OPG-RANKL-RANK轴介导P38 MAPK信号通路调控破骨细胞在糖尿病性骨质疏松症中的作用研究进展

糖尿病性骨质疏松症(DOP)是糖尿病在骨骼系统中最常见的慢性并发症。DOP起病隐匿,症状不典型,在疾病早期容易被忽视,致残率和致死率较高。已有研究发现OPG-RANKL-RANK轴是调节破骨细胞分化成熟和骨吸收的关键因子,可通过介导不同的信号通路调节骨代谢,如调控破骨细胞生成分化的P38 MAPK信号通路,因此,进一步研究了解OPG-RANKL-RANK轴与P38 MAPK信号通路的关系可为DOP的防治提供新思路。该文综述OPG-RANKL-RANK轴介导P38 MAPK信号通路调控破骨细胞在DOP中的作用机制,为临床治疗DOP提供新的研究方向。

红景天苷调节OPG/RANKL通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征大鼠骨质流失的影响

目的探究红景天苷(Sal)调节骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体激活剂配体(receptor activator of nuclear factorKB ligand,RANKL)通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)大鼠骨质流失的影响。方法将大鼠随机分为control组、OSAS组、Sal-L、Sal-M、Sal-H组(分别灌胃Sal 17.5、35、70 mg/kg),每组12只。除control组,其余组均采用缺氧和复氧循环复制OSAS大鼠模型。分别利用骨密度仪、三点弯曲实验、Micro CT测定大鼠股骨骨密度、生物力学及微结构变化;ELISA法检测血清骨钙素(osteocalcin,BGP)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(cross linked C-telopeptide of type I collagen,CTX-I)水平;RT-PCR检测股骨中OPG、RANKL mRNA水平;Western blot检测股骨OPG/RANKL通路蛋白表达。结果与control组比较,OSAS组大鼠骨密度、最大强度、最大负荷、骨小梁骨体积分数(Tb.BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、BGP、ALP、OPG mRNA及蛋白表达、OPG/RANKL比值降低,CTX-I、RANKL mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与OSAS组比较,Sal-L、Sal-M、Sal-H组大鼠骨密度、最大强度、最大负荷、Tb.BV/TV、Tb.N、Tb.Th以及BGP、ALP、OPG mRNA和蛋白表达、OPG/RANKL比值依次升高,CTX-I、RANKL mRNA及蛋白表达依次降低,其中Sal-H组上述变化最为显著(P<0.05)。结论Sal通过升高OPG表达,降低RANKL表达,促进骨形成,抑制骨吸收,从而减少OSAS大鼠骨质流失。

骨质疏松环境下骨髓间充质干细胞外泌体通过OPG/RANKL调控破骨分化

目的:绝经后骨质疏松PMOP(postmenopause osteoporosis)是一种慢性炎症性疾病,破骨细胞的异常活化是发病的重要原因之一。病理环境下骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)外泌体对破骨细胞的作用及影响尚不明确。本研究分析了PMOP环境下,BMSCs外泌体(exosome,Exo)对破骨细胞分化的调控作用,对于明确骨质疏松的发病机制具有至关重要的意义。方法:分别从正常和绝经后骨质疏松患者骨髓中提取BMSCs,通过超速离心联合Exoquick试剂盒分别提取两种细胞的Exo,即正常BMSCs外泌体(healthyExo,H-Exo)和绝经后骨质疏松骨髓间充质干细胞外泌体(postmenopause osteoporosis-Exo,P-Exo),并通过透射电子显微镜(TEM),纳米颗粒示踪分析技术(NTA)、Western blot对分离的外泌体进行鉴定;两种不同的外泌体被引入RAW264.7细胞中,以便通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blot分析和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色来评估RAW264.7细胞中破骨分化相关指标的表达。同时,使用Western blot和ELISA方法来测定这两种外泌体中OPG/RANKL蛋白的表达水平。实验数据通过SPSS 24.0软件进行统计分析。结果:对提取后的两种外泌体进行形态学比较发现,与H-Exo相比,P-Exo直径更大,P-Exo能够促进RAW264.7细胞破骨分化标志性基因NFATC1和Trap mRNA及蛋白的表达,Trap染色可见分化的破骨细胞,Western blot及ELISA检测两种外泌体OPG/RANKL的表达发现,与H-Exo相比,P-Exo内OPG的表达量下降,而RANKL表达量升高。结论:绝经后骨质疏松中骨吸收增加,可能是炎症微环境下,BMSCs外泌体通过传递RANKL,促进破骨细胞分化引起的。此项研究为深入研究骨质疏松病因的开辟了新的途径,并为骨质疏松的治疗提供了新的治疗靶点。

