瓶尔小草总黄酮提取工艺优化及不同采收期含量变化规律研究

探究瓶尔小草的最佳采收时期,优化瓶尔小草总黄酮的提取工艺,并评价其体外抗氧化活性。以总黄酮含量为考察指标,对乙醇浓度、料液比、超声时间、提取温度进行单因素实验,并结合响应面法设计优选超声波辅助提取工艺。结果表明:瓶尔小草总黄酮的最优工艺条件为超声提取温度为40℃,乙醇浓度为65%,料液比为1∶30(g/mL),超声时间为35 min;一年中瓶尔小草的总黄酮含量变化存在两个富集期,最佳采收期为8月,其次4月份也较为适宜采收。以维生素C为对照,瓶尔小草黄酮提取物对DPPH自由基、ABTS^(+)自由基清除率分别可达94.76%和98.33%,瓶尔小草总黄酮的总还原能力测定IC_(50)为0.0157 mg/mL,说明瓶尔小草总黄酮具有良好的体外抗氧化活性。本研究为瓶尔小草的采收、开发利用提供了试验依据。

上海蕨类植物新记录种——柄叶瓶尔小草

上海作为我国最大的城市之一,人口密集,人类活动频繁,原生植被物种多样性受人为干扰严重。作为古老的孑遗植物,蕨类植物对生长和繁殖环境要求严格,能够灵敏地指示环境变化。为摸清上海市国土空间生态环境现状,调查团队在上海市全域土地综合整治项目区内展开长期定点监测,期间在奉贤区西渡街道辖区发现了上海蕨类植物新记录种——柄叶瓶尔小草(Ophioglossum petiolatum Hook.)。文章对新记录种的形态特征和发现生境进行描述,讨论了Flora of China与《云南植物志》对其形态描述的差异,认为《云南植物志》中的描述与原始发表文献和模式标本更为接近,即该种的重要特征为其不育叶的基部下延呈柄状。柄叶瓶尔小草在江浙沪地区亦属首次报道,此次发现扩大了该种向东和北的分布记录,对研究蕨类区系分布有推进作用;瓶尔小草属植物近年来在华东地区较为罕见,本次发现地位于上海市全域土地综合整治项目区内的生态公益林,彰显了上海城市森林建设的生态效能。最后,建议将保护珍稀物种及其生境的理念融入全域土地综合整治工作,为指导大都市国土综合整治和生态保护修复工作提供新思路和新挑战。

一测多评法测定一支箭中3种活性成分的含量

为建立同时测定一支箭中3种成分含量的方法,为一支箭多成分质量评价提供参考。以3-O-甲基槲皮素7-O-β-D-葡萄糖苷为参照物,计算其对另外2种成分的相对校正因子。测定的三种化合物分别在7.136~208.137、4.883~365.728、3.306~264.795μg/mL范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为101.2%(RSD=0.85%)、99.8%(RSD=1.23%)和98.5%(RSD=1.12%);相对校正因子分别为1.00、1.08、0.95,所得结果与外标法结果基本一致。所建立的一测多评法可准确测定一支箭中3种活性成分的含量。

不同采收季节瓶尔小草黄酮类化合物含量分析

目的确定瓶尔小草的最佳采收季节。方法对夏(8月)、秋(10月)、冬(12月)三季节采收的瓶尔小草中的总黄酮进行了提取,以芦丁为对照品,用紫外分光光度法对其含量进行了测定。结果不同季节采收的瓶尔小草中黄酮类化合物的含量有着显著的差异,夏季(8月)其含量为58.42(mg/g DW),秋季(10月)为39.32(mg/g DW),冬季(12月)为28.14(mg/g DW)。结论瓶尔小草的最佳采收季节应为每年8月。

珍稀药用植物瓶尔小草的研究进展

该文综述了珍稀药用植物瓶尔小草(一支箭)的研究近况,探讨了瓶尔小草的概况、化学成分、应用价值、种子萌发、组织培养以及栽培技术等方面的内容,为深入开发利用提供科学资料。

微波辅助提取一支箭总黄酮的工艺研究

以一支箭为原料,对一支箭总黄酮的微波辅助提取工艺进行了研究。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化工艺条件。试验结果表明,最佳条件为微波时间6 min,微波功率400 W,料液比1∶25(g∶m L),乙醇体积分数70%。在此条件下,一支箭中总黄酮的提取率达到7.25%。

