枸橼酸芬太尼对髋部骨折模型疼痛阈值和脊髓P物质信号传导的影响

目的探讨枸橼酸芬太尼对髋部骨折老龄大鼠疼痛的影响及其作用机制。方法将30只髋部骨折的老龄大鼠分为模型组(n=10)、枸橼酸芬太尼组(n=10)和枸橼酸芬太尼+Sar-SP组(n=10),另取同期健康大鼠设为正常组(n=10)。枸橼酸芬太尼组大鼠尾静脉滴注10μg/kg枸橼酸芬太尼注射液,枸橼酸芬太尼+Sar-SP组大鼠鞘内注射10μL Sar-SP后进行枸橼酸芬太尼干预,正常组和模型组大鼠尾静脉滴注等剂量生理盐水。治疗前(0 h)以及治疗后1、6、24、168 h测量大鼠后爪疼痛阈值、承重值、后爪温度和背腹厚度。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠脊髓组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和谷氨酸(Glu)水平;采用免疫组化染色法观察大鼠脊髓组织中离子钙结合衔接分子1(Iba-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和P物质(SP)阳性表达率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠海马组织中SP和速激肽受体1(TACR1)mRNA相对表达水平;采用Western blot检测大鼠脊髓组织中波形蛋白(VIM)、核受体共阻遏蛋白1(NOCR)、睫状神经营养因子受体(CNTFR)和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白相对表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠治疗前0 h及治疗后1、6、24、168 h,后爪疼痛阈值和承重值降低,后爪温度升高,背腹厚度增加,且脊髓组织中TNF-α、IL-6、IL-1β和Glu水平,Iba-1和GFAP阳性表达率,SP阳性表达率,SP和TACR1mRNA相对表达水平以及VIM、NOCR、CNTFR和EGFR蛋白相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,枸橼酸芬太尼组大鼠治疗后1、6、24、168 h,后爪疼痛阈值和承重值升高,后爪温度降低,背腹厚度减小,且脊髓组织中TNF-α、IL-6、IL-1β和Glu水平,Iba-1和GFAP阳性表达率,SP阳性表达率,SP和TACR1mRNA相对表达水平以及VIM、NOCR、CNTFR和EGFR蛋白相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与枸橼酸芬太尼组比较,枸橼酸芬太尼+Sar-SP组大鼠治疗后1、6、24、168 h,后爪疼痛阈值和承重值降低,后爪温度升高,背腹厚度增加,且脊髓组织中TNF-α、IL-6、IL-1β和Glu水平,Iba-1和GFAP阳性表达率,SP阳性表达率,SP和TACR1mRNA相对表达水平以及VIM、NOCR、CNTFR和EGFR蛋白相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论枸橼酸芬太尼对髋部骨折老龄大鼠疼痛的改善可能与降低脊髓SP表达,进而抑制神经胶质细胞活化和抗炎有关。

羊胎素抗氧化作用的研究

目的 研究羊胎素对老龄大鼠的抗氧化作用。方法 采用20月龄健康老年大鼠,按每日150、300、600mg/kg体重的剂量经口给予羊胎素溶液,80d后,分别测定各组大鼠的红细胞和组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)单胺氧化酶(MAO)活力。结果羊胎素能明显升高老龄大鼠红细胞SOD含量(P<005,P<0.01),降低血清和肝组织中MDA含量(P<0.05),并且降低脑组织MAO活力(P<0.05)。结论 羊胎素对老龄大鼠具有抗氧化作用。

补肾、活血类复方对老年大鼠T细胞凋亡相关基因表达调控模式的比较研究

目的 :探讨两个补肾复方 (右归饮和补肾益寿胶囊 )及活血复方下调老年大鼠T细胞凋亡的基因调控模式。方法 :用TUNEL标记的流式细胞检测和荧光实时定量RT PCR技术 ,研究老年大鼠和年轻大鼠T淋巴细胞抗凋亡和促凋亡基因 (Fas、FasL、Bcl 2、Bax、TNFR1、TNFR2 )的表达以及凋亡级联反应中半胱氨酸蛋白酶 (如Caspase8和Caspase3)活性的差异 ,及比较两个补肾复方和活血复方对老年大鼠T细胞抗凋亡和促凋亡基因表达的调控以及对Caspase活性的影响。 结果 :两个补肾复方均能够有效地降低老年大鼠T细胞的过度凋亡 ,下调FasL及TNFR1基因的转录和Caspase8及Caspase3的活性。而活血复方对于T细胞的过度凋亡无显著作用。结论 :激活诱导的T细胞过量凋亡与肾虚密切相关 ,两个补肾复方均可下调促凋亡基因FasL和TNFR1的转录 ,从而抑制老年大鼠过度的T细胞凋亡 ,是补肾法所特有的对老年T细胞凋亡相关基因的调控模式。

