骨保护素(Opg)基因敲除小鼠发生高转换型骨质疏松和动脉钙化(英文)

骨质疏松以及动脉钙化均是危害极大的临床常见病变,骨保护素(OPG)可能是联系两者的分子之一.构建替换型载体pXpPNT-OPG,利用同源重组,将编码前3个蛋白质结构域的小鼠Opg基因组第二外显子序列剔除掉.通过胚胎干细胞(ES)基因打靶获得了正确重组的ES细胞克隆,ES细胞显微注射后获得嵌合体小鼠,交配传代获得杂合子和纯合子小鼠.RT-PCR和蛋白质印迹实验结果显示,纯合子小鼠没有Opg基因的表达.纯合子小鼠骨量丢失明显,骨生物力学指标明显下降,发生严重的骨质疏松,此外,还有50%以上的纯合子小鼠在早期出现动脉中层钙化.小鼠破骨功能亢进,与此同时,成熟成骨细胞数量增加,矿化功能强于野生型.Opg基因缺失小鼠骨中钙和磷大量流失,而血清中水平没有变化,这提示钙磷代谢异常不是OPG缺失导致动脉钙化的原因.对建立的Opg基因敲除小鼠模型进一步深入的研究,将有助于说明动脉钙化和骨质疏松症相互联系的分子机制,为防治骨质疏松症和动脉钙化的并发提供理论基础支持.

无花果叶提取物对OPG基因敲除小鼠的抗骨质疏松作用研究

目的:探讨无花果叶提取物对OPG小鼠的抗骨质疏松作用及机制。方法:8周龄OPG基因敲除雌性小鼠60只,随机分成:实验组(无花果叶提取物组)、对照组(福善美组)、空白组(0.9%氯化钠溶液组),分别于喂药30、60d时用HE染色方法观察各组间骨小梁变化;用免疫组化法研究骨组织中白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的定位及信号表达强弱。结果:灌胃60d后实验组、对照组与空白组比较,骨小梁数目增加,差异有统计学意义(P<0.05);灌胃60d后实验组、对照组与空白组比较,IL-1和TNF-α阳性表达的细胞数目减少(P<0.05)。结论:无花果叶提取物具有抗骨质疏松作用,此作用可能与降低OPG基因敲除小鼠骨组织中IL-1、TNF-α的阳性细胞表达有关。