HPLC法测定对甲苯磺酸中同分异构体

建立了对甲苯磺酸中同分异构体含量检测的高效液相色谱法,采用Phenomenex Kinetex Biphenyl(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱(联苯柱);以pH 2.3磷酸盐缓冲液(0.05 mol/L的磷酸二氢钾溶液,用稀磷酸调节pH值至2.3)-甲醇(95:5)为流动相,等度洗脱;柱温为30℃;流速为0.8 mL/min;检测波长设置为210 nm;进样体积为5μL。采用主成分对照品法对两个异构体杂质进行含量计算,主峰与各异构体杂质峰间分离良好;定量限均不超过0.089μg/mL;邻甲苯磺酸0.089~2.543μg/mL范围内呈良好线性关系(r=10000);间甲苯磺酸在0.088~2.516μg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.9999);重复性和中间精密度检出异构体含量RSD值均小于5.0%;加标样品平均回收率(n=9)为98.76%和100.4%;微小改变流速和柱温等色谱条件,对检测结果均无影响。实验结果表明该方法专属性强、准确度高、操作简单、重复性和耐用性好,可作为对甲苯磺酸中同分异构体的控制。

HPLC法同时测定依巴斯汀口服溶液中抑菌剂及其降解产物

目的:建立同时测定依巴斯汀口服溶液中羟苯甲酯钠、羟苯丙酯钠两种抑菌剂及其降解产物对羟基苯甲酸含量的HPLC法。方法:色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm*4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-1%冰醋酸溶液(58:42),流速:1.0 mL/min,柱温:40℃,检测波长:254 nm,进样量:20μL。结果:各色谱峰分离度良好;阴性样品无干扰;对羟基苯甲酸在0.3391 mg/mL~3.3912 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9997),羟苯甲酯钠在4.8565 mg/mL~48.5654 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9997),羟苯丙酯钠1.2004 mg/mL~12.0043 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9995);对羟基苯甲酸、羟苯甲酯钠、羟苯丙酯钠平均回收率分别为99.71%(RSD:0.95%,n=12)、99.82%(RSD:0.35%,n=9)、100.65%(RSD:0.75%,n=9);精密度、重复性、稳定性试验结果良好。结论:该方法操作简便,结果准确,稳定性好,可用于同时测定依巴斯汀口服溶液中羟苯甲酯钠、羟苯丙酯钠两种抑菌剂及其降解产物对羟基苯甲酸的含量。

PMP-HPLC-MS分析扇贝内脏多糖的组成

本研究以虾夷扇贝加工副产物内脏为原料制备多糖,采用化学方法测定虾夷扇贝内脏多糖(SVP)中蛋白质含量为4.09%,中性糖含量为75.37%,硫酸根含量为0.63%,硫酸多糖含量为8.77%,红外光谱显示了多糖特征吸收峰。采用PMP-HPLC-PDA-MS分析扇贝内脏多糖酸降解产物,确定主要组成单糖是Xyl,Gal,Man,Rha,Fuc,Ara,另外还含有少量的Glc N,Gal N,Gal A和Glc;并由二糖片段推测扇贝内脏中存在硫酸软骨素或其类似物,以及三种结构中存在糖醛酸与己糖重复二糖片段的多糖。本研究提供了扇贝内脏多糖的信息,有助于这一加工副产物的开发利用。

应用HPLC-DAD/MS技术评价中药天麻的质量

分析比较不同产地及不同炮制方法的天麻药材质量。天麻药材指纹图谱HPLC-DAD分析条件如下:Zorbax XDB C18色谱柱;流动相为乙腈-0.1%醋酸水梯度洗脱,检测波长为270 nm。MS分析条件:采用ESI电离源,负离子检测模式。天麻药材含量测定HPLC条件:流动相为乙腈-0.1%醋酸水等度洗脱,其余均同天麻药材指纹图谱的液相分析条件。结果表明,不同产地天麻药材具有相似的指纹图谱,原药材直接冻干的炮制方法较其他方法具有较高的相似度;指认了天麻药材指纹图谱中8个主要的色谱峰;指纹图谱相似度的分析结果与主要成分定量分析的结果基本一致。本文所建立的HPLC-DAD/MS分析方法能够对天麻药材进行全面的质量评价。

