应用OP9/OP9-DL1阐明小鼠8.5天胚胎的淋系潜能

胚胎时期淋巴细胞的发生位点一直存在争议。为明确能自主产生淋系的解剖部位,本研究选取小鼠8.5天胚胎的卵黄囊(胚外)和脏壁层(胚内体系)作为实验对象,此时血液循环尚未建立。用集落形成实验检测脏壁层和卵黄囊的造血集落,用OP9共培养检测脏壁层和卵黄囊的B淋巴细胞,用三步法检测脏壁层和卵黄囊的T细胞生成。结果表明:在标准的集落形成实验中,两者均能产生典型的造血集落,但其类型有差异。通过OP9共培养发现:脏壁层可产生B淋巴细胞,它们表达B220、CD19和IgM。采用三步法在OP9-DL1上诱导脏壁层至第16天,可产生CD44-/CD25+幼稚T细胞前体以及CD4+/CD8-单阳性T细胞。然而,上述共培养体系均不能诱导卵黄囊产生B和T淋巴细胞。结论:与卵黄囊相比,脏壁层具有较强的体外淋系分化潜能。今后,应用新的模式动物有望获得更可靠的体内证据,以解答淋系起源这一关键科学问题。