RANKL和OPG在胆脂瘤型中耳炎中的表达及其意义

目的检测破骨细胞分化因子(nuclearfactor-kappa Bligand,RANKL)和护骨素(osteoprotegerin,OPG)在胆脂瘤型中耳炎组织中的表达水平,并探讨RANKL和OPG在胆脂瘤型中耳炎骨质破坏机制中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化SP法检测RANKL和OPG在35例中耳胆脂瘤(中耳炎组)和17例正常外耳道皮肤(对照组)中的表达。结果RT-PCR检测示胆脂瘤型中耳炎组与正常对照组比较,RANKL的mRNA表达水平升高(t=4.315;P<0.05),OPG的mRNA表达水平无明显变化(t=0.578,P>0.05),RANKL与OPG的mRNA比值升高,差异均有统计学意义(t=6.127;P<0.05);免疫组化SP法检测显示RANKL在胆脂瘤组织中表达增高,主要在胆脂瘤周围浸润淋巴细胞胞浆中表达,与对照组的表达比较差异有统计学意义(t=7.758,P<0.05);OPG在胆脂瘤组织中表达无明显变化,与对照组比较差异无统计学意义(t=0.623,P>0.05)。OPG/RANKL在胆脂瘤组织中较对照组明显降低(t=8.183,P<0.05)。结论RANKL在中耳胆脂瘤周围组织中表达增高,OPG的表达降低,与骨质破坏吸收关系密切;OPG/RANKL的降低可能是中耳胆脂瘤骨质破坏的一个危险因素。

血清胰岛素样生长因子Ⅰ与健康妇女护骨素、RANKL以及骨量的关系

目的研究血清胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和健康女性护骨素(OPG)、核因子κB受体活化子配体(RANKL)、以及骨量之间的关系。方法504名健康女性参加本研究,采用双能X线骨密度仪测定腰椎和股骨颈骨密度,同时测定血清IGF-Ⅰ、OPG、RANKL水平。结果在健康妇女中,血清IGF-Ⅰ水平与年龄呈明显的负相关(r=-0.702,P<0.01),血清IGF-Ⅰ与OPG(r=-0.24,P<0.01)、OPG/RANKL比值(r=-0.15,P<0.01)呈明显的负相关,而与RANKL呈正相关(r=0.12,P<0.05)。校正年龄因素的影响后,IGF-Ⅰ与健康妇女骨密度之间不存在相关性。在绝经后妇女中,骨质疏松组的IGF-Ⅰ水平低于正常组(P=0.056),但OPG、RANKL和OPG/RANKL比值两组间无明显差异。在IGF-Ⅰ五分位组比较中,最高IGF-Ⅰ组的OPG明显低于最低IGF-Ⅰ组,RANKL则无明显差异,多元回归结果显示停经和血清IGF-Ⅰ水平是影响健康女性骨量变化的主要因素。结论血清IGF-Ⅰ水平与健康妇女骨密度之间的关系受年龄的影响,IGF-Ⅰ作为偶联因子在骨重建中的作用(骨吸收)可能是由OPG-RANKL系统介导的。

三碘甲酰原氨酸（T3）对内皮细胞凋亡的影响及护骨素干预研究

目的探讨护骨素对不同浓度三碘甲酰原氨酸（L）下人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及机制。方法将内皮细胞分组：对照组（0nmol／LT3）、低浓度组（0．1nmol／LT3）、生理浓度组（1nmol／LT，）和高浓度组（10nmoL／LL），护骨素干预48h后，Hoechst33258和流式细胞仪检测细胞凋亡情况；Western印迹分析各组细胞磷酸化NF．KB抑制蛋白激酶p（p-IKKl3）、NF．KB抑制蛋白激酶p（IKKl3）、磷酸化结节性硬化复合物2（p—TSC2）、结节性硬化复合物2（TSC2）、磷酸化核糖体蛋白S6激酶（p-S6K）、核糖体蛋白S6激酶（S6K）、磷酸化蛋白激酶B（p—AKT）、蛋白激酶B（AKT）、Bcl一2及Bax表达水平。结果（1）护骨素干预后的对照组、低浓度组、高浓度组细胞凋亡率低于未干预组（P〈0．05）；生理浓度组护骨素干预前后细胞凋亡率无明显差异（P〉0．05）。（2）与生理浓度组相比，对照组、低浓度组和高浓度组p-IKKl3、p-S6K、Bax表达显著增高（P〈0．05），p-TSC2、p-AKT、Bel-2表达显著降低（P〈0．05）；经护骨素干预后，对照组、低浓度组、高浓度组p-IKK[3、p-S6K、Bax低于未干预组（P〈0．05），而p-TSC2、p-AKT、Bel-2表达高于未干预组（P〈0．05）：生理浓度组护骨素干预前后上述各蛋白表达无明显差异（P〉0．05）。结论低、高浓度甲状腺激素激活IKK[3／mTOR信号通路引起内皮细胞凋亡，而护骨素抑制其IKKl3／mTOR活性，对内皮细胞具有保护作用。