HPLC-ELSD法测定商陆不同部位中商陆皂苷甲的含量

目的:建立 HPLC-ELSD 法测定商陆中商陆皂苷甲的含量。方法:采用 Diamonsil C_(18)(5 μm,250 mm×4.6 mm)色谱柱,甲醇-水(75:25)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1);蒸发光散射检测,ELSD 漂移管温度:74 ℃,载气流速:2.0 L·min^(-1)。结果:商陆皂苷甲进样浓度在26.6～532.5分g·mL^(-1)范围内有良好的线性关系(r=0.9995);平均回收率(n=5)为98.5%,RSD 为1.5%。结论:本方法简便,结果可靠、准确,可用于商陆的质量控制。

SPE-HPLC测定注射用红景天(冻干)中红景天苷和酪醇的含量

目的：测定注射用红景天（冻干）中红景天苷和酪醇的含量。方法：选用C18固相萃取小柱对样品进行纯化后用高效液相色谱法测定红景天苷和酪醇含量。Irregular-H C18柱（4．6mm×250mm，10μm），流动相甲醇-乙腈-0．06％磷酸（10：10：80），流速1．0mL·min^-1，检测波长275mm，柱温30℃。结果：红景天苷在2．24～22．4μg、酪醇在0．856～8．56μg呈现良好的线性相关性，r分别为0．9997，0．9996，平均回收率分别为101．3％，99．8％。结论：本方法简便快捷，分离度好，结果准确可靠。

RP-HPLC测定扑热息痛滴剂的含量

用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)以咖啡因为内标,用 YWG C_(18)H_(37)层析柱及甲醇—水(1:2,v/v)为流动相于UV254nm测定了扑热息痛滴剂的主药含量,扑热息痛分解产物对氨基酚可被分离,滴剂的溶媒也不干扰测定。扑热息痛的最低检测量为10ng,日内和日间回收率分别是98.99%～100。48%和99.54%～100.35%,日内和日间的RSD分别为0.40%和0.28%。

MPLC合p-HPLC法分离制备泽泻中23-乙酰泽泻醇B

目的建立快速制备泽泻药材中23-乙酰泽泻醇B对照品的方法。方法采用中低压正相硅胶柱色谱(MPLC)合高压反相色谱法(p-HPLC),MPLC:硅胶柱:3 cm×13 cm,40 g;流动相:石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱;流速:50 ml/min;p-HPLC:Ultimate XB-C18:21.2 mm×250 mm,10μm;流动相:乙腈-水(65:35);流速:15 mL/min;检测波长:208 nm。结果 MPLC合p-HPLC法一次可以从2 g泽泻乙酸乙酯粗提物中分离制备得到23-乙酰泽泻醇B 40.2 mg。结论建立的MPLC合p-HPLC法简便、快捷、高效地获得泽泻中23-乙酰泽泻醇B对照品。

RP-HPLC测定不同产地白花丹中白花丹醌的含量

目的分析不同产地白花丹药材中白花丹醌含量的差异。方法采用KromasilC18柱（4.6mm×200mm,5μm）,柱温：30℃,流动相：甲醇-水（65∶35）,检测波长：213nm,流速：1mL·min^-1。结果白花丹醌在0.0104-0.3328μg,峰面积与进样量具有良好的线性关系,回归方程为Y=-22.32＋9527.9X,r=0.9999,平均回收率为98.7%。结论本法简便、准确、重复性好,可用于控制白花丹药材质量。