瓶尔小草的生药学研究

目的对四川南充野生草药瓶尔小草进行生药学研究。方法采用基源鉴定、性状鉴定、显微鉴定、显色反应、TLC法、紫外-可见分光光度法和HPLC法等理化鉴定方法。结果观察和描述瓶尔小草的原植物形态、药材性状、各器官(根、茎、营养叶及孢子穗)横切面组织构造和全草粉末显微特征,建立瓶尔小草乙醇提取物的TLC和HPLC鉴定方法;建立紫外-可见分光光度法定量测定瓶尔小草中总黄酮的含量,测得阴干和低温烘干2种不同干燥方法的瓶尔小草中总黄酮的含量分别为2.74%和3.28%。结论草药瓶尔小草的原植物和药材可见营养叶1枚,叶脉网状;孢子穗窄条形,孢子囊排成2列;其根、茎、营养叶及孢子穗的横切面组织构造具有典型性,2个长椭圆形至扁圆形孢子囊在横切面上呈八字形排列;全草粉末中可见导管、气孔、孢子和草酸钙小方晶等显微鉴别特征;主要化学成分总黄酮的TLC和HPLC图谱具有鉴别意义;建立的总黄酮含量测定方法简便、准确、可靠。以上研究结果可为瓶尔小草原植物与药材鉴别、质量标准的制定及开发利用提供参考。

HPLC法测定瓶尔小草中槲皮素

目的建立HPLC法测定瓶尔小草中槲皮素含量的方法。方法采用Kromasil 100-5-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%醋酸水(B)(27∶73)等度洗脱,检测波长为360nm,流速为1.0m L·min-1,柱温:30℃。结果槲皮素进样量在26.78~178.56ng范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9997,n=6),槲皮素的平均回收率为100.31%(RSD=1.204%)。结论该法简便、准确、可靠,可用于瓶尔小草中槲皮素的含量测定。运用该法测定不同干燥方法的瓶尔小草样品中槲皮素含量,结果二者槲皮素含量差距较大,低温烘干样品中槲皮素含量明显高于阴干样品。

惠州学院金山湖校区四种“袖珍植物”调查

调查了瓶尔小草、绶草、线柱兰和锦地罗等四种"袖珍植物"在惠州学院金山湖校区的分布情况,介绍了它们形态特征、生境、分布、用途,并提出了相应的开发利用建议。

瓶尔小草内生真菌代谢产物的体外抗神经炎症活性

目的观察瓶尔小草内生真菌代谢产物的体外抗神经炎症活性。方法用组织块法对瓶尔小草内生真菌进行了分离,脂多糖(LPS)刺激小胶质细胞造成神经炎症模型,用MTT法检测细胞活力,Elisa法测定LPS诱导的TNF-α的表达。结果从瓶尔小草中分离纯化得到24株菌株,其中有3株(PE-4、PE-9、PE-24)菌株代谢物可明显抑制LPS诱导的炎症模型中TNF-α产生,PE-24菌株的抗炎活性最强。结论瓶尔小草内生真菌具有一定的抗神经炎症活性,是筛选天然生物活性成分或先导化合物的潜在资源。

瓶尔小草提取物红外光谱解析

以瓶尔小草为原料采用醇提水沉—聚酰胺吸附、乙醇溶液梯度洗脱,得到不同洗脱物。在此基础上测定红外光谱(IR),并与黄酮类化合物对照品槲皮素、芦丁的红外光谱进行比较。结果表明,30%和50%乙醇溶液洗脱物红外光谱相似,60%和70%乙醇溶液洗脱物的红外光谱相似,而80%和90%乙醇溶液洗脱物的红外光谱有明显差异,初步指认了不同洗脱物的吸收特征峰,为瓶尔小草原料药的提取建立分析模式。

一叶草的性状及显微鉴别

目的对一叶草进行鉴别,为一叶草的开发利用及质量标准提供科学依据。方法野外采集及性状与显微鉴定。结果观察和描述一叶草的性状,根、根茎、叶的组织构造和全草粉末的显微特征。结论一叶草是一种值得开发利用的民间草药,其药材性状和显微特征具有鉴定价值。

一支箭的生物学特性及人工栽培技术研究

研究一支箭生物学特性及人工栽培关键技术。通过引种栽培,观察生物学特性及生长发育规律,发现环境条件、田间管理措施等对一支箭生长发育有显著影响。栽培研究结果可为建设规模化一支箭人工种植基地提供理论依据。

瓶尔小草孢子发生超微结构研究

孢子发生是蕨类植物无性生殖的重要环节,有关孢子发生过程中孢母细胞被膜和孢子被膜的形成以及孢子外壁的片层状结构和孢子外壁内层来源尚不完全清楚,本文利用透射电镜观察了瓶尔小草(Ophioglossum vulgatum L.)的孢子发生过程。结果显示,孢子母细胞被孢母细胞被膜所包裹,孢子母细胞在孢母细胞被膜内进行减数分裂。但是减数分裂第二次分裂后,这层膜消化分解。然后,在每个四分孢子周围产生新的孢子被膜包围孢子。在孢子被膜内,首先产生片层状结构,然后产生孢子外壁内层。然而,孢子被膜最后被消化分解,原生质团直接将每个孢子包围,并将原生质团内孢粉素小球沉积在片层结构外侧从而形成孢子外壁外层。此后,孢子内壁在孢子外壁内层内侧形成。最后,在孢子外壁外侧产生孢子周壁,周壁是由染色深的物质和膜结构组成。研究结果表明,表面膜实际由两层被膜组成,即孢母细胞被膜和孢子被膜,他们在发生上是单独形成,没有继承关系;孢子外壁的片层结构和孢子外壁内层由孢子自身分泌的物质形成。

