The Effect of Combining Fast Neutron and Photon Irradiation on the Human Osteosarcoma OS-732 Cell Line

OBJECTIVE To determine the lethal effect of combining fast neutron with photon radiation on the OS-732 cell line. METHODS We examined the effect of irradiation by fast neutrons, photons and a mixed beam (fast neutrons plus photons) on the lethality and colony forming ability of the OS-732 cell line at different times. RESULTS Following a single irradiation close, the lethality was markedly strong at 24, 48 and 72 h in the group treated with fast neutrons alone and in the mixed beam group in which there was a high proportion of fast neutrons. CONCLUSION The lethal effect of a fast neutron and mixed beam with a high proportion of fast neutrons on the OS-732 cell line is highly significant. These studies provide guidance for the clinical application of fast neutrons for osteosarcoma treatment.

移植性人骨肉瘤OS-732裸鼠模型的建立

目的建立移植性人骨肉瘤裸鼠模型,为骨肉瘤的提供研究实验模型。方法采取皮下细胞悬液注射法与组织块植入接种法,建立人骨肉瘤裸鼠模型。人成骨肉瘤OS-732细胞株体外传代培养后,将1×107细胞悬液注入裸鼠腋后皮下(10只裸鼠),或将已成瘤的瘤组织块接种于裸鼠腋后皮下(10只裸鼠),观察肿瘤生长情况。接种后4周处死裸鼠,剥瘤称重,行病理鉴定。比较两种方法的成瘤率、终末瘤体积及瘤重、肿瘤相对增长率;大体观及病理组织学。结果两组裸鼠接种2周后均有局部肿瘤形成,细胞悬液组成瘤率70%,组织块组成瘤率100%,两组成瘤率差异无显著性(P>0.05);两组终末瘤体积及瘤重差异具有显著性(均P<0.05)。细胞悬液组相对增长率高于组织块组,接种后第16天开始两组肿瘤增长率具有显著性差异(P<0.05)。病理组织学鉴定符合骨肉瘤镜下特点。结论成功建立了移植性人骨肉瘤裸鼠模型,为临床研究提供了可靠方法。

用高转移人骨肉瘤亚群OS-732建立裸鼠骨肉瘤肺转移模型

目的建立一种发病过程类似人类骨肉瘤肺转移的动物模型。方法分别采用5×10~5、1×10~6、5×10~6三个剂量的高转移人骨肉瘤亚群OS-732接种裸鼠皮下,饲养8周。测量局部肿瘤和肺转移结节。结果 5×10~5组无论是局部成瘤率和肺转移率均为0。1×10~6组和5×10~6组局部成瘤率均为100%,肺转移率均为87.5%。从后二者的生长曲线上看,局部肿瘤的生长趋势大致相同,在第8周时,两组局部肿瘤的湿重和平均直径无显著差异(P>0.05)。可以认为两组的局部肿瘤生长趋势无显著差异。从两组的肺转移情况看,两组的肺转移率均为87.5%,肺表面结节数无显著性差异,肺结节总转移数无显著性差异(P>0.05)。结论 1×10~6、5×10~6剂量的高转移人骨肉瘤亚群OS-732接种裸鼠皮下均可建成满意的骨肉瘤肺转移模型。从动物生存时间和转移的专一性上看,1×10~6OS-732的剂量更加合理,建立的模型更为实用,是研究骨肉瘤肺转移理想的动物模型。

人骨肉瘤OS-732细胞系诱导血管生成作用及相关因子表达的研究

应用鸡胚绒毛尿囊膜模型 (chick embryo chorioallantoic mem brane,CAM) ,观察人骨肉瘤 OS- 732细胞系诱导血管生成过程及血管生长相关因子的表达。结果显示 ,本细胞系具有较强的促血管生成能力并表达血管内皮生长因子 (vacularendothelial growth factor,VEGF) ,碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growth factor,b FGF) ,鸡胚绒毛尿囊膜 OS-732细胞系接种瘤细胞中血管内皮生长因子 (VEGF) ,转化生长因子β1 (Transforming growth factor,TGF-β1 )均呈阳性表达 ,而且 VEGF呈持续高表达。结果表明 VEGF、 b FGF、 TGF-β1 可能共同参与骨肉瘤 OS- 732细胞系诱导的血管生成 ,而VEGF可能起着主要作用 ,提示阻断 VEGF的作用可能影响骨肉瘤 OS- 732细胞系诱导的血管生成 ,此研究为以

六味地黄丸含药血清对OS-732细胞增殖分化的影响

目的:观察补肾中药对成骨样细胞增殖分化的影响。方法:制备低、中、高剂量的六味地黄丸含药血清。10%低、中、高剂量的六味地黄丸含药血清培养OS-732细胞,显微镜下观察细胞生长情况;进行细胞计数和绘制生长曲线;用MTT法检测细胞增殖;进行细胞碱性磷酸酶(ALP)活性测定。结果:含药血清组细胞生长良好,中剂量组与对照组相比P<0.05,统计学有明显差异;在细胞增殖和细胞碱性磷酸酶(ALP)活性测定方面,中剂量组与对照组相比P<0.05,统计学有明显差异。结论:合适剂量的补肾中药对成骨样细胞的增殖和分化有明显的促进作用。

