LC-MS/MS法测定人血浆中阿托伐他汀及其代谢物的浓度及在中国健康志愿者中生物等效性研究的应用

目的建立可测定人血浆中阿托伐他汀(ATO)及其代谢物浓度的LC-MS/MS分析方法,并将其应用于人体生物等效性研究。方法血浆中目标成分采用叔丁基甲基醚∶乙酸乙酯(1∶1)萃取,以ATO-d5、邻位阿托伐他汀(o-ATO)-d5、对位阿托伐他汀(p-ATO)-d5为内标,流动相A为2 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液-乙腈-甲酸(900∶100∶1),B为乙腈,梯度洗脱。采用电喷雾离子源,正离子模式,MRM监测,ATO和内标的离子选择通道分别为m/z 559.3→440.1和564.2→445.2。对健康受试者口服相同剂量的氨氯地平阿托伐他汀钙片(5 mg/10 mg)受试制剂或参比制剂后的血药浓度进行定量分析。结果ATO和o-ATO的线性范围为0.150~20.000 ng·mL^(-1),p-ATO的线性范围为0.015~2.000 ng·mL^(-1);ATO和o-ATO的定量下限均为0.150 ng·mL^(-1),p-ATO为0.015 ng·mL^(-1)。此外,批内和批间精密度的RSD均小于15%。32名健康受试者口服5 mg/10 mg氨氯地平阿托伐他汀钙片参与了该研究。受试者空腹和餐后状态下服用氨氯地平阿托伐他汀钙片受试制剂和参比制剂的血浆药物最大浓度(Cmax)、时间-浓度曲线下面积(AUC0~t和AUC0~∞)的几何均值比值的90%置信区间均在80%~125%内,两制剂具有生物等效性。结论该方法准确可靠,重复性好,进样过程简单,可用于人血浆中ATO及其代谢物的浓度测定。

液质联用法同时测定人血浆中阿托伐他汀、邻羟基阿托伐他汀、对羟基阿托伐他汀及其药动学

目的建立液质联用（LC—MS／MS）方法测定人血浆中阿托伐他汀（AT）、邻羟基阿托伐他汀（O-AT）、对羟基阿托伐他汀（P-AT）的含量，并研究男性健康志愿者单剂量服用阿托伐他汀片后AT及其代谢产物O-AT、P—AT在体内的药动学行为。方法24名健康男性志愿者单剂量口服阿托伐他汀片20mg，于指定时间采集血样，血浆样品经乙酸乙酯提取，采用LC—MS／MS测定人血浆中AT及其代谢产物的浓度。色谱柱为PhenomenexLunaC8（2．0mm×50mm，3μm），流动相为乙腈：0．1％甲酸水溶液（50：50，V／V），检测离子为m／z5 59．3→440．3（AT）；m／z575．3→440．3（O-AT，P—AT）：m／z564．4→445．3（阿托伐他汀氘标AT—d5）；m／z580．4→445．3（邻羟基阿托伐他汀氘标O-AT-d5，对羟基阿托伐他汀氘标P-AT-d5）。测定AT、O-AT、P-AT血药浓度，计算其药动学参数。结果AT、O-AT、P-AT线性范围分别为0．0287～22．92μg·L-1（r=0．9986）、0．0138～11．00μg·L-1（r=0．9963）、0．0087～1．11μg．L-1（r=0．9983）。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数（RSD）均小于10％，精密度和准确度等均符合生物样品分析要求。人体中AT药动学参数：ρmax为（6．33±2．78）μg·L-1，tmax为（1．70±1．40）h，t1/2β为（10．67±2．05）h，AUC0-t为（48．59±14．65）μg·h·L-1；0-AT药动学参数：ρmax为（4．53±1．94）μg·L-1，tmax为（2．90±1．30）h，t1/2β为（11．54±2．04）h，AUC0-t为（52．82±18．55）μg·h·L-1；P-AT药动学参数：ρmax为（0．25±0．14）μg·L-1，tma为（9．1±10．2）h，t1/2β为（29．51±13．94）h，AUC0-t为（7．69±3．56）μg·h·L-1。结论建立的LC—MS／MS分析方法准确灵敏，适于临床药动学研究。