茶叶对老龄大鼠血糖、血脂及抗氧化功能的影响

108只12月龄退役SD大鼠分成13组经二个半月的红、绿茶添加饲料和茶汤的饲喂试验，结果表明，红茶和绿茶无论是干茶添加在饲料中还是茶汤，各处理均能显著降低老龄大鼠的血糖含量（P＜0．05）、血脂含量（P＜0．01）；显著提高其SOD酶活力（P＜0．01）；显著降低其MDA含量（红茶达P＜0．01水平，绿茶达P＜0．05水平），其中绿茶降血脂能力比红茶强，而红茶抗氧化效果比绿茶显著。后者说明，茶叶的生物抗氧化机制除茶多酚类物质起作用外，还存在着其他更为重要的机制。

针刺老年大鼠“足三里”、“关元”穴对脑、肾组织中NOS、CAT、MDA含量影响的实验研究

目的 :通过针刺老年大鼠“足三里”、“关元”穴[1] 观测大鼠脑、肾组织中一氧化氮合酶 (NOS)、过氧化氢酶 (CAT)、丙二醛 (MDA)含量的变化。方法 :采用生物化学方法检测针刺后大鼠脑、肾组织中NOS、CAT、MDA含量的变化。结果 :针刺能提高脑、肾组织中一氧化氮合酶含量 ,提高CAT活性 ,降低MDA含量。结论 :针刺老年大鼠“足三里”、“关元”穴能提高抗氧化防御系统酶的活性 ,增强清除自由基的能力 ,减少或抑制脂质过氧化产物的生成 ,从而起到延缓衰老进程、抗衰老的作用。

左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的 :观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体 (GR)mRNA表达的影响 ,探讨海马对下丘脑 垂体 肾上腺 (HPA)轴的调节作用 ,以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退化的作用机制。方法 :以自然衰老大鼠为动物模型 ,采用原位杂交法 ,观察药物对大鼠海马各分区 (DG、CA1、CA2、CA3 )GRmRNA表达变化。结果 :老年大鼠海马各分区GRmRNA表达均明显减弱 ,而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年大鼠海马DG、CA1和CA3分区低下的GRmRNA的表达。结论 :左归丸、右归丸通过提高GRmRNA表达 ,进而改善海马对HPA轴的抑制性调控作用 ,以延缓机体衰老。

锁阳黄酮对老年大鼠的抗疲劳作用

目的探讨锁阳黄酮对老年大鼠运动耐力和抗氧化作用的机制。方法50只老年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(不游泳、不给药)、单纯游泳组(游泳+生理盐水灌胃)、游泳+给药组(分为锁阳黄酮20 g/kg体重、10 g/kg体重和5 g/kg体重灌胃组),共5组,每组10只。采用循环水流自由游泳,动物每天游泳1次,每次30 min,连续10 d,第11天进行运动耐力测试;用紫外分光光度计和试剂盒检测血液中单胺氧化酶(MAO)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力。结果三个游泳+给药组动物体重比单纯游泳组分别增长12.9%、80.6%和200%;沉下前游泳时间比单纯游泳组增加19.4%、29%和48.4%;每只动物沉下次数(次/10 min)减少17.8%、43.2%和72.9%;总游泳时间延长2.8%、7%和29.6%;MAO比单纯游泳组降低60%、69.8%和80.5%,差异均有非常显著性意义(P<0.01);GSH-px增加465.3%、563.8%和635%,差异亦有非常显著性意义(P<0.01)。结论锁阳黄酮具有增强运动耐力、提高机体抗氧化、抗疲劳的作用。

老年大鼠肝脏超微结构加龄变化的研究

对雄性18月、25月、28月及31月龄大鼠肝脏超微结构的加龄变化进行了透射电镜的观察.发现从25月龄开始肝细胞核有的出现异染色质增多、边集,粗面内质网逐渐减少.线粒体基质深浅不一,凡基质变深者其嵴亦由板状变为泡状,最深者嵴消失.在有脂肪变性的肝细胞,其线粒体大小悬殊,形态多样,基质增深,嵴多变为泡样;内质网消失.胆小管内与窦周隙中的微绒毛减少,而窦周隙中的胶原原纤维则增多.31月龄大鼠除上述现象外,窦周隙中不但微绒毛消失,而且内皮细胞结构不清,在其外与肝细胞膜的窦周隙面均出现不规则的基膜样结构.