OPG/RANKL/RANK信号通路在脓毒症相关急性肾损伤小鼠中的研究

目的:探讨骨保护素(OPG)/核因子⁃κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子⁃κB受体激活因子(RANK)信号通路因子在脓毒症相关急性肾损伤(SA⁃AKI)小鼠中的改变及可能的作用,为SA⁃AKI的机制研究探索新的思路。方法:通过盲肠结扎穿孔手术(CLP)建立SA⁃AKI模型组(CLP组),对照组为假手术组(Sham组),只行开腹不做盲肠结扎穿孔操作。术后24 h采血并处死留取小鼠肾脏组织,用试剂盒检测血清Scr、BUN水平,酶联免疫测定法(ELISA)检验血清中IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平,苏木精⁃伊红染色(HE)观测肾组织病理学变化,聚合酶链反应(RT⁃qPCR)和蛋白质印迹实验(Western blotting)检验小鼠肾组织中OPG、RANKL、RANK的mRNA和蛋白水平。结果:与Sham组对比,CLP组Scr、BUN、IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组对比,CLP组肾小球充血水肿,部分缺血皱缩,球囊间隙扩大,部分肾小管中可见坏死的上皮细胞,管腔扩大,肾间质水肿,少量炎性细胞浸润;与Sham组相比较,CLP组肾组织中OPG和RANK的mRNA表达显著上调,而RANKL的mRNA表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组相比较,CLP组肾脏组织中OPG及RANK的蛋白表达均升高,而RANKL的蛋白表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在脓毒症的小鼠模型中OPG及RANK表达升高,RANKL表达下降,表明OPG/RANKL/RANK信号通路可能参与了SA⁃AKI的病理生理过程。

超前镇痛方案对跟骨关节内骨折患者OPG/RANKL信号通路因子表达的影响

目的 探讨跟骨关节内骨折患者采用超前镇痛方案对骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路因子表达的影响。方法 回顾性选取2017年2月至2022年2月大庆油田总医院收治的跟骨关节内骨折患者100例,依据镇痛方案不同分为对照组和观察组,每组各50例。对照组患者接受常规性静脉自控镇痛方案,观察组患者接受地佐辛超前镇痛联合常规性静脉自控镇痛方案。统计分析两组围手术期指标(术中出血量、手术时间、术后引流量、术后引流时间、住院时间),麻醉前、手术前、手术后即刻的血流动力学(平均动脉压、心率),手术前、手术后1 d的应激反应[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)],手术后即刻,手术后6 h、12 h、1 d的镇静[Ramsay镇静评分(RSS)、视觉模拟评分法(VAS)评分]和镇痛效果,以及手术后1 d、手术后1周的血清OPG、RANKL含量和术后并发症发生情况。结果 两组患者的术中出血量、手术时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者的术后引流量为(59.86±2.54) mL,少于对照组[(110.97±9.41) mL],术后引流时间、住院时间分别为(123.23±9.82) h、(5.61±0.45) d,均短于对照组[(178.22±9.32) h、(8.01±0.31) d],差异均有统计学意义(P<0.05)。麻醉前、手术前、手术后即刻,两组患者的平均动脉压、心率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。手术后1 d,两组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2水平均明显高于手术前,观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2水平分别为(5.11±1.47) mg/L、(43.15±7.51)μg/L、(32.52±5.31) ng/L、(138.11±12.68) pg/mL,均明显低于对照组[(21.42±3.44) mg/L、(87.60±13.56)μg/L、(75.77±21.35) ng/L、(144.60±15.20) pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。与手术后即刻比较,两组患者手术后6、12、24 h的RSS评分、VAS评分均逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05);手术后6、12、24 h,两组患者的RSS评分、VAS评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。手术后1周,两组患者的血清OPG、RANKL含量均高于手术后1 d,且观察组患者的血清OPG、RANKL含量分别为(188.86±21.47)、(108.37±10.43) pg/mL,均高于对照组[(177.75±19.23)、(98.76±8.26) pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的术后并发症发生率为8.00%,明显低于对照组(32.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 超前镇痛方案能够促进跟骨关节内骨折患者OPG/RANKL信号通路因子表达及患者术后康复,提高镇痛效果,减少术后并发症的发生。

