OXA-51型β内酰胺酶的研究进展

不动杆菌是引起医院感染的重要病原体之一,其中鲍曼不动杆菌是临床最常分离到的不动杆菌,其次为pittii不动杆菌（Acinetobacter pitti,A.pitti,即以前的不动杆菌基因种型3）和nosocomialis不动杆菌（Acinetobacter nosocomialis,A.nosocomialis,即以前的不动杆菌基因种型13TU）。这3种不动杆菌通常难以鉴别,统称为＂醋酸钙不动杆菌-鲍曼不动杆菌复合体＂（A.calcoaceticus-A.baumannii complex,Acb）。

分子生物学方法鉴定鲍曼不动杆菌与仪器鉴定结果比较

目的比较鲍曼不动杆菌的分子生物学鉴定结果和仪器鉴定结果。方法采用法国梅里埃公司VITEK2COMPACT全自动微生物分析仪对细菌进行鉴定和抗菌药物敏感性分析,鉴定为鲍曼不动杆菌复合群的细菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测OXA-51基因。结果 68株VITEK2 COMPACT鉴定为鲍曼不动杆菌复合群的菌株中,50株OXA-51基因阳性,确定为鲍曼不动杆菌;18株OXA-51基因阴性,为复合群其它细菌。鲍曼不动杆菌(OXA-51阳性)与复合群其它细菌(OXA-51阴性)比较,对临床常用的碳青酶烯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、头孢菌素类等抗菌药物的敏感性降低(P<0.05)。结论鲍曼不动杆菌复合群其它细菌耐药率显著低于鲍曼不动杆菌,采用检测OXA-51基因方法对鲍曼不动杆菌复合群进行准确的菌种鉴定有利于正确指导临床抗菌药物的选择和感染控制的介入。

某院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药基因分析

目的分析耐碳青酶烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药基因型,了解其耐药机制。方法用改良Hodge试验筛选耐碳青霉烯表型;用聚合酶链反应(PCR)技术检测IMP、VIM、SIM-1、OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-58碳青霉烯酶耐药基因。结果 30株CRAB中,改良Hodge试验弱阳性5株(16.67%),阴性25株(83.33%),全部携带OXA-23型和OXA-51型碳青霉烯酶耐药基因,未扩增出IMP、VIM、SIM-1、OXA-24和OXA-58型耐药基因。结论用改良Hodge试验对怀疑产碳青霉烯酶细菌进行表型确证会产生假阴性,该院CRAB的耐药机制主要是携带OXA-23和OXA-51型碳青霉烯酶基因。

携带碳青霉烯酶基因鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的检测医院分离鲍曼不动杆菌携带碳青霉烯酶基因情况并分析其携带耐药基因与抗菌药物耐药性的相关性。方法采用VITEK2 Compact进行细菌鉴定,聚合酶链反应检测bla_(OXA-51)、bla_(OXA-23)、bla_(OXA-24)、bla_(OXA-58)、bla_(NDM-1)及bla_(IMP)碳青霉烯酶基因,按照CLSI 2020年标准进行药敏试验。结果150株鲍曼不动杆菌复合体检出bla_(OXA-51)基因阳性89株(59.33%),为鲍曼不动杆菌。89株鲍曼不动杆菌中70株(78.65%)携带bla_(OXA-23)基因;89株鲍曼不动杆菌未检出bla_(OXA-24)、bla_(OXA-58)、bla_(NDM-1)、bla_(IMP)基因。与bla_(OXA-51)基因阴性组比较,携带bla_(OXA-51)基因组对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、复方新诺明、氨苄西林-舒巴坦的耐药性显著升高;同时携带bla_(OXA-51)及bla_(OXA-23)组对除头孢曲松、哌拉西林-他唑巴坦、替加环素、多黏菌素B外的所有检测药物的抗菌药物耐药性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本组研究的89株鲍曼不动杆菌对碳青霉烯酶基因抗菌药物耐药主要与表达D类bla_(OXA-51)、bla_(OXA-23)基因有关,携带相同耐药基因的克隆传播可能是医院鲍曼不动杆菌播散的主要原因。

