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DIA-based proteome profiling with PRM verification reveals the involvement of ER-associated protein processing in pollen abortion in Ogura CMS cabbage
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作者 Peiwen Wang Lin Zhu +5 位作者 Ziheng Li Mozhen Cheng Xiuling Chen Aoxue Wang Chao Wang Xiaoxuan Zhang 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第3期755-770,共16页
Ogura cytoplasmic male sterility(Ogura CMS)is extensively applied in hybrid seed production in cruciferous crops.However,the posttranscriptional molecular basis of Ogura CMS in cruciferous crops remains elusive.Here,a... Ogura cytoplasmic male sterility(Ogura CMS)is extensively applied in hybrid seed production in cruciferous crops.However,the posttranscriptional molecular basis of Ogura CMS in cruciferous crops remains elusive.Here,a data-independent acquisition-based proteomic approach coupled with a parallel reaction monitoring-based targeted proteomic assay was used to analyze the proteome dynamics of Ogura CMS cabbage line RM and its maintainer line RF during floral bud development to obtain insights into the mechanism underlying Ogura CMS in cruciferous crops.A total of 9162 proteins corresponding to 61464 peptides were identified in RM and RF floral buds.The proteomic fluctuation of RM was weaker than that of RF.Differences in protein expression between RM and RF gradually enlarged with floral bud development.Fifteen continually up-regulated and eight continually down-regulated proteins were found in RM relative to RF throughout floral bud development.Differentially expressed proteins between RM and RF during floral bud development were implicated in the endoplasmic reticulum(ER)-associated protein processing pathway,in which most of them exhibited down-regulated expression in RM.These data suggest that ER-associated protein processing may be involved in pollen abortion in Ogura CMS cabbage by inhibiting the expression of critical factors.Our findings not only deepen the understanding of the molecular mechanisms of Ogura CMS in cruciferous crops but also provide better guidance for applying Ogura CMS in the hybrid breeding of cruciferous crops. 展开更多
关键词 ogura cytoplasmic male sterility(ogura cms) CABBAGE Data-independent acquisition(DIA) Parallel reaction monitoring(PRM) Pollen development
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通过遗传转化Rfo获得青花菜Ogura CMS恢复系 被引量:1
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作者 邢苗苗 许园园 +2 位作者 卢昱宇 严继勇 曾爱松 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第15期2966-2976,共11页