2型糖尿病合并骨质疏松症患者循环miR-146a表达及其与RANKL/RANK/OPG的相关性

目的:本研究旨在探讨循环miR-146a-5p在2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)合并骨质疏松症(OP)患者中的表达及其诊断价值,并探讨其与RANKL/RANK/OPG的相关性。方法:本研究于2021年12月至2023年2月期间从医院招募了84例T2DM男性患者(伴有OP 54例,无OP 30例),采用qRT-PCR法测量血浆中miR-146a的表达水平,采用ELISA法测量血浆中OPG和sRANKL的表达水平。结果:T2DM合并OP组的miR-146a和OPG血浆水平明显降低,而sRANKL水平显著高于T2DM组。单因素logistic回归分析显示,体质指数、糖尿病病程、C肽、miR-146a、sRANKL和OPG都是T2DM患者发生OP的影响因素。多因素二元logistic回归分析显示,只有miR-146a是T2DM合并OP的独立影响因素。miR-146a与OPG的表达水平呈正相关(r=0.4733),与sRANKL的表达水平呈负相关(r=-0.4518)。miR-146a(AUC=0.920)、sRANKL(AUC=0.870)和OPG(AUC=0.841)的ROC曲线分析显示,它们在T2DM患者的OP诊断中具有良好的诊断效能。结论:T2DM合并OP患者血浆中miR-146a表达降低。miR-146a在T2DM合并OP的诊断中的诊断效能、敏感性和准确性均优于sRANKL和OPG,可作为T2DM合并OP的生物学诊断标志物。

基于AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路研究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠愈合的机制

目的基于AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路,探究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的机制。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组(6.25 g/kg)、补阳还五汤中剂量组(12.50 g/kg)和补阳还五汤高剂量组(25.00 g/kg)。除假手术组外,其余组均构建骨质疏松性骨折模型,并给予相应剂量药物干预。检测大鼠骨密度(BMD)值、骨折愈合评分及骨痂体积;自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素、钙和磷水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨组织中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠骨痂组织的病理形态;Western印迹检测股骨组织中AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组骨痂骨小梁分布稀疏,成骨细胞大量减少且有纤维组织生成,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著升高(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,补阳还五汤低、中、高剂量组骨痂骨小梁分布较为密集,成骨细胞增加,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著降低(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可能通过抑制氧化应激反应,调节AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路,发挥对骨质疏松骨折大鼠的治疗作用。

OPG/RANKL/RANK信号通路与泛髓系统关系概述

“泛髓”是对中医学“髓”概念丰富外延的概括,包括脑髓、脊髓、骨髓、精髓。在“泛髓”关系中,脑髓为之主,精髓为其重要组成部分,脑髓病变可波及精髓,精髓病变也可影响脑髓。骨保护素信号通路可在全身多个系统、器官中表达,是调节骨代谢的重要信号通路,在调控骨吸收以维持骨量方面发挥不可替代的作用。该信号通路与“泛髓”系统中脑髓及精髓的关系最为紧密,其在脑血管病、骨质疏松症、牙周炎等多种“髓”相关疾病进展过程中起到一定调控作用。多种细胞因子可以通过调节骨保护素信号系统的表达,参与脑髓与精髓病变的相关炎症反应。骨保护素信号系统对钙离子代谢的调节或许是机体精髓代谢的途径之一。参考文献48篇。

