补肾壮骨胶囊含药血清对大鼠成骨细胞增殖及骨保护素mRNA表达的影响

目的:观察补肾壮骨胶囊含药血清对SD大鼠成骨细胞(OB)增殖、骨保护素(OPG)mRNA表达的影响,探讨其防治骨质疏松的机理。方法:将40只3月龄SD雌性大鼠分为补肾壮骨胶囊灌胃组(高、中、低剂量)和空白对照组制备含药血清和空白对照血清;取1天龄SD大鼠颅盖骨,分离、培养成骨细胞(OB),分别加入各实验血清组培养液培养OB,倒置相差显微镜下观察OB生长情况,MTT法测定OB的OD值,RT-PCR检测各组成骨细胞OPGmRNA表达。结果:3-8天时,补肾壮骨胶囊高、中、低含药血清组成骨细胞OD值均高于空白对照组(P<0.05)。各含药血清组成骨细胞OPGmRNA表达均高于空白对照组(P<0.01);补肾壮骨胶囊高、中、低含药血清组间比较,差异无显著意义(P<0.05)。结论:补肾壮骨胶囊含药血清组能促进OB增殖、上调OPGmRNA表达,可能是其防治骨质疏松的机制之一。

特发性脊柱侧凸患者髂骨松质骨中Ⅰ型胶原、骨钙素和骨保护素等mRNA的表达

目的探讨青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)女性患者骨组织中I型胶原、骨钙素和骨保护素mRNA含量的变化与骨量减低之间的关系。方法43例AIS女性患者,年龄12～18岁。Cobb角范围40°～105°,平均50.3°±12.8°。将所有AIS患者分为两组:A组为骨量正常患者,B组为骨量减低患者。运用RT-PCR方法检测术中取髂骨松质骨块中I型胶原、骨钙素和骨保护素mRNA的表达。结果本组病例中骨量正常者(A组)29例,而骨量减低者(B组)14例(32.6%)。两组患者的生长发育相关资料等无显著性差异。两组患者间骨钙素和骨保护素mRNA的相对含量无显著性差异,而A组患者I型胶原mRNA的相对含量高于B组患者,但无统计学意义(F=1.761,P=0.196)。相关分析显示全部患者的I型胶原相对含量与BMD值之间呈较弱的正相关性,骨钙素和骨保护素与BMD值无显著相关性。结论本组病例AIS女性患者的松质骨中I型胶原、骨钙素和骨保护素等的mRNA表达量与骨量减低缺乏显著关联。不过,AIS女性患者的骨量减低与松质骨中I型胶原含量之间的关系难以排除。

“双固一通”针法对绝经后骨质疏松症模型大鼠骨组织骨保护蛋白mRNA表达水平的影响

目的：探讨“双固一通”针法治疗绝经后骨质疏松症（PMO）的可能作用机制。方法：采用60只9～10月龄雌性SD大鼠，切除双侧卵巢后饲养90d，造成实验性骨质疏松症动物模型，然后随机分成对照组、常规取穴组、“双固”组、“一通”组、“双固一通”组，每组12只。对照组不做任何治疗；常规取穴组取背俞穴“脾俞”“胃俞”“肾俞”“气海俞”；“双固”组取“关元”“足三里”；“一通”组取“肾俞”“膈俞”“大杼”；“双固一通”组取“关元”“足三里”“肾俞”“膈俞”“大杼”。电针连续治疗8周。利用RT—PCR技术检测骨保护蛋白（OPG）mRNA在骨组织细胞的分布。结果：与对照组比较，所有针刺组的OPGmRNA表达均升高（P〈0．05）．“双固一通”组表达非常显著升高（P〈0．01）；“双固一通”组较常规取穴组、“双固”组、“一通”组也明显升高（P〈0．05）；常规取穴组、“双固”组、“一通”组之间比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：针刺能够提高绝经后骨质疏松症模型大鼠骨组织的OPG mRNA表达水平，且“双固一通”针法优于其它取穴针法。