【目的】将来自萝卜的胞质不育恢复基因Rfo导入到青花菜Ogura细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)主栽商业品种‘耐寒优秀’(命名为SFB45)中,获得Ogura CMS恢复系,打破Ogura CMS材料在生产上无法再利用的现状,为优异种质的... 【目的】将来自萝卜的胞质不育恢复基因Rfo导入到青花菜Ogura细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)主栽商业品种‘耐寒优秀’(命名为SFB45)中,获得Ogura CMS恢复系,打破Ogura CMS材料在生产上无法再利用的现状,为优异种质的创制和改良提供新途径。【方法】利用基因合成的方法克隆萝卜Rfo的CDS及其启动子序列,构建表达载体pRfo::Rfo。通过农杆菌介导的遗传转化方法侵染SFB45的具柄子叶和下胚轴,进行再生、抗性苗筛选和PCR鉴定获得阳性植株,开花期观察转基因植株的育性恢复情况;用亚历山大染液分析对照组及阳性株的花粉活力;分别提取对照组及阳性株<3 mm和>3 mm花蕾的RNA并反转录成单链cDNA,设计特异引物,利用RT-PCR分析Rfo及绒毡层和花粉壁发育相关基因在SFB45及对应的育性恢复材料花蕾中的表达差异。【结果】通过遗传转化共获得10个阳性株系,其中8个株系育性得到不同程度的恢复,花粉活力为84.2%—90.4%。RT-PCR分析结果表明,育性恢复植株花蕾中Rfo表达,绒毡层发育关键调节因子DYT1和TDF1及花粉壁主要成分孢粉素合成所必需的基因ACOS5在育性恢复植株<3 mm花蕾中上调表达。绒毡层降解相关基因AMS、四分体胼胝质壁及花粉外壁发育所必需的基因CalS5和CYP703在育性恢复植株>3 mm花蕾中上调表达。分析阳性株系R-1、R-3和R-6自交及杂交后代发现转入的Rfo能稳定遗传,符合孟德尔遗传。【结论】通过遗传转化Rfo获得了优良青花菜Ogura CMS商品种SFB45的育性恢复系,且Rfo的转入使绒毡层及花粉壁发育相关基因恢复正常表达。 展开更多
关键词 青花菜 遗传转化 ogura cms Rfo 绒毡层和花粉壁发育相关基因
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抗根肿病结球甘蓝Ogura CMS种间恢复材料的创制
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作者 杨鼎 吕凤仙 +7 位作者 李崇娟 徐学忠 胡靖锋 杨红丽 兰梅 张丽琴 董相书 和江明 《中国蔬菜》 北大核心 2022年第11期44-52,共9页
为获得抗根肿病且携带恢复基因的结球甘蓝Ogura CMS种间材料。以抗根肿病结球甘蓝品种先甘366为母本,以甘蓝型油菜Ogura CMS恢复材料N21015为父本,通过远缘杂交结合胚挽救获得种间杂种。抗根肿病表型鉴定和分子标记鉴定结果表明,杂种F_... 为获得抗根肿病且携带恢复基因的结球甘蓝Ogura CMS种间材料。以抗根肿病结球甘蓝品种先甘366为母本,以甘蓝型油菜Ogura CMS恢复材料N21015为父本,通过远缘杂交结合胚挽救获得种间杂种。抗根肿病表型鉴定和分子标记鉴定结果表明,杂种F_(1)对根肿病表现为免疫,具有母本的根肿病抗性基因和父本的Ogura CMS恢复基因;人工诱导染色体加倍后成功获得异源六倍体种间杂种,花粉可育率为78.46%。 展开更多
关键词 结球甘蓝 甘蓝型油菜 根肿病 ogura cms
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Ogura CMS育性恢复基因orf687在萝卜中的分布 被引量:7
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作者 张丽 王庆彪 王艳萍 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期864-874,共11页
以129个萝卜品种(包括5个栽培种和4个野生种)为试材,研究了Ogura CMS细胞核育性恢复基因orf687(Rfo)的分布。对orf687基因扩增的结果表明,除油用萝卜外,orf687目的片段广泛分布于东亚大长萝卜(83份,89.16%)、欧洲小萝卜(28份,85.71%)、... 以129个萝卜品种(包括5个栽培种和4个野生种)为试材,研究了Ogura CMS细胞核育性恢复基因orf687(Rfo)的分布。对orf687基因扩增的结果表明,除油用萝卜外,orf687目的片段广泛分布于东亚大长萝卜(83份,89.16%)、欧洲小萝卜(28份,85.71%)、黑萝卜(6份,100%)、荚用萝卜(1份,100%)和野生萝卜(10份,70%)中。东亚大长萝卜中的红萝卜品种95.45%含有orf687,高于白萝卜和绿萝卜。进一步利用PCR-RFLP对orf687的基因型进行鉴定发现,没有恢复功能的基因型(rfrf)在野生萝卜中所占比率最高,为57.14%,其次是东亚大长萝卜(47.13%)和欧洲小萝卜(37.50%)。在东亚大长萝卜中,红萝卜品种具有rfrf基因型的比率为76.19%,高于白萝卜(41.67%)和绿萝卜(23.53%)。在利用萝卜细胞质雄性不育材料育种的过程中,rfrf基因型的材料没有育性恢复功能,可作为保持系,用于雄性不育系的转育。上述结果可为萝卜雄性不育系的选育和利用提供指导。 展开更多
关键词 萝卜 ogura cms 育性恢复基因 分布
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甘蓝Ogura CMS育性恢复基因Rfo的传递效率解析及育种应用 被引量:5
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作者 任文静 于海龙 +9 位作者 陈立 张斌 陈文迪 方智远 杨丽梅 庄木 吕红豪 王勇 季家磊 张扬勇 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2197-2210,共14页