脱氢胆酸调控OPG/RANK和TRAF3抑制破骨细胞分化

目的探讨脱氢胆酸(dehydrocholic acid,DHCA)对破骨细胞(osteoclasts,OCs)分化及功能的影响。方法采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B(NF-κB)-ligand,RANKL)诱导成熟骨髓来源的巨噬细胞分化为OCs。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP/ACP5)染色,确定DHCA抑制OCs形成的最佳浓度。qRT-PCR检测OCs分化和功能相关基因TRAP/ACP5、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的基因表达。Western blot检测OCs中TNF受体相关因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)、NF-κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的蛋白水平。结果DHCA浓度为200μmol/L是抑制OCs形成的最佳剂量(P<0.01)。DHCA抑制OCs分化和功能相关基因ACP5、CTSK和MMP9的表达(P<0.01)。DHCA通过下调RANK蛋白和增加TRAF3和OPG蛋白的表达来抑制OCs的分化(P<0.01)。结论DHCA通过调控OPG/RANK和TRAF3抑制OCs分化,这可能是一种有效的骨质疏松前体药物。

脂联素调节循环RANKL/OPG治疗糖尿病性骨质疏松的实验研究

目的探讨脂联素对外周循环RANKL/OPG的调节作用,及对糖尿病性骨质疏松的治疗作用。方法使用高脂饮食联合链脲佐霉素构建糖尿病性骨质疏松模型小鼠,使用脂联素治疗,使用阿仑膦酸钠治疗作为阳性对照。分组为:对照组、模型组、治疗组、阳性对照组。完成干预后,测量小鼠体重,收集小鼠静脉血并检测空腹血糖水平、葡萄糖耐量试验、血清RANKL/OPG。分别从各组小鼠股骨提取原代骨髓间充质干细胞,诱导成骨分化并茜素红染色,检测Opg、Rankl基因的表达量。获得小鼠腰3椎体,检测各组小鼠骨微细结构变化。结果脂联素治疗后,与模型组相比,治疗组体重明显下降,空腹血糖水平明显下降,葡萄糖耐量试验明显接近正常水平,血清OPG水平上升,血清RANKL水平下降,血清RANKL/OPG下降。与对照组相比,模型组骨髓间充质干细胞成骨能力明显减弱,显著上调RANKL/OPG;与模型组相比,治疗组骨髓间充质干细胞成骨分化能力明显增强,显著下调RANKL/OPG。脂联素治疗后能显著提高单位长度成骨细胞数量、骨小梁面积百分数、骨小梁厚度。结论脂联素能够降低糖尿病小鼠体重,降低空腹血糖,部分恢复机体的血糖调节能力,促进Opg基因的表达,抑制Rankl基因的表达,促进骨髓间充质干细胞成骨分化,改善骨微细结构,是一种潜在的治疗糖尿病性骨质疏松的选择。

基于RANKL/RANK/OPG信号轴探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用

目的观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用,并从核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子/骨保护素(RANKL/RANK/OPG)信号轴探讨其作用机制。方法采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙复制激素性股骨头缺血坏死(SONFH)动物模型,经核磁共振鉴定后,将模型复制成功的60只小鼠分成模型(MC)组、骨痹通消颗粒(GBTX)组及通络生骨胶囊(PC)组,每组20只,另设12只正常小鼠作为空白对照(NC)组。分别予以对应组灌胃相应药物12周后麻醉状态下取材,观察各组小鼠治疗前后的一般行为;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠的骨碱性磷酸酶(BALP)和I型氨基端延长肽(PINP)含量;Western blotting和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)检测各组RANK、RANKL、OPG、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cγ2(PLCγ2)、组织蛋白酶K(CTSK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的蛋白和基因表达。结果核磁共振显示,模型复制成功后的小鼠左侧髋部呈高信号状态。与NC组比较,MC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均降低(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05);与MC组比较,GBTX组和PC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均下降(P<0.05);与GBTX组比较,PC组OPG、RANK、RANKL、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量,以及PLCγ2蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05),而PC组PLCγ2基因相对表达量较GBTX组下降(P<0.05)。结论骨痹通消颗粒可能通过上调OPG表达,抑制RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK和TRAP表达,从而改善股骨头坏死情况。