快中子及光子照射人成骨肉瘤OS-732细胞系的实验研究

目的:观察快中子及光子对人成骨肉瘤细胞系OS-732的杀伤作用。方法:用快中子、光子及混合射线照射OS-732细胞系,检测各组细胞受照射后的活细胞率、死细胞率及集落形成率。结果:单次照射后24、48及72h单纯快中子及高比例快中子混合线组对该细胞系的杀伤力强。结论:快中子及高比例快中子混合线对OS-732细胞系有较强的杀伤作用,对临床上应用快中子治疗骨肉瘤有一定指导意义。

快中子及混合线照射人成骨肉瘤OS-732细胞系的实验观察

目的 :观察快中子及光子对人成骨肉瘤细胞系OS 732的杀伤作用。方法 :用快中子、光子及混合射线照射OS 732细胞系 ,检测各组细胞受照射后的集落形成率。结果 :单次照射后第 10天 ,混合线组对该细胞系集落形成的抑制作用明显弱于单中子及单光子组。结论 :单次照射后第 10天 ,单纯快中子及单纯光子对该细胞系集落形成的抑制作用明显强于混合线组 。

VEGF抗体对骨肉瘤OS-732血管生成的抑制作用

目的：研究血管内皮生长因子（VascularendothelialgrowthfactorVEGF）抗体的抗骨肉瘤血管生成作用。方法：应用鸡胚尿囊膜（ChickembryoChorioallantoicmembrane，CAM）模型观察VEGF抗体对骨肉瘤血管生成及肿瘤生长的影响。结果：VEGF抗体组血管数目在给予抗体后第2、4、6、8天均显著低于PBS对照组（P＜0．05或P＜0．01），光镜下瘤细胞减少，新生血管腔减少。结论：VEGF抗体对骨肉瘤治疗具有良好的应用前景。

人透明软骨抗OS-732细胞系浸润的研究——细胞培养及透射电镜观察

本文研究成骨肉瘤OS-732细胞系浸润软骨的机理,指出经盐酸胍处理后的软骨可被瘤细胞所浸润,这些浸润细胞在电镜下见其有生长、代谢旺盛的特点,提示正常软骨内含有抑制肿瘤细胞浸润的因子存在。

氧化新喹对O_S-732细胞系的杀伤作用及超微结构的电镜观察

本文介绍氧化新喹对O_s-732细胞系的体外实脸结果,并以扫描及透射电镜的细胞计量学测算超微结构变化及意义的探讨。当药物浓度达30μg/ml时,对细胞毒性显著,细胞在48小时相继死亡。扫描电镜观察,药物达0.5μg/ml时肿瘤细胞微绒毛大部消失,5～20μg/ml则细胞皱缩碎裂成不规则团块。透射电镜见到核质溶解、线粒体水肿、嵴消失,脆质溶解成空泡、溶酶体增多自溶灭亡。细胞计量学测算溶酶体增大3.3倍导致自溶为本品抑瘤杀伤机理。

唑来膦酸联合多柔比星治疗人骨肉瘤裸鼠模型的实验研究

目的观察唑来膦酸(ZOL)单药在体内对人骨肉瘤裸鼠移植瘤的治疗作用,明确ZOL联合DOX化疗治疗骨肉瘤的疗效。方法人骨肉瘤细胞株OS-732复苏后体外培养传代备用。48只SPF级BALB/c雌性裸鼠备用。运用组织块接种法于裸鼠右腋后皮下成瘤,实验分为6组:生理盐水对照组(NS组),DOX组,ZOL低、中、高剂量组,DOX+ZOL组。根据肿瘤倍增体积和瘤重得出抑瘤率,按照金氏公式计算Q值明确两种药物对抑制肿瘤的相互作用关系。免疫组化Ⅷ因子评价肿瘤内微血管密度(MVD)、Tunel凋亡细胞计数。结果 DOX组、ZOL低剂量组、ZOL中剂量组、ZOL高剂量组、DOX+ZOL组抑瘤率分别为43.01%、16.83%、23.88%、6.66%、49.55%,Q值为0.87,显示二者效应为单纯相加;DOX组、DOX+ZOL组凋亡指数、MVD与NS组有统计学差异,但DOX组与DOX+ZOL组间无差异。结论对于人骨肉瘤OS-732皮下移植裸鼠模型,ZOL单药干预抑瘤作用不显著;ZOL与DOX联合用药在本研究实验动物体内表现为相加作用。

