评分高于对照组,且6MWD长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在常规康复训练基础上,对急性心肌梗死PCI术后患者开展抗阻训练联合有氧运动,可提高患者心功能、活动耐力和生命质量,降低sICAM-1、NF-κB水平,效果优于单用有氧运动。

基于多个miRNAs调节NF-κB信号通路探讨艾灸干预腹泻型肠易激综合征模型大鼠的抗炎机制研究

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠多个微小RNAs(miRNAs)调节核因子-κB(NF-κB)、炎性因子的影响,探讨艾灸干预IBS-D的抗炎机制。方法:从52只初生幼鼠中随机抽取12只作为正常组,剩余大鼠制备IBS-D模型,将36只造模成功的大鼠随机分为模型组、药物组和艾灸组,每组12只。药物组予腹腔注射吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC);艾灸组予“天枢”“上巨虚”艾灸治疗,每次20 min,均每天1次,共干预7 d。于造模前后及干预后测量各组大鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值;干预后采用ELISA法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β、IL-8含量,HE染色观察各组大鼠结肠组织形态,实时荧光定量PCR法检测大鼠结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65 mRNA的表达量,免疫荧光法检测大鼠结肠组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-8的蛋白表达。结果:造模后模型组大鼠体质量、AWR最小容量阈值均低于正常组(P<0.01),稀便率均高于正常组(P<0.01);干预后,模型组大鼠结肠组织炎性细胞浸润明显,血清TNF-α、IL-1β、IL-8含量均高于正常组(P<0.05),结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65mRNA表达量均高于正常组(P<0.05),结肠组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-8蛋白表达亦高于正常组(P<0.01)。干预后,药物组和艾灸组大鼠体质量、AWR最小容量阈值均高于模型组(P<0.05),稀便率均低于模型组(P<0.05),结肠组织炎性细胞浸润较模型组减少,血清TNF-α、IL-1β、IL-8含量及结肠组织NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-8蛋白表达均低于模型组(P<0.05,P<0.01);药物组大鼠结肠组织miR-125b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65 mRNA表达量均低于模型组(P<0.05),艾灸组大鼠结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a及NF-κB p65 mRNA表达量均低于模型组(P<0.05)。大鼠结肠组织miR-155、miR-125b、miR-29b、miR-31、miR-18a与NF-κB p65mRNA呈正相关(0<r<1,P<0.01)。结论:艾灸“天枢”“上巨虚”干预IBS-D大鼠的抗炎作用机制可能与调节多个miRNAs抑制NF-κB信号通路、降低炎性因子表达有关。