基于OPG/RANKL/RANK信号通路探讨傣药肾叶山蚂蝗的抗骨质疏松作用

目的探讨傣药肾叶山蚂蝗对去卵巢骨质疏松大鼠模型的作用及其机制。方法60只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、仙灵骨葆组(0.24 g·kg^(-1))、肾叶山蚂蝗低(1.35 g·kg^(-1))、中(2.70 g·kg^(-1))和高剂量组(5.40 g·kg^(-1))。采用双侧卵巢切除术建立骨质疏松模型,药物干预14周后,检测血清中骨钙素(Bone gamma-carboxyglutamic-acid-containing Proteins,BGP)、骨保护素(Ostoeprotegerin,OPG)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)的含量,苏木精-伊红(HE)染色法观察骨组织中骨小梁的变化;实时荧光定量PCR(qPCR)检测大鼠胫骨中OPG/RANKL/RANK信号通路相关基因的表达。另取破骨细胞前体细胞株RAW264.7,分为阴性对照组、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)组、仙灵骨葆组、肾叶山蚂蝗低、中、高剂量组。阴性对照组不加RANKL,其余各组使用50 ng·mL^(-1) RANKL诱导,药物组同时分别加入不同浓度的仙灵骨葆和肾叶山蚂蝗含药血清进行干预。10天后进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,观察破骨细胞分化情况,qPCR测定OPG/RANKL/RANK信号通路相关基因的表达。结果与假手术组比较,模型组血清中OPG含量显著降低(P<0.01),ALP和BGP显著升高(P<0.01),骨小梁显著减少,断裂,排列稀疏,骨小梁之间间距大,胫骨组织OPG mRNA表达显著减少(P<0.01),RANKL、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)、活化T-细胞核因子1(NFATc1)、组织蛋白酶K(CTK)和降钙素受体(CalcR)mRNA水平的表达升高(P<0.01),肾叶山蚂蝗干预后能显著改善以上指标。RAW264.7培养10天后,与阴性对照组比较,RANKL组破骨细胞明显增多,肾叶山蚂蝗能显著降低破骨细胞的数量,OPG/RANKL/RANK通路相关基因表达趋势和动物实验一致。结论肾叶山蚂蝗能有效改善去卵巢大鼠模型的骨质疏松,其作用机制可能是通过抑制破骨细胞增殖分化,调节OPG/RANKL/RANK信号通路来实现。

血清骨硬化蛋白、OPG、OPG/TRAIL比值对高血压伴慢性心力衰竭患者发生主要不良心血管事件的预测价值

目的探讨血清骨硬化蛋白、骨保护素(OPG)/肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)比值对高血压伴慢性心力衰竭(CHF)患者发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选取2019年10月至2022年10月于该院就诊的134例高血压伴CHF患者作为研究对象,根据患者治疗1年内是否发生MACE将其分为MACE组(46例)和无MACE组(88例)。另选取同期于该院进行体检的74例健康者作为对照组。采用酶联免疫吸附实验检测3组血清骨硬化蛋白、OPG和TRAIL水平。收集所有患者的临床资料(包括冠心病史、糖尿病史、收缩压、舒张压)。检测3组血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-10水平。采用Pearson相关分析高血压伴CHF患者血清骨硬化蛋白、OPG和TRAIL水平与相关实验室指标水平的关系。采用多因素Logistic回归分析高血压伴CHF患者发生MACE的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清骨硬化蛋白、OPG/TRAIL比值单独及2项指标联合检测对MACE的预测价值。结果无MACE组和MACE组血清骨硬化蛋白、OPG水平及OPG/TRAIL比值均明显高于对照组,TRAIL水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MACE组血清骨硬化蛋白、OPG水平及OPG/TRAIL比值均明显高于无MACE组,TRAIL水平明显低于无MACE组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MACE组TNF-α、IL-10、IL-6水平均高于无MACE组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MACE组和无MACE组冠心病史和糖尿病史患者比例、收缩压、舒张压以及TC、TG、HDL-C、LDL-C水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。高血压伴CHF患者血清骨硬化蛋白、OPG水平与TNF-α、IL-10、IL-6水平均呈正相关(P<0.05),TRAIL水平与TNF-α、IL-10、IL-6水平均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,骨硬化蛋白水平升高、OPG水平升高均为高血压伴CHF患者发生MACE的危险因素(P<0.05),而TRAIL水平升高为高血压伴CHF患者发生MACE的保护因素(P<0.05)。血清骨硬化蛋白、OPG/TRAIL比值单独及2项指标联合检测预测高血压伴CHF患者发生MACE的曲线下面积(AUC)分别为0.847、0.803、0.927,且2项指标联合检测的AUC优于血清骨硬化蛋白、OPG/TRAIL比值单独检测的AUC(Z=2.350、2.824,P<0.05)。结论高血压伴CHF患者血清骨硬化蛋白、OPG/TRAIL比值联合检测患者预后发生MACE的预测价值较高。