NS基因克隆及人成骨肉瘤细胞和人胚胎肾细胞NS基因的表达

目的 :研究nucleostemin(核干细胞因子 ,NS)基因在人成骨肉瘤细胞 (OS - 732 )和人胚胎肾细胞 (HEK -2 93)的表达情况 ,并克隆该基因的部分片段。方法 :以OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞为实验材料 ,进行细胞总RNA的提取、反转录反应、PCR反应、NS基因片段的克隆及测序等。结果 :(1)提取的总RNA质量很高 ,基本上无降解 ;(2 )OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞中均有NS基因的表达 ,并且在相同量底物的情况下 ,OS- 732细胞NS基因的表达量明显高于HEK - 2 93细胞 ;(3)将PCR产物成功地与pGEM -T克隆载体连接 ,构建为pGEM -T -NS质粒 ,测序结果表明NS基因片段序列与基因库中登陆的序列完全一致。结论 :本文成功地从OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞克隆到NS基因片段 ,OS - 732细胞NS基因的表达量明显高于HEK- 2

降钙素对人成骨样细胞增殖与细胞膜流动性的影响

为了解降钙素 (CT)对体外培养的人成骨样细胞 OS- 732增殖与细胞膜流动性的影响 ,并与 1,2 5(OH ) 2 D3的作用进行比较 ,在培养液中添加 1IU/ m l CT前后观察 DNA合成速率、细胞增殖、细胞周期和细胞膜流动性的变化。结果表明 CT有明显促进 OS- 732细胞增殖和 DNA合成的作用 ,使 G2 +M期细胞所占的百分比增加 ,而 S期细胞的百分比下降。1,2 5 (OH) 2 D3可使细胞膜流动性增加 ,而 1IU/ m l CT使其下降。结论认为降钙素与 1,2 5 (OH) 2 D3不同 ,它促进人成骨样细胞增殖和降低细胞膜流动性。

磷灰石超微粉对骨癌Os-732细胞形态的影响

利用细胞培养技术研究磷灰石超微粉对人骨癌Os-732细胞形态的影响。用磷灰石超微粉处理过的人骨癌Os-732细胞不仅生长受到明显的抑制而且Os-732细胞的宏观形态和微观形态均发生了明显的变化。我们利用光学显微镜和电子显微镜就磷灰石超微粉对人骨癌Os-732细胞形态的影响进行了深入研究。

2β-(3羟丙氧)-骨化三醇对OS-732人成骨样细胞增殖与分化的影响

目的观察2β(3羟丙氧)骨化三醇(ED71)对体外培养人成骨样细胞增殖与分化的影响,进一步探讨ED71治疗骨质疏松的机制。方法采用塞唑蓝(MTT)分析法检测ED71对体外培养OS732人成骨样细胞增殖作用与效价。采用培养细胞匀浆测单位蛋白碱性磷酸酶活性,培养基中骨钙素含量分析及原位杂交方法检测ED71对OS732人成骨样细胞分化的影响。结果培养第4天,10-7mol/LED71显著抑制成骨样细胞增殖(P<0.05),而10-8mol/L、10-9mol/LED71对成骨样细胞的作用不明显。培养4d后培养基中骨钙素水平在10-7mol/LED71组变化不大,在10-8mol/L、10-9mol/LED71组骨钙素水平显著增高(P<0.05或P<0.01)。原位杂交转化生长因子β(TGFβ1)表达明显增加,而碱性磷酸酶比活性无明显变化。结论ED71抑制成骨样细胞增殖高剂量作用显著,促进成骨样细胞分化较低剂量显著。

大剂量氨甲喋呤-四氢叶酸方案对成骨肉瘤细胞系OS-732的影响

大剂量氨甲喋呤四氢叶酸方案对成骨肉瘤细胞系ＯＳ７３２的影响杨岩王娟易永林王瑛徐莘香王秀清张淑芹我们在体外用成骨肉瘤细胞系ＯＳ７３２模拟体内大剂量氨甲喋呤四氢叶酸（ＨＤＭＴＸＬＶ）方案，以探讨氨甲喋呤（ＭＴＸ）浓度、作用时间，四氢叶酸（ＬＶ...

1,25-二羟维生素D_3对OS—732人成骨样细胞增殖与分化的影响

目的观察1,25-二羟维生素D3对体外培养的人成骨样细胞增殖与分化的影响,以进一步探讨其治疗骨质疏松的机制。方法采用MTT比色分析法检测1,25-二羟维生素D3对体外培养OS—732人成骨样细胞增殖的作用与效价。采用培养细胞匀浆上清测单位蛋白下的碱性磷酸酶活性,培养基中骨钙素(BGP)含量分析方法检测1,25-二羟维生素D3对OS—732人成骨样细胞分化的影响。结果培养第4天,10-7mol/L1,25-二羟维生素D3显著抑制成骨样细胞增殖(P<0.05),10-8mol/L、10-9mol/L1,25-二羟维生素D3对成骨样细胞的作用不明显。培养4天后培养基中BGP水平在10-7mol/L组变化不大,在10-8mol、10-9mol/L1,25-二羟维生素D3组BGP水平显著增高(P<0.05,P<0.01)。结论1,25-二羟维生素D3抑制成骨样细胞增殖在高剂量时作用显著,促进成骨样细胞分化作用在较低剂量显著。