对一组醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体细菌的基因型鉴定

目的:探讨鉴定醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各菌种的有效方法。方法:运用全自动细菌鉴定系统联合分子生物学方法,经聚合酶链式反应(PCR)扩增鲍曼不动杆菌特异表达的D类碳青霉烯酶基因OXA-51、16S rRNA及醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各菌种特异表达的gyrB基因,以准确鉴定醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各菌种种属。结果:20株醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体经全自动细菌鉴定及药敏分析系统鉴定均与原始种属相一致;经分子生物学方法鉴定结果为Acinetobacter baumannii 16株,Acinetobacter calcoaceticus 3株,Acinetobacter nosocomialis 1株。结论:全自动菌种鉴定系统辅以分子生物学基因分型方法可较为准确地鉴定醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体各个菌种。gyrB基因作为到种鉴定标志物对于高度亲缘性菌种的鉴定价值更大。

儿科临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性和产OXA酶的探究

目的探讨儿科临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性和产OXA酶情况。方法以我院2014年2月至2016年2月临床分离的38株分离多重鲍曼不动杆菌为研究对象,进行抗菌药物药敏试验,采用多重PCR分析生物学技术进行OXA酶基因检测,分析基因类别。结果多重耐药鲍曼不动杆菌对环丙沙星和美罗培南敏感率最高,分别达23.2%和23.7%。38株多重耐药鲍曼不动杆菌中,37条呈OXA基因阳性。其中34株(89.5%)检出OXA-51基因阳性,25株(65.8%)检出OXA-23基因阳性。1株多重耐药鲍曼不动杆菌为未扩增出特异性条带,呈OXA基因阴性。结论儿科临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性较高,而携带OXA-23基因和OXA-51基因的鲍曼不动杆菌对耐药情况最为严重。

5年间鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶特性与耐药相关性研究

目的研究2002-2006年每年3-5月临床分离鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶的分布与变迁情况及其与碳青霉烯类抗生素耐药的相关性。方法琼脂稀释法检测亚胺培南（IPM）和美罗培南（MEN）对174株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度（MIC）；2-巯基丙酸（2-MPA）和乙二胺四乙酸（EDTA）协同试验进行金属β-内酰胺酶表型检测；PCR扩增金属β-内酰胺酶（MBL）VIM、IMP和苯唑西林酶OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58相关基因。结果2002-2006年每年3-5月临床分离的鲍曼不动杆菌对IPM的耐药率分别为0（0／20）、2．6％（1／38）、0（0／36）、34．9％（15／43）和59．5％（22／37），对MEN的耐药率分别为0（0／20）、5．3％（2／38）、0（0／36）、20．9％（9／43）和51．4％（19／37）；15．5％（27／174）的菌株OXA-23阳性，72．4％（126／174）的菌株OXA-51阳性，其中15．5％（27／174）菌株同时产OXA-51和OXA-23酶，OXA-23的阳性率从2002年的0上升到2006年的48．6％，OXA-51的阳性率从2002年的35．0％上升到2006年的89．2％；所有菌株均未检出OXA-24、OXA-58、IMP及VIM基因。结论5年间鲍曼不动杆菌中OXA-23、OXA-51的检出率及其对碳青霉烯类抗生素的耐药性均呈上升趋势；产OXA-23型β-内酰胺酶是本组鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药的重要原因，OXA-51可能与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的低水平耐药有关。

多耐药鲍曼不动杆菌耐药性分析和部分耐药基因检测

目的分析皖北地区多耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)耐药率和部分耐药基因携带情况。方法用稀释法测定抗生素的最低抑菌浓度(MIC),用PCR扩增OXA-51、OXA-23和Ⅰ～Ⅲ类整合子的整合酶基因。结果 MDR-Ab对替加环素、多黏菌素E和利福平体外药敏试验耐药率较低,分别是5.56%、6.94%、16.67%。临床常用16种抗生素中除舒普深(头孢哌酮/舒巴坦)耐药率为41.67%外,其他抗生素耐药率较高。72株MDR-Ab的OXA-51、OXA-23和Ⅰ类整合酶基因的携带率分别为100.00%、84.72%和91.67%,未检出Ⅱ和Ⅲ类整合酶基因。结论 MDR-Ab耐药形势严峻,替加环素、多黏菌素E和利福平是治疗MDR-Ab感染的有效药物。MDR-Ab携带Ⅰ类整合子阳性率较高,OXA-23是导致其对碳青霉烯类抗生素耐药的机制之一。