朝天罐的离体培养与植株再生

以朝天罐(Osbeckia opipara)的茎段为外植体进行离体培养植株再生研究,结果表明:茎段在适宜的培养基上可形成愈伤组织,并分化成再生植株。培养基MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30mg/L+琼脂7mg/L,既适合于愈伤组织的诱导,也适合于愈伤组织的增殖和分化,诱导率为83.3%;丛生芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖50mg/L+琼脂7mg/L,增殖系数为7.2;试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.5mg/L+IBA 0.2mg/L+6-BA 0.05mg/L+蔗糖20mg/L+琼脂7mg/L,生根率为100%。

朝天罐根抗炎活性部位及作用机制的研究

目的:筛选出朝天罐根抗炎活性部位,并研究其作用机制。方法:利用系统溶剂法对朝天罐根醇提取物进行萃取分离得到3个部分:乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水液部位。采用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致小鼠足趾肿胀实验综合评价不同提取部位的抗炎活性。采用RT-PCR法测定了乙酸乙酯部位对小鼠致炎耳组织表达的影响。结果:与空白对照组比较,朝天罐乙酸乙酯部位和正丁醇部位可显著降低小鼠耳廓肿胀和足肿胀度(P<0.05);乙酸乙酯部位可使致炎小鼠耳组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA表达水平明显降低。结论:朝天罐乙酸乙酯部位和正丁醇部位为其抗炎活性部位,其作用机制为有效降低TNF-αmRNA的表达。

朝天罐提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:研究朝天罐(Osbeckia opipara,CTG)水提取物体外抗肿瘤活性。方法:采用CCK-8法和细胞克隆形成实验,研究不同浓度CTG水提取物对人肝癌细胞7721、人鼻咽癌细胞CNE-2增殖抑制作用;通过Hoechst33342荧光染色法检测细胞核染色质的变化来评价CTG对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:CCK8和细胞克隆形成实验显示,CTG水提取物体外显著性抑制SSMG-7721和CNE-2细胞增殖; Hoechst 33342检测发现细胞核染色质发生明显改变。结论:CTG水提取物具有一定的抗肿瘤活性。

朝天罐总酚对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞炎症反应的调控作用

目的:探讨朝天罐总酚对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症反应的调控作用。方法:培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,以LPS诱导构建细胞炎症模型,采用MTT法测定不同浓度(1.88μg/mL、3.75μg/mL、7.5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL、60μg/mL)朝天罐总酚对细胞增殖的影响,中性红吞噬实验检测朝天罐总酚对RAW264.7细胞吞噬能力的影响。根据细胞存活率和吞噬功能检测结果,设为朝天罐总酚低、中、高剂量组,Griess法检测细胞上清液一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平。结果:朝天罐总酚浓度≤15μg/mL时,其对RAW264.7细胞存活率无显著影响(P>0.05)。与空白对照比较,3.75~15μg/mL朝天罐总酚可增强RAW264.7细胞细胞吞噬能力(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组NO、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.01);与模型组比较,朝天罐总酚中、高剂量组NO、TNF-α水平降低,朝天罐总酚各剂量组IL-6水平降低(均P<0.01)。结论:朝天罐总酚可能通过抑制炎症因子产生、增强细胞吞噬功能对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞发挥抗炎作用。

朝天罐总酚的提取纯化及其抗氧化活性研究

[目的]优化朝天罐总酚的提取纯化工艺并评价其抗氧化活性。[方法]采用单因素和正交试验方法优化朝天罐总酚回流提取工艺,并使用大孔树脂对朝天罐总酚进行分离纯化。采用清除DPPH、ABTS·及Fe 3+还原能力试验,与维生素C的抗氧化能力进行比较,评价朝天罐总酚的抗氧化活性。[结果]最佳提取工艺条件为乙醇浓度35%,提取温度80℃,料液比1∶50(g∶mL),提取时间3 h,提取次数1次;AB-8型大孔树脂为纯化朝天罐总酚的最佳树脂,最佳动态工艺条件为上样液质量浓度2.0 mg/mL、上样流速2 mL/min、洗脱液乙醇浓度60%、洗脱流速3 mL/min、洗脱用量120 mL。在最佳工艺条件下,纯化后的朝天罐总酚含量为74.26%,对比于粗提物中的总酚含量(15.36%)提高了3.83倍。朝天罐总酚的抗氧化活性随质量浓度的增大而增强,其清除DPPH自由基的能力较维生素C强,对ABTS+自由基和铁离子也有较好的清除能力和还原能力,经AB-8树脂纯化后,其抗氧化能力显著提高(P<0.01)。[结论]优选的提取纯化工艺稳定可行、提取率高,朝天罐总酚抗氧化性能较强,为朝天罐总酚的应用提供了科学依据和理论基础。