用HPLC测定羟基苯乙酸-N,N-二甲氨基甲酰甲酯含量的研究

以高效液相色谱法（HPLC）测定对羟基苯乙酸-N，N-二甲氨基甲酰甲酯的含量，采用Thermo Syneronis C18柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水=30：70（V/V）为流动相，流速1.0mL/min，检测波长275nm。结果表明，对羟基苯乙酸-N，N-二甲氨基甲酰甲酯在0.1-1.0μg范围内线性关系良好，加样回收率为98.8%，RSD=1.08%。该方法准确，便捷，重现性好，适用于对羟基苯乙酸-N，N-二甲氨基甲酰甲酯的含量测定及工业生产中的质量控制。

利用HPLC-MS对精噁唑禾草灵微生物降解途径的研究

产碱菌属H(Alcaligenes sp.H)以及其紫外诱变菌Huv 均可降解精唑禾草灵, 液相色谱显示二者具有某一相同的精唑禾草灵微生物降解产物; 利用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS), 对上述精唑禾草灵微生物降解产物进行鉴定。结果表明: 精唑禾草灵水解是降解菌Alcaligenes sp. H与Huv 降解精唑禾草灵的公共降解途径之一, 其产物为(R)_2_[4_(6_氯_1,3_苯并唑_2_基氧)苯氧基]丙酸和乙醇。

HPLC-PDA法测定兽药中非法添加四种解热镇痛抗炎类药物

建立了7种兽药中非法添加对乙酰氨基酚、安乃近、地塞米松和地塞米松磷酸钠药物的HPLC-PDA法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂，磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠3．0 g加水至1000 mL，加三乙胺1 mL，用氢氧化钠调pH值至7．0±0．2）-甲醇（80∶20）为流动相，梯度洗脱，二极管阵列检测器进行全扫描和240 nm波长测定，并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法，对四种目标分析物进行确证。结果显示，4种解热镇痛抗炎药物与其他物质峰分离良好，在测定范围内线性关系良好，平均回收率为73．5％～119．2％，RSD为0．1％～5．8％。本方法准确、可靠、重现性好，可用于兽药制剂中非法添加四种解热镇痛抗炎药物的定性和定量检测。

HPLC测定5-FU方法中内标物对氨基苯甲酸的研究

为改进HPLC测定氟尿嘧啶 (5 fluorouracil,5 FU)的方法 ,选择对氨基苯甲酸 (PABA)为内标物 ,用C18色谱柱 ,流动相甲醇 磷酸缓冲液 (pH 6.8) ,检测波长 2 70nm ,测定血清中 5 FU含量。结果 5 FU的最小检出限量为 1 .2ng,5 FU及PABA的萃取回收率分别大于 88.0 1 %和 86.5 5 %。

HPLC法测定白花蛇舌草中反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量

目的:建立高效液相色谱法测定白花蛇舌草中反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的含量。方法:分析柱为 DiamonsilODS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(45:55),检测波长为310nm,流速为1.0mL·min^(-1),柱温25℃,进样量为20μL。结果:该法线性关系与回收率结果良好,精密度和重复性试验5次测定的 RSD 分别为0.63%和1.2%。结论:方法准确可靠,适用于白花蛇舌草中反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的定量分析。

HPLC法测定小鼠血浆中N-丙磺舒-他克林的含量

目的:建立小鼠血浆中N-丙磺舒-他克林的含量测定方法。方法:以地西泮为内标。采用Shimadzu HPLC仪,以Shim-pack c18色谱柱为分析柱,甲醇-水(70:30)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,柱温35℃,于检测波长为233 nm进行检测,进样量为20μL。结果:在0.5-40.0μg·mL-1浓度范围内,测定方法具有良好的线性关系,线性方程为:Y=0.0322X-0.036,r=0.9998。回收率、精密度符合生物测定的要求,最低定量限为0.2μg·mL-1,最低检测限为0.03μg·mL-1。结论:本法用于测定小鼠体内N-丙磺舒-他克林的含量简便、准确。