不同鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠延缓衰老的作用

观察了鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠某些衰老生化指标的影响。结果表明:鹿胎及胎盘制剂可显著或极显著抑制大鼠脑和肝脏中MAO活性,其中鹿胎纯粉和鹿胎制剂Ⅱ号处理组。脑中MAO活性分别比对照组降低67.74%和66.73%(P<0.01);鹿胎制剂Ⅱ号处理组肝脏中MAO活性比对照组降低31.37%(P<0.05);不同处理组心肌和脑中脂褐质含量也有不同程度的降低(P>0.05)。上述结果表明,鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠具有一定的抗衰老作用,其中鹿胎制剂Ⅱ号的抗衰老作用效果最好。

老龄SD大鼠胰岛β细胞形态功能研究

目的观察3组不同月龄SD大鼠糖脂代谢指标变化，了解在基础及葡萄糖刺激下胰岛β细胞胰岛素分泌、结构变化与老龄糖耐量减退的关系，探讨老龄糖耐量受损的机制。方法采用免疫组化、细胞体视学、透视电镜等方法观察5～6、11～12、20～24月龄SD大鼠胰岛及胰岛β细胞形态及胰岛素分泌水平；将胰岛β细胞分离后与两种不同质量浓度的葡萄糖培养，观察葡萄糖刺激下老龄大鼠β细胞胰岛素分泌水平。结果20～24月龄大鼠体质量、空腹血糖及血脂水平有增高；11～12、20～24月龄大鼠血清中游离脂肪酸（FFA）水平显著增高；对葡萄糖刺激出现峰值降低、达峰时间延迟；胰岛β细胞体积增大和细胞内胰岛素分泌量减少。老龄胰岛β细胞内线粒体和内质网肿胀，空泡变性。从11～12月龄大鼠开始，胰腺中平均胰岛面积随着年龄的增加而减少；但每个胰岛中平均胰岛β细胞的面积比例却有增加。结论老龄鼠在空腹血糖正常时即已具备胰岛素抵抗的某些特征；老龄大鼠胰岛β细胞虽然有面积比例增大，但β细胞基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能减低。提示一旦糖代谢受损出现糖尿病，应尽早考虑胰岛素治疗同时改善胰岛素抵抗。

西洋参茎叶皂甙对老年大鼠血清和组织中超氧化物歧化酶的作用

实验观察了西洋参茎叶皂甙对老年大鼠血清和组织中超氧化物歧化酶(SOD)的作用。结果表明,西洋参茎叶皂甙50mg/kg能明显提高老年大鼠血清和组织中SOD的活性,与对照组相比有显著性差异(P<0.01),同样剂量对青年大鼠SOD的活性无明显作用。

温肾养血方提高高龄雌鼠卵母细胞质量和胚胎发育潜能的研究

目的探讨温肾养血方提高高龄雌鼠卵母细胞质量和胚胎发育潜能的作用机制。方法按随机数字表法将8月龄ICR小鼠分为对照组、血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)组、温肾养血组、温肾组、养血组,观察用药后各组受精率和卵裂率,卵母细胞和受精卵线粒体的表达情况。结果温肾养血组、温肾组、养血组的受精率和卵裂率明显高于对照组和PMSG组(P <0. 05),温肾养血组的受精率和卵裂率最高(P <0. 05)。2细胞率、4细胞率、8细胞率、桑葚胚率和囊胚率,温肾养血组均比PMSG组高且差异有统计学意义(P <0. 05)。卵母细胞和受精卵中的线粒体DNA拷贝数温肾养血组最高,与对照组比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论温肾养血方可能通过调控卵母细胞线粒体DNA拷贝数提高卵母细胞质量和胚胎发育潜能。