朝天罐根化学成分的研究(英文)

目的:研究朝天罐Osbeckia opipara根化学成分。方法:通过多种柱色谱方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果:从朝天罐根的甲醇提取物中分离得到12个化合物:lasiodiplodin(1),de-O-methyllasiodiplodin(2),2,3-dihydro-2-hydroxy-2,4-dimethyl-5-trans-propenylfuran-3-one(3),integracin(4),5α,8α-epidioxy-(22E,24R)-ergosta-6,22-dien-3β-ol(5),3,3',4'-tri-O-methylellagicacid(6),5-羟甲基糠醛(7),吐叶醇(8),白桦脂酸(9),2α-羟基乌索酸(10),(24R)-Stigmast-4-ene-3-one(11),eugenitin(12)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

栽培因子对朝天罐繁殖生长的影响研究

目的:本文研究了极具观赏价值的野生花卉--朝天罐的栽培技术,为发挥其园林价值,丰富我国的花卉种类,提高花卉市场竞争力打下基础。方法:采用温室栽培和露地坪栽试验进行研究,测定其生理生化指标。结果:盆栽情况下,最合适的基质为泥炭土+蛭石(2:1)和腐殖土+蛭石(2:1),地栽时,N:P:K=1.4:1.2:1的肥料配比较为理想,腐殖土对朝天罐试管苗的生长最为适合。年生长期内,朝天罐盆栽根系活力明显低于地栽。春季,盆栽与地栽朝天罐根系中淀粉含量下降,但盆栽根系中淀粉和可溶性糖均高于地栽朝天罐。秋季,盆栽朝天罐根系中淀粉和可溶性糖均低于地栽朝天罐。年生长期内,盆栽朝天罐根系中游离氨基酸含量始终高于地栽朝天罐,可溶性蛋白质含量始终低于地栽朝天罐。结论:在最佳培养条件下(泥炭土+蛭石(2:1)和腐殖土+蛭石(2:1)),盆栽朝天罐的成苗率达96%,露地坪栽也取的了较好的结果,完全可实现规模化发展。

朝天罐中总黄酮的提取工艺优选

目的:优选朝天罐中总黄酮的提取工艺。方法:采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,以总黄酮得率为指标,通过正交试验考察提取时间、乙醇体积分数及料液比对总黄酮提取工艺的影响。结果:最佳提取工艺为加20倍量75%乙醇提取3次,每次1 h,总黄酮得率1.83%。结论:该优选工艺简单可行,可推广使用,为朝天罐资源的充分利用提供了实验依据。

朝天罐总酚的小鼠急性毒性实验研究

目的:通过小鼠急性毒性实验,评价朝天罐总酚的安全性。方法:将20只小鼠(雌雄各半)随机分为给药组和对照组,每组各10只。给药组给予最大浓度(103.68 mg/ml)的朝天罐总酚混悬液灌胃,24 h内连续给药2次,每次0.4 ml/10 g;对照组灌胃等容量的0.9%氯化钠注射液。观察小鼠给药后的一般毒性症状、死亡情况及体质量,14d后观察脏器情况并计算小鼠脏器系数和最大给药剂量。结果:给药后2组小鼠均未出现中毒反应和死亡情况,脏器亦无明显异常。雌雄给药组体质量和脏器系数与对照组两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。小鼠最大给药量为8.29 g/kg,相当于人用剂量的513倍。结论:朝天罐总酚对小鼠无明显毒性作用,安全性较高,为其进一步开发应用提供了实验依据。