基于噬菌体展示技术的赭曲霉毒素A高密度模拟表位的表达研究

通过噬菌体展示技术展示赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)模拟表位。将带有OTA模拟表位序列的寡核苷酸双链克隆至载体pC89-COTA。利用噬菌体展示技术,通过优化辅助噬菌体感染复数、IPTG加入的时间与剂量等培养条件获得表达有高密度OTA模拟表位的噬菌体。再通过酶联免疫吸附检测(ELISA)方法比较不同的条件下的表达效果,探索最优表达条件。结果表明:成功获得高密度表达OTA模拟表位的噬菌体,辅助噬菌体感染复数与IPTG加入量对模拟表位表达量影响不大,IPTG加入时间对模拟表位表达量有较大影响,优化后模拟表位表达量大大高于优化前。

胶体金测试条法对粮食中赭曲霉毒素快速定量测定的研究

利用胶体金测试条法对粮食中赭曲霉毒素A(OTA)进行快速定量检测,结果表明:OTA的检测限为3μg/kg,定量限为7μg/kg,在5～20μg/kg浓度范围内,相关系数r为0.999 9。采用有证实物参考物质进行比较,正确度在84.3%～106.7%之间,变异系数在19.6%～30.3%之间。采用配对t-检验,与高效液相色谱法的测定结果相比较,二者无显著差异。

黑曲霉及其食品安全领域的赭曲霉毒素问题

黑曲霉(Asperillium niger)是公认的食品领域的传统发酵菌株,其产品包括各种有机酸、酶制剂等等。但是,最近有越来越多的研究表明某些黑曲霉菌株能够产生赭曲霉毒素(Ochratoxin A,OTA),该毒素是一类极毒的化合物。概述黑曲霉的应用以及产生曲霉毒素的研究近况。

高效液相色谱串联质谱法测定花生及制品中的五种真菌霉素

建立了高效液相色谱-串联质谱（HPLC．MS／MS）测定花生及制品中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮五种真菌霉素的快速分析方法。用甲醇．水（55：45，V／V）对样品进行提取，采用真菌毒素免疫亲和柱萃取，在ESI＋模式下采用多反应监测（MRM）模式进行检测。目标物在C18色谱柱上实现了有效分离，在6minffq完成一个样品的分析，相关系数（r2，n=6）大于0．999，检测结果稳定，灵敏。黄曲霉毒素Bl、黄曲霉毒素Ml、脱氧雪腐镰刀菌烯醇线性范围0．5-50．0μg／L，检出限为0．05μg／kg（LOD，S／N=3），赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮线性范围5．0---100．0μg／L，检出限为0．5μg／kg（LOD，S／N=3），方法回收率为86．8～102．7％，精密魔RsD为0．360．79％。该方法快速、灵敏，适用于花生及制品中黄曲霉毒素Bl、黄曲霉毒素M1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮五种真菌霉素的检测与确证。