补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的影响

目的探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用。方法建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液(简称补肾方组),并以17β-雌二醇为阳性对照(简称E2组),以生理盐水为阴性对照(简称模型组)。12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨(L3-4)和左股骨测骨密度(BMD);取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素(OPG)的mRNA表达。计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察。结果补肾方组的IFN-γ水平较模型组明显升高(P<0.01),而IL-4水平低于模型组(P<0.05)。补肾方组与E2组小鼠的BMD均改善,骨小梁面积增加,OPG mRNA表达增加;但补肾方组小鼠的子宫明显小于E2组(P<0.05),与模型组比较差异无显著性。结论补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用。其机制可能与调节Th1/Th2的偏移及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关。

补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的选择性作用

目的:探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用。方法:建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液(简称补肾方),并以17β-雌二醇为阳性对照(简称E2组),以生理盐水为阴性对照(简称模型组)。12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨(L3-4)和左股骨测骨密度(BMD);取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素(OPG)的mR-NA表达。计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察。结果:补肾方组的IFNγ-水平较模型组明显升高(P<0.01);而IL-4水平低于模型组(P<0.05)。补肾方组与E2组均可改善小鼠的BMD,增加骨小梁面积,使OPG mRNA表达增加。补肾方组的子宫与模型组比较无显著性差异。结论:补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用。其机制与调节Th1/Th2的偏离及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关。

筋骨胶囊对骨质疏松大鼠骨髓细胞OPG和RANKL mRNA表达量的影响

目的:观察筋骨胶囊对骨质疏松大鼠骨髓细胞护骨素(OPG)和核因子kB受体活化子配体(RANKL)mRNA表达量的影响,从分子水平上进一步探讨筋骨胶囊治疗骨质疏松症的有效机制。方法:取健康6月龄雌性SD大鼠48只,采用摘除双侧卵巢去势方法造成大鼠骨质疏松模型,随机分为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(0.5mg/kg)、筋骨胶囊组(0.27g/kg)4组。用药12周后,处死所有大鼠,并取双侧股骨骨髓为标本,运用现代分子生物学RT-PCR技术,测量各大鼠骨髓基质细胞的OPG和RANKL mRNA表达量。结果:模型组OPG和RANKL mRNA表达量均明显高于假手术组(P<0.01);阿仑膦酸钠组OPG mRNA表达量与模型组对比差异无统计学意义(P>0.05),阿仑膦酸钠组RANKL mRNA表达量明显低于模型组(P<0.01);筋骨胶囊组OPG mRNA表达量明显高于模型组(P<0.01),筋骨胶囊组RANKL mRNA表达量明显低于模型组(P<0.01);筋骨胶囊组OPG mRNA表达量明显高于阿仑膦酸钠组(P<0.01),筋骨胶囊RANKL mRNA表达量与阿仑膦酸钠组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:筋骨胶囊能有效地上调OPG mRNA表达量,并抑制RANKL mRNA的表达,通过影响OPG/RANKL系统,抑制骨吸收,并促进骨形成,能有效地防治骨质疏松症。

夏枯草黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松的抑制作用

本研究通过干预去卵巢大鼠骨质疏松动物模型,探讨夏枯草黄酮对骨质疏松大鼠骨量、生物力学性能及骨代谢的影响。经夏枯草黄酮处理后,取血清检测血矿物质、护骨素(OPG)、碱性磷酸酶量(ALP)的含量变化,取各组股骨进行骨密度测定和骨组织形态检测,并用荧光定量PCR的方法检测Ⅰ型胶原、整合素β1与粘着斑激酶的mRNA表达。结果显示,夏枯草黄酮组ALP(3.03±0.22 IU/L)、破骨细胞数(0.23±0.05 1/mm2)、骨吸收周长百分数(14.94±5.12%)低于模型组(P<0.05),而OPG量(186.34±44.21pg/mL)、骨密度、骨小梁相对体积(26.11±5.32%)和厚度(587.16±165.01?m)与模型组相比则有所增加(P<0.05);表明夏枯草黄酮能够提升去卵巢大鼠的成骨细胞的功能,减缓骨吸收和骨代谢,促进骨形成,降低骨小梁损失,抑制骨量减少与骨强度降低,从而提升去卵巢大鼠的骨密度,最终对骨质疏松症起到了抑制作用。