低聚半乳糖对应激大鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的研究肠道补充低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides,GOS)对冷束缚应激(cold restrain stress,CRS)大鼠肠黏膜紧密连接和屏障功能的影响。方法 40只Wistar大鼠随机分成正常对照组、GOS组、CRS组和CRS+GOS组,每组10只,正常对照组仅给予基础饮食,GOS组每天给予GOS(4g/kg)喂养,共10d;CRS组大鼠于普通喂养第10天,被束缚固定后置于4℃冰箱3h,制备CRS模型;CRS+GOS组在每天给予GOS(4g/kg)喂养的第10天制备CRS模型。建模成功后,各组大鼠经心脏采血,检测血浆二胺氧化酶(diamine oxidas,DAO)浓度;处死大鼠,取回肠组织行病理检查及电镜检查,再采用免疫组化法检测细胞紧密连接蛋白occludin的表达,并以实时定量PCR法检测其在mRNA水平的表达。结果与正常对照组相比,CRS组及CRS+GOS组大鼠血浆DAO浓度均明显增高(P<0.01);CRS组血浆DAO浓度又明显高于CRS+GOS组(P<0.01);CRS组及CRS+GOS组大鼠肠黏膜occludin在蛋白和mRNA水平的表达均较正常对照组显著降低(P<0.01);CRS组上述指标又明显低于CRS+GOS组(P<0.01),正常对照组与GOS组间上述指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论添加GOS喂养可以降低大鼠血浆DAO浓度,增加回肠occludin在mRNA和蛋白水平的表达,提示GOS可能具有改善紧密连接和维护肠屏障功能的作用。

STZ糖尿病大鼠视网膜病变模型的再评价

目的本研究旨在对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜病变糖尿病进行系统性的再评价。方法雄性SD大鼠75只,随机分为空白组(30只)和糖尿病组(45只)。采用一次性大剂量腹腔注射STZ60mg/kg的方法制备糖尿病模型,监测6个月,动态考察大鼠的体重、血糖变化,同时测定大鼠的血液流变学参数。视网膜铺片法观察视网膜形态学变化,免疫组化法考察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)表达的变化,Western blotting法观察内皮细胞紧密连接蛋白(occludin)、细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,缩写ICAM-1)表达量的变化,分光光度法测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性的改变。结果与空白组相比,STZ大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均增加。视网膜血管基底膜增厚,毛细血管退化,有闭锁现象,静脉扩张明显,周细胞数量明显减少。其视网膜中的VEGF表达增加(IOD/area 0.66±0.28,空白组0.25±0.03),PEDF表达减少(IOD/area0.07±0.06空白0.19±0.04),与血-视网膜屏障相关的occludin蛋白表达下降70%,炎症因子ICAM-1增加2.58倍,AR活性升高3倍。结论 STZ糖尿病大鼠视网膜病变发生在多个位点,借助该模型对糖尿病视网膜病变的研究可以从多层次、多角度进行。

黄芪注射液对大鼠脑缺血／再灌注后血脑屏障的保护作用及其机制研究

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血／再灌注（I／R）后血脑屏障的保护作用及其机制。方法SD大鼠54只，按随机数字表法分为3组，每组18只。采用大脑中动脉闭塞法复制脑I／R损伤模型；假手术组只分离不结扎；黄芪治疗组在制模后即刻经腹腔注射黄芪注射液2ml／kg。采用干湿重法、分光光度计法及免疫组化法分别检测各组大鼠脑组织含水量、伊文思蓝（EB）含量及咬合蛋白（Oeeludin）、闭锁小带蛋白（ZO-1）蛋白的表达。结果与假手术组相比，模型组大鼠脑组织含水量[（83．12±0．28）％比（78．14±0．26）％]、EB含量（μg／g；419．3±19．4比85．4±12．7）明显增多，Oceludin和ZO—1的阳性血管数（个）明显减少（Oecludin：28．5±4．2比90．3±4．7，ZO-1：34．8±6．2比118．5±8．9，均P〈0．01）；与模型组相比，黄芪治疗组大鼠脑组织含水量[（81．06±0．42）％比（83．12±0．28）％]、EB含量（205．9±17．0比419．3±19．4）显著减少，Occludin阳性血管数（6Z．7±3．5）和ZO—1的阳性血管数（98．6±5．3）显著增加（均P〈0．05）。结论黄芪注射液对脑I／R后血脑屏障具有保护作用，这可能与黄芪注射液上调Oecludin、ZO-1的表达有关。