调心、补肾中药对大鼠脑基底核损伤所致乙酰胆碱酯酶变化的影响

用单极1.0mA的直流电刺激大鼠前脑基底核的方法制作类痴呆动物模型,手术后第4天喂以生地、熟地、菖蒲、远志等为主的补肾、调心方剂及喜得镇等药17天。在第21天取材,恒冷箱切片,进行乙酰胆碱酯酶(AchE)组织化学反应。观察基底核苍白球大神经原的反应变化。实验结果为模型组的大细胞神经原核团面积显著变小,AchE阳性反应的细胞及突起等数量显著减少,AchE反应显著降低。调心及补肾组的核团面积都比模型组大,阳性细胞数量及突起分枝也都较多,AchE反应比模型组明显提高。实验结果表明应用调心、补肾中药及喜得镇动物的大细胞神经原核团面积、细胞及突起数量、AchE反应都有明显的提高。证实此类中药可能有调节脑皮层活动的效应。

老年大鼠角膜和晶状体上皮细胞NADPH氧化酶表达的研究

目的研究NADPH氧化酶在青年和老年大鼠角膜和晶状体上皮细胞中的表达。方法实验分为青年组(3月龄)和老年组(16月龄),比色法测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,HE染色观察角膜和晶状体上皮细胞病理形态学变化,免疫组化检测角膜和晶状体上皮细PKCα、P47phox和NOX2的表达。结果与青年组大鼠比较,老年组大鼠血清SOD活性明显降低,MDA含量明显增加。病理结果显示,老年组角膜和晶状体上皮细胞核固缩、核深染细胞增多。免疫组化结果表明,老年组大鼠角膜和晶状体上皮细胞PKCα、P47phox和NOX2的表达明显增加。结论老年大鼠角膜和晶状体上皮细胞NADPH氧化酶表达明显增加,NADPH氧化酶介导的活性氧可能与老龄大鼠角膜和晶状体退行性变有关。

右美托咪啶对老龄大鼠离体心肌缺血再灌注损伤影响

为研究通过右美托咪啶预处理对老龄大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的影响,选择40只健康老龄雄性SD 老龄大鼠,体重250~300g,随机分为4 组,建立Langendorff 模型.I-R 组：继续灌注K-H 液30min;DEX-K-H1组：继续灌注含0.2ng.mL-1右美托咪啶的K-H液20min;DEX-K-H2组：继续灌注含2ng.mL-1右美托咪啶的K-H液20min;DEX-K-H-Y组：继续灌注含2ng.mL-1右美托咪啶和1M育亨宾的K-H液20min.DEX-K-H1 组、DEX-K-H2 组、DEX-K-H-Y 组于20min 后冲洗10min K-H 平衡液.各组造成全心缺血的方式均为停灌30min,然后再灌注120min K-H 平衡液.记录各组缺血前、平衡灌注末、再灌注60min、再灌注120min的心率（HR）、左心室形成压（LVDP）、左室内压上升最大速率（＋dp∕dtmax）、左室内压下降最大速率（-dp∕dtmax）.于再灌注末测定超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量.结果表明：缺血后各组HR无显著差异（p〉0.05）,与IR 组、DEX-K-H-Y 组相比,DEXK-H1 组、DEX-K-H2 组各时点的垣dp∕dtmax、-dp/dtmax、SOD 增加,MDA 下降（p〈0.05 或p〈0.01）,且DEX-K-H-Y 组变化最明显.说明右美托咪啶预处理对老龄大鼠缺血再灌注心脏的心功能有所改善,具有一定的保护老龄大鼠心肌缺血再灌注损伤作用,右美托咪啶的浓度影响其保护心肌效果.

运动干预对负性情绪刺激SD老年大鼠皮质酮,TNF-α、CRP的影响

目的:探讨运动干预对负性情绪刺激SD老年大鼠血清皮质酮、CRP、TNF-α的影响。方法:采用对老年大鼠负性情绪刺激,然后进行运动干预实验设计,观察血清COR、TNF-α、CRP含量变化。结果:与对照组相比,三周负性情绪刺激后,血清皮质酮、CRP非常显著升高,TNF-α显著升高;与对照组相比,运动组皮质酮、TNF-α的升高非常显著,CRP升高显著;与3周负性情绪刺激相比,负性情绪应激后运动干预组皮质酮、TNF-α降低非常显著,对CRP的影响不显著;与对照组相比,3周负性情绪应激后运动干预组,皮质酮、CRP上升非常显著,TNF-α稍有升高,但不显著;与对照组相比,3周负性情绪刺激后6周安静休息组,皮质酮、CRP非常显著升高,TNF-α几乎没有变化。结论:1)3周负性情绪刺激使炎症因子升高。2)单纯6周运动也使炎症因子升高。3)6周安静恢复不能使负性情绪刺激导致的老年大鼠炎症因子的高水平状态降低到对照组水平。4)负性情绪刺激后6周运动干预使负性情绪刺激导致的炎症因子高水平状态下降。5)无论是负性情绪刺激还是运动应激都使皮质酮升高。

