雷丸蛋白酶的发酵、提取及对猪囊尾蚴体外活性作用的初步研究

目的：探索雷丸菌发酵产物中是否含有和天然雷丸中相同分子量的而且具有体外杀灭猪囊尾蚴活性的雷丸蛋白酶。方法：对雷丸菌发酵所产生的蛋白酶进行提取、检测和体外杀灭猪囊尾蚴的实验，并和天然雷丸蛋白酶进行比较。结果：从雷丸菌发酵产物中分离出来的雷丸蛋白酶经测定，分子量为１６８００，等电点为４．４，末端氨基酸为缬氨酸，具有水解蛋白的活力及体外杀灭猪囊尾蚴的活性。结论：采用雷丸菌发酵方法所获得的雷丸蛋白酶与天然雷丸蛋白酶之间没有明显差别。

雷丸菌核与发酵菌丝蛋白体外抑瘤对比分析

研究雷丸发酵菌丝与菌核蛋白体外对肿瘤细胞HepG2的抑制作用。方法:分别提取雷丸菌核与发酵菌丝蛋白,进行体外抑瘤试验,记录细胞形态变化,计算抑瘤率,分析两者在抑瘤效果上的差异。结果:两种提取蛋白在体外对HepG2肿瘤细胞的抑制作用相近,最高可达80%左右。结论:发酵菌丝蛋白具有显著抑瘤作用,在深入研究药理毒理的基础上可替代菌核入药。

雷丸研究进展

从雷丸的临床应用、有效成分及其药理作用、人工培养等方面综述了近年来雷丸的研究进展。

雷丸药学研究概况

在广泛文献检索基础上,对雷丸的成分、药理、临床应用等进行概述,以期为全民养生保健提供科学资料。

雷丸化学成分的研究

目的研究雷丸Omphalia lapidescens的化学成分。方法采用硅胶、凝胶等色谱方法对雷丸的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从雷丸提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(β-sitosterol,1)、齐墩果酸(oleanolic acid,2)、麦角甾醇(ergostero1,3)、麦角甾醇过氧化物(ergosterol peroxide,4)、甘遂醇(tirucallol,5)、豆甾醇-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(stigma-7,22-dien-3β,5α,6β-triol,6)、豆甾醇(stigmasterol,7)、3β-羟基豆甾-5,22-二烯-7-酮(3β-hydroxy-stigmast-5,22-dien-7-one,8)、木栓酮(friedelin,9)、表木栓醇(epifriedelanol,10)。结论所有化合物均为首次从该菌中分离得到。

雷丸中16种氨基酸的柱前衍生化RP-HPLC法含量测定

目的:测定雷丸中16种氨基酸的含量。方法:样品以6 mol.L-1盐酸于150℃水解1 h,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析。采用Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温为43℃;流动相A为0.1mol.L-1醋酸钠缓冲液(以醋酸调pH 6.5)-乙腈(93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为254 nm。结果:16种氨基酸浓度在1.16～47.32μg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9998～1.000);平均回收率在93.3%～107.2%之间;RSD均小于3.0%。结论:本方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可用于雷丸中氨基酸的检测。

理化因素及栽培基质对雷丸菌丝生长的影响

目的明确雷丸菌丝生长的影响因素,为人工栽培提供依据。方法在不同温度、碳源、氮源、p H、培养基质等培养条件下测定雷丸菌丝日生长量。结果 25℃、p H 6.0~7.0条件下菌丝生长快;1%~3%的碳源,菌丝生长速率差异不显著;蛋白胨、酵母粉等氮源对菌丝生长有抑制作用,玉米粉无抑制;竹叶为雷丸栽培种较适宜的栽培主料,玉米粉的促生长作用明显。结论温度、氮源和基质对雷丸菌丝生长的影响较明显。