53基因及CAR受体对ONYX-015肿瘤杀伤作用的影响

目的:利用肿瘤特异性增殖型腺病毒ONYX-015分别感染具有柯萨奇病毒和腺病毒联合受体(CAR)水平正常、p53正常或突变的,以及CAR水平低下、p53突变的肿瘤细胞株,研究ONYX 015对这些肿瘤细胞的特异性增殖及杀伤能力。方法:以正常的肝细胞株L02作为对照,用细胞病变效应(CPE)实验观察ONYX-015对细胞的选择性杀伤效应;病毒增殖实验检测野生型腺病毒(Ad5)、ONYX 015在多种肿瘤细胞中的增殖能力。结果:ONYX 015对正常的肝细胞L02无杀伤性,但能够有效地杀伤p53突变的肝癌细胞Hep3B、p53正常的肝癌细胞HepG2及肺癌细胞A549,不能杀伤p53突变的人乳腺癌细胞株MDA-MB 231。在CAR受体水平正常的癌细胞株Hep3B、HepG2和A549中,Ad5和ONYX-015均可增殖。在CAR受体水平低下、p53突变的人乳腺癌细胞株MDA-MB 231中,两种病毒均不增殖。结论:CAR受体对ONYX-015的增殖力起着至关重要的作用。在CAR受体水平正常的前提下,无论肿瘤细胞的p53基因正常与否,ONYX-015均可以有效增殖并杀伤细胞;相反,如果CAR受体水平低下,即使该种肿瘤细胞p53基因突变,ONYX-015在该细胞中的增殖力也会受到限制。ONYX-015不杀伤CAR受体及p53基因均正常的正常肝细胞。

新型肿瘤药物:选择性增殖腺病毒ONYX-015即dl1520

选择性增殖腺病毒dl15 2 0是一种新型的进入Ⅲ期临床研究的肿瘤基因病毒治疗药物 ,本文综述了dl15 2 0的发现、结构、实验研究和作用机理。

二氯乙酸钠联合ONYX-015对结肠癌细胞株的杀伤性研究

研究小分子药物二氯乙酸钠(dichloroacetate,DCA)联合ONYX-015对人结肠癌细胞株的体外杀伤效果,实验采用MTT法检测DCA、ONYX-015以及二者联合对结肠癌细胞株HCT116、SW620、HT29以及人正常细胞株L02增殖的抑制作用;利用Hoechst 33342染色对联合处理的细胞进行凋亡形态学观察;通过结晶紫实验检测进一步证明联合用药对肿瘤细胞的杀伤情况。实验结果表明:DCA联合ONYX-015处理4d后对结肠癌细胞株HCT116、SW620的增殖抑制率达到75%,对HT29也达到近54%的杀伤效率,并且联合治疗并未增加对人正常细胞株L02的毒性。同时结晶紫实验也证明联合治疗对肿瘤细胞的杀伤力要强于用DCA或ONYX-015单独处理。

腺病毒ONYX-015漱口液对口腔癌前病变的治疗作用[英]／Rudin CM…／／J Clin Oncol．

口腔癌的发生与口腔黏膜癌前病变有直接关系。研究表明，大约45％的口腔黏膜癌前病变存在P53的突变或失活。ONYX—015是一种缓释性腺病毒，可以在P53功能缺陷的细胞中大量复制，选择性溶解P53功能缺陷细胞，从而抑制口腔癌前病变的发展，减少口腔癌的发生。本研究以具有临床表现和组织学特征的口腔癌前病变患者为对象，观察ONYX-015治疗口腔癌前病变的效果，旨在评估ONYX-015作为漱口液的毒性大小与可行性。

端粒酶逆转录酶启动子调控的肿瘤增殖腺病毒CNHK300对肝癌细胞的杀伤作用

目的观察端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的肿瘤增殖腺病毒CNHK300对肝癌细胞的杀伤作用。方法采用Western印迹检测了腺病毒E1A在细胞中的表达;通过病毒增殖实验和细胞生长抑制实验,验证CNHK300选择性复制和杀伤能力,并与ONYX 015(E1B5 5000蛋白缺失的2型和5型嵌和型腺病毒)和wtAd5(野生型腺病毒)进行比较;用携带绿色荧光蛋白的CNHK300 EGFP感染BJ和Hep3B,直观的观察其增殖过程。结果CNHK300病毒48h在Hep3B和HepGII中的增殖倍数分别为40 625和65 326倍,与wtAd5增殖能力相近,较ONYX 015强几倍至十几倍。在BJ正常成纤维细胞中CNHK300病毒增殖能力减弱,CNHK300病毒48h增殖倍数为180倍,而wtAd5增殖能力仍可高达4000倍。CNHK300在MOI0 5集落形成单位/细胞以下就可以有效地杀伤肝癌细胞, MOI0 002集落形成单位/细胞时就可以杀伤半数Hep3B细胞,较ONYX 015具有更强的肿瘤杀伤能力。CNHK300对正常成纤维细胞的杀伤力明显弱于wtAd5, CNHK300在MOI100集落形成单位/细胞时BJ细胞存活率近50%。结论肿瘤选择性增殖腺病毒CNHK300可选择性地在端粒酶阳性的肝癌细胞中复制,并产生溶瘤作用,在正常细胞中复制能力和杀伤能力明显减弱,且无论选择性和杀伤能力均优于ONYX 015。

基因-病毒治疗系统CNHK200-hA对肺癌治疗的研究

目的 构建抗肿瘤新生血管生成的基因治疗与病毒治疗相结合的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA ,并对其肺癌的体内外治疗作用进行初步研究。方法 通过Westernblot分析 ,观察携带抗肿瘤新生血管生成基因angiostatink1 5 (hA)的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA和非增殖型腺病毒对介导k1 5蛋白表达的影响 ;通过细胞病理作用及动物试验 ,比较CNHK2 0 0 hA和非增殖型腺病毒对人肺癌细胞株A5 4 9的杀伤作用及对肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用。结果 基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA能够介导hA基因在肺癌细胞内高效表达k1 5蛋白 ,其表达量高于非增殖型腺病毒Ad hA。细胞病理效应显示 ,CNHK2 0 0 hA对A5 4 9的杀伤作用明显优于Ad hA ,CNHK2 0 0 hA在感染复数 (MOI)值为 1时可完全杀伤A5 4 9细胞 ,而达到相同杀伤效应的Ad hA的MOI值为 1 0 0。动物试验显示 ,CNHK2 0 0 hA对肺癌的疗效明显好于Ad hA及肿瘤增殖型病毒ONYX 0 1 5。结论 插入了抗肿瘤新生血管生成基因hA的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA ,可明显提高hA基因的表达量 ,其在体内外的抗肺癌作用较非增殖型腺病毒Ad hA及肿瘤增殖型病毒ONYX 0 1 5进一步提高。

E1B缺失腺病毒在肿瘤治疗中的进展

近年来具有复制能力的病毒用于治疗恶性肿瘤的研究进展相当迅速,其中敲除了E1B-55KDa的条件复制性溶瘤腺病毒(ONYX-015)治疗肿瘤的研究尤为深入。虽然目前对于ONYX-015选择性溶瘤的机制仍有争论,但多个临床前动物实验及Ⅰ、Ⅱ期临床实验已经证实ONYX-015对于治疗多种恶性肿瘤有一定疗效,不良反应少,安全性及耐受性均较好。该文旨在对近年来ONYX-015在肿瘤治疗中的进展作一综述。