RP-HPLC法测定板栗种仁中原儿茶酸、对羟基苯甲酸和异香草酸的含量

目的建立同时测定板栗种仁中原儿茶酸、对羟基苯甲酸、异香草酸含量的方法。方法采用Dikma Diamonsil C18柱（250mm×4．6mm，5um），以甲醇-体积分数为0．05％的甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为1．0mL·min^-1，检测波长为260nm，柱温为室温。结果原儿茶酸、对羟基苯甲酸、异香草酸质量浓度分别在10—100mg·L^-1、5～50mg·L^-1、50～500mg·L^-1内与峰面积具有良好的线性关系（r≥0．9998，n=6），方法平均回收率分别为98．5％、98．0％、99．6％。结论本方法可用于同时测定板栗种仁中原儿茶酸、对羟基苯甲酸、异香草酸的含量。

HPLC法同时测定不同配伍比例三棱-莪术药对中P-香豆酸、阿魏酸的含量

目的:建立同时测定三棱-莪术药对中P-香豆酸、阿魏酸含量的方法,探讨不同比例药对中二者含量的变化。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent 20RBAX XDB-C_(18),流动相为乙腈-0.1%冰醋酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为266 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:P-香豆酸、阿魏酸检测质量浓度线性范围分别为4.218 6~21.093μg/m L(r=0.999 8)、1.836 0~9.180μg/m L(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为98.72%~100.30%(RSD=0.18%,n=9)、99.11%~100.45%(RSD=0.46%,n=9)。三棱-莪术药对4个配伍比例(1∶1、2∶1、1∶2、1∶0,m/m)中,三棱-莪术比例(m/m)为2∶1时P-香豆酸、阿魏酸含量最高。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于三棱-莪术药对中P-香豆酸、阿魏酸含量的同时测定;该药对中三棱-莪术比例(m/m)为2∶1时主要有效成分含量最高。

RP-HPLC用于紫苏油及其习用品白苏油、野苏油的鉴别

本文采用RP－HPLC方法对紫苏油及其习用品白苏油、野苏油甘油酯进行了定性定量分析。利用HPLC分析油脂也为中药材真伪鉴别提供了一条有效途径。

RP-HPLC法同时测定榕树须中原儿茶酸、对羟基苯甲酸和原儿茶醛的含量

目的建立同时测定榕树须中原儿茶酸、对羟基苯甲酸和原儿茶醛含量的方法。方法采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Shimadzu CAPCELL PAK-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为甲醇-体积分数0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为270 nm;柱温为35℃。结果原儿茶酸、对羟基苯甲酸和原儿茶醛质量浓度分别在10.40~208.0 mg·L-1、5.81~116 mg·L-1和4.50~90.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系（r≥0.999 7,n=5）。加样回收率分别为97.2%、98.6%和98.8%（RSD≤2.7%,n=9）。结论该方法可作为榕树须中原儿茶酸、对羟基苯甲酸和原儿茶醛的含量测定方法,为其质量控制提供参考依据。

人血浆中茴拉西坦代谢物的HPLC-MS测定及药物动力学研究

建立了HPLC-MS法测定人血浆中茴拉西坦代谢产物对甲氧基苯甲酰胺基丁酸(2)的浓度。以N,N-二甲基-3,4-亚甲氧基苯乙胺(3)为内标,采用Thermo C18色谱柱,流动相为30mmol／L乙酸铵溶液(含0．5％甲酸和0．01％三氟乙酸)-乙腈(84:16),HPLC-MS采用ESI+电离源,选择正离子检测模式,检测的离子为m／z 135(2,M+H)和163(3,M+ H)。2在0．058～14．03μg／ml浓度范围内线性良好,回收率在90％以上。18名健康志愿者口服茴拉西坦胶囊0．2g后的药动学参数AUC0→t、AUC0→∞、tmax、Cmax和t1/2分别为(9．21±1．72)μg·h·ml-1、(9．30±1．75)μg·h·ml-1、(0．47±0．11)h、(9．44±2．13)μg／ml和(0．66±0．10)h。