miR-34a-5p、OPG、RANK、RANKL在肌少-骨质疏松症患者中的作用机制研究

探究miR-34a-5p和OPG/RANK/RANKL在肌少症及骨质疏松中的作用与机制。方法 选取80名患者分为2组,实验组44人肌少-骨质疏松症患者,对照组36人为仅患有骨质疏松症患者。检测血清OPG、RANK、RANKL表达及miR-34a基因含量,采用Excel 2019和SPSS 25.0软件进行数据整理和统计学分析。结果 (1)80名患者中,男性30名,女性50名,性别x2=1.458,年龄年龄x2=-1.225,骨质疏松分为骨质疏松和严重骨质疏松症,骨质疏松症患者p<0.05。(2)实验组和对照组中miR-34a均表达上调,但差异无统计学意义。(3)实验组中miR-34a与OPG、RANK、RANKL表达均有差异,与OPG成正相关,与RANKL成负相关。(4)对照组中miR-34a与OPG、RANK、RANKL表达均有差异,与OPG成正相关,与RANKL成负相关。(5)OPG在对照组中表达上调,RANKL在实验组中表达增加,RANK在两组中表达有差异。结论 (1)miR-34a可能不占主导地位,不能影响肌少症发生,但可通过OPG/RANK/RANKL信号通路影响骨质疏松症。(2)OPG/RANK/RANKL信号通路参与调节骨质疏松症及肌少症罹患过程。

口腔正畸联合牙周夹板治疗对牙周病致前牙移位患者龈沟液RANKL、OPG和弹性蛋白酶及其抑制因子的影响

目的观察口腔正畸联合牙周夹板治疗对牙周病致前牙移位患者龈沟液核因子-κB活化因子受体配体(RANKL)、骨保护素(OPG)和弹性蛋白酶(EA)及其抑制因子α_(1)-抗胰蛋白酶(α_(1)-AT)的影响。方法纳入2022年1月至2023年3月南京大学医学院附属口腔医院收治的105例牙周病致前牙移位患者作为研究对象,采用简单随机分组法将其为联合组(53例,口腔正畸联合牙周夹板治疗)和对照组(52例,牙周夹板治疗)。比较治疗前后两组牙周指标[附着丧失(AL)、龈沟出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)、探诊深度(PD)]、RANKL、OPG、RANKL/OPG、EA、α_(1)-AT水平及牙齿舒适度调查量表评分、咀嚼功能量表评分。结果治疗后,两组AL、SBI、PLI、PD低于治疗前,且联合组AL、SBI、PLI、PD低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组RANKL水平、RANKL/OPG低于治疗前,OPG水平高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05);且治疗后联合组RANKL水平、RANKL/OPG低于对照组,OPG水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组牙齿舒适度、咀嚼功能量表评分高于治疗前,且联合组牙齿舒适度、咀嚼功能量表评分高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组EA、α_(1)-AT水平低于治疗前,且联合组EA、α_(1)-AT水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论牙周夹板联合口腔正畸治疗牙周病致前牙移位患者可有效改善牙周症状,提高咀嚼功能,有效调节龈沟液RANKL、OPG、EA、α_(1)-AT水平。