有氧运动对老年大鼠胃肠动力及血清中胃促生长素、瘦素水平的影响

目的:探讨有氧运动对老年大鼠胃肠动力以及血清中胃促生长素(ghrelin)和瘦素(leptin)的影响。方法:雄性SD大鼠45只,分为青年对照组、老年对照组以及老年有氧运动组(n=15)。老年有氧运动组采用递增负荷的方式进行8周跑台运动。实验过程中连续观察并记录各组大鼠的摄食量、体重以及行为学特征;实验结束测定各组大鼠胃排空速率以及小肠推进比,血清Ghre-1in和Leptin。结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠摄食量、胃排空速率、小肠推进比、血清Ghrelin水平明显降低,体重、体脂和Leptin水平显著升高;与老年对照组相比,老年有氧运动组大鼠摄食量、胃排空速率、小肠推进比、血清Ghrelin水平明显升高,体重、体脂和Leptin水平明显降低。结论:有氧运动能促进老年大鼠食欲、提高胃肠动力、改善身体成分,其保护机制可能与血清中Ghrelin含量升高和Leptin含量降低有关。

老年大鼠睾丸Leydig细胞移植后血浆睾酮和抗疲劳的观察

目的:观察老年大鼠Leydig细胞移植后的血浆睾酮和抗疲劳能力的变化。方法:受体鼠为18个月龄的老年鼠60只,分为移植一组、移植二组、对照组,每组20只。供体鼠采用90只1月龄的同种大鼠,手术摘取睾丸经体外细胞培养后取纯化的Leydig细胞行细胞移植。结果:老年鼠睾丸呈退行性改变,生精上皮、间质细胞数都显著减少;血浆睾酮下降。Leydig细胞移植后血浆睾酮明显升高,负重游泳试验显示:游泳时间移植组较对照组显著延长。结论:Leydig细胞移植可以提高老年大鼠血浆睾酮水平,提升抗疲劳能力,对延缓中老年男子雄激素部分缺乏综合征有一定帮助。

固本健脑法对老年健忘大鼠海马组织中AGEs/RAGE信号通路的影响

目的:比较固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法对老年健忘大鼠海马组织中AGEs/RAGE信号通路的影响。方法:腹腔注射D-半乳糖及Na NO2建立老年健忘大鼠模型,分别灌胃固本健脑方、归脾丸、六味地黄丸和石杉碱甲;并设空白组和模型组,灌以生理盐水。给药结束后,取大鼠海马组织,采用免疫组化法检测AGEs的含量,Western blot检测RAGE、NF-κB p65的表达,ELISA检测IL-1β、TNF-α的含量。结果:与空白组比较,模型组、西药组、补脾组、补肾组、固本组上述指标的表达均上调;与模型组比较,西药组、补脾组、补肾组、固本组上述指标的表达均下调;与固本组比较,西药组、补脾组、补肾组上述指标的表达下调;补脾组、补肾组、西药组组间比较,差异无统计学意义。结论:固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法均能在一定程度上改善老年健忘大鼠的记忆功能,但固本健脑法作用最佳,固本健脑法改善记忆功能的分子机制与AGEs/RAGE信号通路密切相关。

老龄大鼠肺炎双球菌肺炎肺脏免疫功能变化

目的 从肺脏免疫功能探讨老年肺炎的发病机制。 方法 复制肺炎双球菌肺炎模型 ,分为青年对照组和模型组、老龄对照组和模型组。观察肺脏组织病理改变和肺泡灌洗液免疫球蛋白、纤维接合蛋白 (Fn)和中性粒细胞计数。 结果 肺炎的肺组织损伤老龄大鼠较青年大鼠严重。青年模型组肺泡灌洗液sIgA和FN含量的降低和中性粒细胞、IgG增高均较青年对照组显著 ;与老龄对照组比较 ,老龄模型组sIgA和FN降低 ,IgA和中性粒细胞增高 ;老龄对照组IgG含量的增高及sIgA、FN含量降低较青年对照组显著 ;老龄模型组IgA含量增高和sIgA降低较青年模型组显著。 结论 肺脏中性粒细胞和免疫球蛋白含量增多及sIgA、FN含量减少与肺炎的发生发展有着密切关系。随着增龄 ,肺脏免疫球蛋白含量增多及sIgA和FN含量减少 。