卡波肉瘤相关疱疹病毒ORFK12蛋白初步研究

目的研究卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)ORFK12基因在大肠杆菌的表达及表达的蛋白在普通人群中检测KSHV的感染情况。方法设计一对特异性引物,以BCBL-1细胞总DNA为模板,采用PCR方法扩增KSHV ORFK12基因。构建含目的基因的重组质粒命名为PQE-80L-K12和诱导蛋白表达。采用ELISA法和Western blot法筛查临床收集的血清标本中感染KSHV的情况。结果异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后的PQE-80L-K12重组菌经十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示有一个约10 ku的融合表达蛋白为ORFK12蛋白。采用ELISA法和Western blot法检测显示ORFK12蛋白能与KSHV阳性血清反应。结论 KSHV ORFK12基因在大肠杆菌中表达,表达的ORFK12蛋白在实验室检测感染KSHV有一定的辅助作用。