基于OPG/RANKL及Notch1信号通路探讨温针灸对膝骨性关节炎兔软骨下骨损伤的影响

目的:观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔软骨下骨的骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化子配体(RANKL)及Notch1信号通路的影响,探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取新西兰雌雄兔共50只(6个月),随机分为空白组、模型组、药物组和温针灸组。采用管型石膏伸直位固定法建立兔KOA模型。经6周实验干预后采用HE染色观察各组软骨下骨形态结构,蛋白质印迹法检测OPG、RANKL及Notch1蛋白表达,实时荧光定量PCR检测各组软骨下骨中OPG、RANKL及Notch1 mRNA含量。结果:与模型组比较,药物组和温针灸组软骨表面相对光滑完整,结构较为清晰,软骨下骨处细胞分布较为整齐均匀。与空白组比较,模型组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,药物组和温针灸组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG mRNA、OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1比值均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。温针灸组Lequesne MG评分及Mankin评分均明显低于药物组,差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1水平均高于药物组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:温针灸可促进OPG表达,抑制RANKL及Notch1表达,通过调控OPG/RANKL及Notch1信号通路,减轻KOA兔软骨下骨的损伤,从而起到治疗KOA的作用。

超声多参数成像技术联合血清OPG、RANKL水平检测及骨密度评估在冻结肩患者骨代谢状态分析中的应用价值

目的通过超声多参数成像联合血清OPG、RANKL水平检测及骨密度评估,综合探讨冻结肩患者的骨代谢状态。方法选取2022年1月至2024年1月于宝鸡高新医院就诊的124例冻结肩患者作为研究对象。根据骨密度测定结果分为三组,A组(骨量正常组,n=37):T值≥-1.0、B组(骨量减少组,n=51):T值在-2.5至-1.0之间;C组(骨质疏松组,n=36):T值≤-2.5。另选取同期于本院体检的61名健康者作为对照组。比较四组一般资料、超声多参数成像、血清OPG、RANKL及T值,采用ROC曲线分析超声多参数成像联合血清OPG、RANKL及T值评估冻结肩患者骨代谢状态的价值。结果四组性别、年龄、BMI、WHR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肌肉厚度、肌腱厚度、血流速度、T值比较:对照组>A组>B组>C组,差异有统计学意义(P<0.05);关节囊厚度、RI、血清OPG、RANKL比较:对照组<A组<B组<C组,差异有统计学意义(P<0.05)。超声多参数成像联合血清OPG、RANKL及T值评估冻结肩患者骨代谢状态的AUC(95%CI)、敏感度及特异度分别为0.905、87.66%及90.17%,均显著高于超声多参数成像、血清OPG、RANKL及T值单一检测(P<0.05)。结论超声多参数成像联合血清OPG、RANKL及骨密度评估冻结肩患者骨代谢状态具有较高的应用价值,能够提高诊断的准确性和敏感性,为临床医生提供更全面的患者信息,有助于制定更加个性化和精准的治疗方案。

慢阻肺合并骨质疏松患者血清IL-31、IL-33水平与OPG/RANK/RANKL系统相关性研究

目的 探讨血清白细胞介素31(IL-31)、白细胞介素33(IL-33)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并骨质疏松患者中的表达情况及与骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子(RANK)/RANK配体(RANKL)系统的关联性。方法 收集2019年6月~2023年1月于惠州市第一人民医院就诊的男性稳定期COPD患者90例为COPD组,并纳入同期健康体检者45例为对照组。COPD组患者根据骨密度检测结果,分为非骨质疏松组(n=49)和骨质疏松组(n=41)。测定病例组、对照组入组当天血清IL-31、IL-33、OPG及RANKL水平。结果 (1)相比正常对照组,COPD组患者血清IL-31、RANKL水平及RANKL/OPG比值明显升高,而血清IL-33水平明显下降(均P<0.05);(2)与COPD非骨质疏松组患者相比,骨质疏松组血清IL-31、RANKL水平及RANKL/OPG比值显著升高,而血清IL-33水平、体重指数(BMI)、骨密度及FEV_(1)(%)、FEV_(1)/FVC(%)明显降低(均P<0.05);(3) COPD患者骨密度与血清IL-33水平、BMI、FEV_(1)%呈正相关,而与RANKL/OPG比值及血清IL-31、RANKL水平呈负相关。血清IL-31与RANKL水平、RANKL/OPG比值呈正相关。血清IL-33水平与RANKL水平、RANKL/OPG比值呈负相关(均P<0.05)。结论 IL-31在COPD骨质疏松症中表达升高,而IL-33表达下降,提示IL-31为COPD骨质疏松症的可能危险因素,而IL-33为可能保护因素。