一支箭黄酮类化学成分研究

采用硅胶柱色谱、凝胶色谱及高压制备色谱等方法对一支箭(Ophioglossum vulgatum Linn.)的黄酮类成分进行分离纯化和结构表征。共分离得到黄酮类化合物5个,分别为3-O-甲基槲皮素7-O-β-D-葡萄糖基-4′-O-β-D-葡萄糖苷(1),槲皮素3-O-(6-O-咖啡酰基)-β-D-葡萄糖基-(1→2)-α-L-鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(2),瓶尔小草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(3),山柰酚3-O-(6-O-咖啡酰基)-β-D-葡萄糖基-(1→2)-α-L-鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(4),3-O-甲基槲皮素7-O-β-D-葡萄糖苷(5)。化合物1~4首次从该植物中分离得到。为该药材合理开发提供科学依据。

珍稀蕨类植物瓶尔小草根状茎形态、光合和种群生态学研究

瓶尔小草(Ophioglossum vulgatum)是珍稀古老的蕨类植物.对分布于浙江金华北郊的瓶尔小草研究表明:(1)瓶尔小草明显地呈集群分布式样,其斑块直径从小到大分别约为0.6m,1.4m,4.8m,相应斑块内植株数目分别约为357株,940株,1833株,基于根状茎的传播方式在瓶尔小草种群扩散中起了重要作用,这种传播方式也限制了该种快速传播;(2)瓶尔小草的生态位宽度为0.2889,低于分布点上其他伴生植物的平均值,瘦风轮(Calam inthagracilis)、酢浆草(Oxalis corniculata)、红穗苔草(Carex argyi)与瓶尔小草的生态位重叠值较大,但是这些植物的生态位又明显宽于瓶尔小草,说明瓶尔小草受到这些杂草的竞争性胁迫;(3)瓶尔小草光饱和点为9×10-4mol.m-2.s-1,补偿点为2.4×10-5mol.m-2.s-1,最大净光合速率为3.45×10-6mol CO2.m-2.s-1,是一种典型的低光效阴生植物;(4)从根状茎总长度、总体积、表面积、突出面积等比较发现,瓶尔小草吸收水份和矿质元素的能力相对较弱.

响应面优化瓶尔小草多糖超声提取工艺及体外抗氧化活性

优化瓶尔小草的多糖的提取工艺及体外抗氧化活性,以瓶尔小草多糖提取量为考核指标考察液料比、超声时间、超声功率和提取温度对其多糖提取量的影响,在单因素基础上结合Box-Behnken响应面分析法优化瓶尔小草多糖的提取工艺,并以清除DPPH自由基和·OH能力评价其多糖的体外抗氧化活性。瓶尔小草多糖的最佳提取工艺为:液料比7mL/g、超声时间43min、超声功率300W和提取温度70℃,此时其多糖的含量为9.82mg/g;瓶尔小草多糖有较强的抗氧化活性,其清除DPPH自由基、·OH的半抑制浓度(IC50)分别为0.029mg/mL和0.454mg/mL,为进一步研究瓶尔小草的药用价值和保健功能提供理论依据。

中药一支箭HPLC指纹图谱

目的:建立中药一支箭3种基源植物尖头瓶尔小草(Ophioglossum pedunculosum)、狭叶瓶尔小草(O.thermal)和瓶尔小草(O.vulgatum)的HPLC指纹图谱,为科学评价药材质量提供依据。方法:采用HPLC方法,Waters Xbridget色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.3%甲酸水(B)梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温40℃,检测波长260 nm,进样量10μL,用聚类分析、相似度分析和主成分分析方法对一支箭指纹图谱进行分析。结果:15批一支箭中药材归为3类,确定14个主要共有峰,在亲缘关系上狭叶瓶尔小草和瓶尔小草较近,离尖头瓶尔小草较远,利用4个对照品瓶尔小草醇,3-O-甲基槲皮素,瓶尔小草醇4'-O-β-D-葡萄糖苷和3-O-甲基槲皮素7-O-β-D-葡萄糖基-4'-O-β-D-葡糖糖苷的相对含量作为化学分类学标签可区分3个种。结论:一支箭HPLC指纹图谱的构建为其基源植物的质量控制和品种鉴定提供了参考。

新疆蕨类植物一新记录——瓶尔小草

记述了新疆蕨类植物1新记录种,为1新记录科和1新记录属,即瓶尔小草科Ophioglossaceae,瓶尔小草属Ophioglossum Linn.,瓶尔小草Ophioglossum vulgatum Linn.,并分析了其形态学特征。