雷丸凝集素的纯化及理化性质的研究

雷丸（OmphalialapidescensSchroct．）经过Tris－HCl缓冲液浸提，硫酸铵分级沉淀，离子交换，卵粘蛋白－Sepharose4B亲和层析以及Sephacryl-S100分子筛等步骤，纯化得到纯度为95％以上的雷扎凝集素（简称OLL）。比活提高45.8倍，活力回收2.5％。雷丸凝集素是单一肽链的蛋白质，分子量为12kDa，等电点为7.5，可被半乳糖抑制。具有热稳定性及酸碱（pH1～12）稳定性。2mmol／L氯化锌可使其比活提高4倍。同兔血相比，与人血进行凝集反应，其比活可提高4倍。进行圆二光谱测定，α－螺旋和β-折叠含量较高。与半乳糖间的抑制反应瞬间内完成，且空间结构变得紧密。

雷丸药材定性和定量分析方法研究

目的:建立雷丸主要成分的定性与定量分析方法。方法:采用薄层色谱法对雷丸中的麦角甾醇、麦角甾酮进行鉴别。运用可见-紫外分光光度法对雷丸所含的驱绦虫成分雷丸凝集素进行含量测定,以水为提取溶剂,采用Fonlin酚法,测定波长650nm。结果:应用所建立的方法对13批雷丸药材进行定性与定量分析,结果TLC斑点清晰,专属性强,均可检出雷丸的特征斑点;13批雷丸药材雷丸凝集素的含量以牛血清白蛋白计为0.61%～4.23%;方法学研究结果表明,牛血清白蛋白的量在52.76～263.8μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为98.0%(RSD=1.0%,n=6)。结论:本方法操作简便,重复性好,结果准确可靠,可用于雷丸的定性定量分析,以控制雷丸药材及相关产品的质量。