骨痿愈方通过调节OPG/RANKL治疗绝经后骨质疏松的动物实验及机制研究

目的通过动物实验探究骨痿愈方治疗绝经后骨质疏松的有效性及其作用机制。方法将40只12周龄无特定病原体(specific-pathogen Free,SPF)级雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(OVX)、对照组(AS)、骨痿愈方组(GWY)。构建去卵巢骨质疏松症模型,骨痿愈方组予以骨痿愈方浓缩液灌胃;对照组予以阿仑膦酸钠灌胃;假手术组和模型组予以生理盐水灌胃。8周后处死动物,检测各组血清中钙、磷及骨源性碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)、OPG、RANKL含量;Micro-CT检测各组L3椎体以评估骨密度变化。结果①血清检测:4组中Ca、P、BALP、OPG、RANKL及OPG/RANKL差异均具有统计学意义(P<0.05)。与Sham组比较,OVX组、AS组和GWY组Ca、P、BALP降低(P<0.05),OVX组OPG降低(P<0.05),RANKL升高(P<0.05),OPG/RANKL降低(P<0.05);与OVX组比较,AS组和GWY组Ca、P、BALP增加(P<0.05),AS组和GWY组OPG升高(P<0.05),RANKL降低(P<0.05),OPG/RANKL升高(P<0.05);②骨密度:各组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N、Tb.Sp差异均具有统计学意义(P<0.05)。与Sham组相比,AS组、GWY组腰椎BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著降低(P<0.05),Tb.Sp提高(P<0.05)。与OVX组相比较,GWY组、AS组腰椎BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N增加(P<0.05),Tb.Sp下降(P<0.05)。结论骨痿愈方可通过调控OPG/RANKL信号通路治疗绝经后骨质疏松。

唑来膦酸对慢性阻塞性肺疾病患者骨质疏松症的临床疗效及对OPG/RANK/RANKL系统的影响

目的 探讨唑来膦酸对慢性阻塞性肺疾病患者骨质疏松症的临床疗效及对OPG/RANK/RANKL系统的影响。方法 选取2019年5月~2022年9月在本院就诊的慢性阻塞性肺疾病合并骨质疏松症患者86例,在慢阻肺规范化治疗基础上,予以钙尔奇D,同时采用静脉注射的方式予以唑来膦酸注射液。统计患者治疗前后视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评分、骨密度、肺功能、骨代谢指标及相关性分析骨代谢指标关系。结果 治疗后VAS评分显著低于治疗前,腰椎BMD、股骨颈BMD均显著高于治疗前,差异均具有统计学意义(t=57.527,P<0.001;t=3.039,P=0.004;t=8.012,P<0.001)。治疗后肺功能FEV1、FEV1/FVC均优于治疗前,差异具有统计学意义(t=3.009,P=0.004;t=2.321,P=0.025)。治疗后骨代谢指标RANKL、RANKL/OPG、PINP、S-CTX、血磷均低于治疗前,差异均具有统计学意义(P<0.05),治疗前后OPG、血钙水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,OPG均与PINP、S-CTX呈负相关,但无显著差异(P>0.05),RANKL、RANKL/OPG均与PINP呈正相关,但无显著差异(P>0.05),但与S-CTX呈正相关,具有统计学意义(P<0.05)。结论 唑来膦酸用于治疗慢性阻塞性肺疾病合并骨质疏松症患者,可改善患者骨代谢,提高骨密度,其治疗机制与介导OPG/RANK/RANKL系统有关。