巴豆生物碱抑制卵巢癌细胞增殖和诱导其凋亡的实验研究

目的了解巴豆生物碱诱导人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期、凋亡效果,以及凋亡与增殖细胞核抗原(PCNA)表达之间的关系。方法将浓度分别为50、100和150μg/ml的巴豆生物碱作用于人卵巢癌细胞HO-8910细胞后,采用流式细胞术检测巴豆生物碱对人卵巢癌细胞HO-8910细胞的增殖抑制作用和诱导细胞凋亡;采用倒置显微镜及免疫组织化学法对凋亡调节基因PCNA表达进行检测。结果巴豆生物碱作用48h后,倒置显微镜下可见细胞皱缩、出芽及少量凋亡小体形成。应用不同剂量的巴豆生物碱(50～150μg/ml)分别作用于HO-8910细胞24、48、72h后,巴豆生物碱抑制了HO-8910细胞增殖,并呈现剂量、时间依赖性。随着巴豆生物碱的作用时间延长,G0/G1期细胞比例明显下降,而较多的细胞阻滞于G2/M期。巴豆生物碱的作用浓度从50μg/ml增至150μg/ml,则平均细胞凋亡率从2.13%上升为21.89%。结论巴豆生物碱可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞G2/M期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡。由于PCNA在G1～S期进程过度中起着重要作用,PCNA表达的下调也导致细胞周期进程被阻抑。巴豆生物碱作用24h,随浓度的升高,PCNA阳性细胞百分率逐渐降低。