活血及活血解毒配伍中药对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤的影响

目的:观察活血及活血解毒配伍中药含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤模型细胞活力、内皮损伤、炎性反应的影响。方法:大鼠32只,随机分为4组:空白对照组、活血组、解毒组和活血解毒组。活血组、解毒组和活血解毒组大鼠分别按芎芍胶囊0.135g/kg,黄连胶囊0.135g/kg、芎芍胶囊和黄连胶囊各0.135g/kg的剂量给药,空白对照组予等体积蒸馏水作对照,每日1次,连续7d,末次给药后1h,采血制备含药血清。以ox-LDL为刺激物,造成HUVECs细胞损伤模型。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活数,酶联免疫法(ELISA)观察乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,比色法检测一氧化氮(NO)含量,ELISA法观察细胞上清液相关因子内皮素-1(ET-1)、白介素-1β(IL-1β),E选择素(E-selectin)和细胞黏附分子-1(ICAM-1)的含量,Western Blot法观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组ox-LDL损伤细胞出现大规模凋亡,LDH漏出增多,炎症及内皮损伤因子含量上调(P<0.01),显示了明显的氧化损伤迹象。与模型组比较,活血中药、解毒中药及活血解毒配伍含药血清均能有效显著提高细胞存活率(P<0.01),显著减少LDH漏出率(P<0.05),在细胞培养上清液中,各含药血清组细胞的NO水平显著提高(P<0.05),ET-1、IL-1β、E-selectin和ICAM-1含量显著下降(P<0.05,P<0.01),iNOS蛋白表达显著减少(P<0.05,P<0.01)。与活血组、解毒组比较,活血解毒含组细胞相关炎性因子表达有进一步降低的趋势(P<0.05)。结论:活血解毒配伍含药血清能够明显减轻ox-LDL诱导HUVECs氧化应激损伤,减少炎性因子生成,推测其有效改善动脉粥样硬化导致的内皮损伤的作用与减轻氧化应激、炎性反应和抑制iNOS蛋白合成有关。