为创制甘蓝Ogura细胞质雄性不育(CMS)育性恢复材料,在芥蓝和甘蓝型油菜远缘杂交后,采用甘蓝进行回交,构建BC4和BC5群体;基于Ogura CMS恢复基因Rfo编码区及其启动子序列,设计开发了适用于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的特异InDel分子标记Rf... 为创制甘蓝Ogura细胞质雄性不育(CMS)育性恢复材料,在芥蓝和甘蓝型油菜远缘杂交后,采用甘蓝进行回交,构建BC4和BC5群体;基于Ogura CMS恢复基因Rfo编码区及其启动子序列,设计开发了适用于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的特异InDel分子标记Rfo-11F/Rfo-11R;利用该标记对BC4和BC5代群体进行Rfo基因分型。从8036株BC4回交后代中筛选获得Rfo基因阳性后代41株,平均Rfo基因传递率为0.51%,平均花粉活力为81%。从BC4代挑选5个重点Rfo阳性单株,细胞学观察结果显示5个单株的花粉母细胞染色体在减数分裂时期正常配对和分离的平均比例分别为84%和69%;进一步回交后,从15408株BC_(5)回交后代中获得Rfo阳性后代117株,Rfo基因传递率为0.75%。平均花粉活力为83%,7个重点BC_(5)代Rfo阳性单株的花粉母细胞染色体在减数分裂时期配对和分离正常的平均比例为81%和84%。经过5代回交,甘蓝Rfo育性恢复系的倍性全部回复为正常的二倍体。所有Rfo阳性单株开花后育性表现为可育,与Rfo基因的分子标记鉴定结果完全一致,由此表明,基于本研究中开发标记构建的快速、准确、高效的Rfo基因高通量分型体系,可用于进一步回交转育后代筛选,大大提高育种效率。 展开更多
关键词 甘蓝 高分辨率熔解曲线(HRM) ogura cms 育性恢复基因 高通量
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Ogura CMS青花菜育性恢复材料创制及其遗传背景研究 被引量:3
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作者 黄静静 刘伟 +9 位作者 刘玉梅 韩风庆 方智远 杨丽梅 庄木 张扬勇 吕红豪 王勇 季家磊 李占省 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期533-547,共15页
利用含有育性恢复基因Rfo的芥蓝中间材料(14Y12),通过杂交转育途径将该基因导入6份优良Ogura CMS青花菜中,并从农艺性状、细胞水平和遗传多样性方面揭示其变化特征及遗传背景。分子鉴定结果表明,Ogura CMS青花菜Rfo杂交后代(F_(1)代)中... 利用含有育性恢复基因Rfo的芥蓝中间材料(14Y12),通过杂交转育途径将该基因导入6份优良Ogura CMS青花菜中,并从农艺性状、细胞水平和遗传多样性方面揭示其变化特征及遗传背景。分子鉴定结果表明,Ogura CMS青花菜Rfo杂交后代(F_(1)代)中,14个株系含有Rfo基因,Rfo基因传递效率约为40%。在农艺性状方面,Rfo转育后代农艺性状偏向青花菜,且遗传分离明显。在细胞水平方面,Rfo转育后代花粉活力(70%~85%)存在显著差异(P <0.05);减数分裂后期有染色体不均等分裂和染色体丢失的异常现象;部分Rfo转育后代的花粉管能够正常生长,而一些后代花粉管发育受阻或不正常;倍性鉴定表明,Rfo转育后代中二倍体12份,占总体比例54.55%,介于三倍体和四倍体的杂合倍性10份,占总体比例45.45%。遗传分析结果表明,在遗传相似系数0.50处,芥蓝14Y12、青花菜17B1253及Rfo转育后代可分为两大亚群:A亚群有10份,遗传背景偏向芥蓝;B亚群有22份,全部为青花菜。Rfo转育后代与芥蓝遗传相似系数为0.24~0.88,其中19B809-8单株与芥蓝遗传背景最远,遗传相似系数为0.24,可作为Ogura类型青花菜育性恢复的亲本材料。 展开更多
关键词 青花菜 ogura cms 育性恢复 遗传背景
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油菜Ogura-CMS恢复系分子标记二重PCR体系研究 被引量:1
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作者 王俊生 李俐俐 +5 位作者 邢亚迪 王双婷 杨欢欢 张沙 谭光轩 李成伟 《种子》 CSCD 北大核心 2012年第11期12-15,共4页
油菜Ogura-CMS是由细胞质中线粒体嵌合基因Orf 138和1对隐性细胞核基因(rfrf)共同控制的一种最稳定的雄性不育材料,是油菜杂种优势利用的一种有效途径。本研究根据不育基因Orf 138和恢复基因Orf 687的基因序列,设计2对PCR特异引物,以自... 油菜Ogura-CMS是由细胞质中线粒体嵌合基因Orf 138和1对隐性细胞核基因(rfrf)共同控制的一种最稳定的雄性不育材料,是油菜杂种优势利用的一种有效途径。本研究根据不育基因Orf 138和恢复基因Orf 687的基因序列,设计2对PCR特异引物,以自育的Ogura-CMS不育系、恢复系以及杂交F1代植株的DNA为模版,建立了同时扩增不育和可育恢复基因的的二重PCR体系,用于油菜Ogura-CMS恢复系的分子标记辅助选择。结果表明,以建立的二重PCR体系用于F2代群体的分子标记辅助选择,其结果与常规测交结果完全吻合,可以有效提高其选择效率。本研究所建立的油菜萝卜质雄性不育恢复系分子标记二重PCR体系检测结果稳定可靠,为油菜Ogura-CMS恢复系的选择提供了一种实用可靠的标记辅助选择技术体系。 展开更多
关键词 油菜 oguracms 二重PCR技术 分子标记
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从卷心菜和萝卜间的非对称原生质体融合中获得了Ogura型CMS品系
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作者 TakeshiMotegi 谢国禄 《国外作物育种》 2004年第1期59-60,共2页
我们的研究用卷心菜(B.oleracea,可育)和萝卜(Raohanus sativus,可育)间通过体细胞杂交获得了CMS卷心菜,并对其mtDNA分析表明,CMS卷心菜的mtDNA已转移到了Ogura型的mtDNA中。本研究所用的材料是Kameya等人(1989)用红卷心菜品种Ruby... 我们的研究用卷心菜(B.oleracea,可育)和萝卜(Raohanus sativus,可育)间通过体细胞杂交获得了CMS卷心菜,并对其mtDNA分析表明,CMS卷心菜的mtDNA已转移到了Ogura型的mtDNA中。本研究所用的材料是Kameya等人(1989)用红卷心菜品种Ruby ball与萝卜品种Shogoin间进行合成获得的属间体细胞杂种;该体细胞杂种的基因型和表型属于卷心菜型,但表现出雄不育特性。 展开更多
关键词 卷心菜 萝卜 非对称原生质体融合 oguracms品系 体细胞杂交
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