P^(15)基因mRNA及其蛋白在原发上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的 探讨原发上皮性卵巢癌中P15基因mRNA(P15mRNA)及其蛋白的表达情况 ,以确定该基因在原发上皮性卵巢癌发生发展过程中的作用。方法 采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)及免疫组化方法 ,对4 8例原发上皮性卵巢癌以及 15例正常卵巢组织P15mRNA及其蛋白进行了检测。结果 4 8例原发上皮性卵巢癌中P15mRNA表达缺失者 11例 (2 2 92 % ) ,P15蛋白缺失者 13例 (2 7 0 8% ,包括 11例P15mRNA表达缺失者 )。15例正常卵巢组织P15mRNA及其蛋白均有表达。P15mRNA及其蛋白表达缺失与原发性上皮性卵巢癌的组织学类型有关 (P <0 0 5 ) ,而与其FIGO分期及组织学分级无关 ,但随肿瘤临床期别和病理级别增高缺失率有增高的趋势。一致性检验显示P15mRNA与其蛋白表达关系密切 (P <0 0 5 )。结论 P15基因在原发上皮性卵巢癌中存在mRNA以及蛋白表达的异常 ,提示该基因的失活与原发上皮性卵巢癌的发生有关。

抑癌基因P^(15)在胃癌中的表达及其临床意义

采用SP免疫组化法测定了80例胃癌及26例胃良性病变患者胃组织石蜡标本的P15基因蛋白(P15)表达情况,结合临床病理指标(肿瘤大小、生长方式、组织分化、浸润深度、转移及PTNM分期)进行分析。结果在胃癌组织中P15阳性表达率为43.8%(35/80),胃良性病变为69.2%(18/26)(P<0.05);P15表达与肿瘤大小、生长方式、组织分化、浸润深度、转移及PTNM分期无关(P均>0.05)。认为P15在胃癌发生中起重要调控作用,与临床病理因素无关。

P_(15)基因甲基化和血液病相关性的研究进展(综述)

P15基因是肿瘤抑制基因的侯选基因 ,受细胞生长抑制蛋白TGF - β的诱导 ,编码周期素依赖激酶 4 / 6(CDK4 / 6)抑制因子 ,对细胞周期起负调控作用 ,P15基因操纵区 5′ -CpG岛的甲基化被认为是基因缺失之外的又一失活机制。P15基因 5′ -CpG岛的异常甲基化导致该基因转录的抑制 ,5′ -杂氮脱氧胞嘧啶 (5′ -Aza - 2cdR)通过共价俘获DNA甲基转移酶抑制DNA的甲基化 ,使因甲基化失活的生长调控基因重新激活并表达。 5′ -Aza - 2cdR可通过P15基因去甲基化再表达抑制细胞的生长 ,为临床恶性血液病去甲基化治疗提供实验依据。

恶性血液病患者P^(16)及P^(15)基因失活与甲基化的相关性研究

用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增 86例恶性血液病患者 P1 6 及 P1 5基因的外显子 1及外显子 2 ,再用限制性内切酶— PCR方法检测两基因的甲基化。发现 2 9例患者有 P1 6 、P1 5基因失活 ,以甲基化失活为主。对 P1 6 、P1 5基因失活与甲基化进行相关性分析 ,发现 P1 6 、P1 5基因失活与甲基化呈正相关 ,且患者的治疗效果差、缓解率低、缓解期明显缩短。认为 P1 6及 P1 5基因失活和甲基化的检测对于探讨恶性血液病的发病机制。

急性白血病P^(15)基因异常及甲基化研究

用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增 P1 5基因外显子 1,再用限制性内切酶 - PCR方法检测 P1 5基因甲基化。结果 48例患者中 P1 5基因失活者共 2 7例 (5 8.92 % ) ,AL L2 1例中有 12例 (5 7.41% ) ,ANL L2 7例中 15例(5 5 .5 6 % )。 P1 5 基因以甲基化失活为主。 P1 5 Cp G岛甲基化在各型急性白血病中均有很高的发生率 ,可以作为各型急性白血病通用的微量残留病 (MRD)指标 ;白血病缓解期 P1 5 Cp G岛甲基化仍为阳性可能预示着复发。认为 P1 5基因失活的检测对于探讨急性白血病的发病机制。

抑癌基因P15在肾癌组织中的表达及意义

目的 探讨抑癌基因P 15与肾癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学 (SP)方法对 5 0例肾癌组织和2 5例癌旁肾组织中P 15基因的表达进行检测。结果 癌旁肾组织中P 15阳性率 (76 % )显著高于肾癌组织 (48% ;P <0 0 5 )。随着肾癌病理分级、临床分期的上升 ,P 15表达阳性率明显降低。P 15阳性率在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肿瘤中分别为 6 6 7%、4 7 6 %和18 2 % (P <0 0 5 ) ;在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ -Ⅳ期肿瘤中分别为 6 1 9%、4 7 1%和 2 5 % (P <0 0 5 )。P 15阳性与阴性表达组间 3、5a生存率均存在显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 抑癌基因P 15在防止肾癌的发生、发展中起重要作用 。

地西他滨治疗骨髓增生异常综合征的临床疗效及P15甲基化变化研究

目的分析地西他滨治疗骨髓增生异常综合征（MDS）患者的临床疗效与不良反应,并探讨治疗后P15基因的甲基化水平变化。方法对广东省人民医院血液科2009年11月至2012年3月接受地西他滨治疗的31例MDS患者[难治性血细胞减少伴多系病态造血（RCMD）9例,难治性贫血伴有原始细胞增多I（RAEB-Ⅰ）11例,RAEB-Ⅱ7例,慢性粒单核细胞白血病（CMML）4例]进行回顾性分析,其中28例接受5 d方案,3例接受3 d方案。从中抽取7例RAEB-Ⅰ及RAEB-Ⅱ患者,使用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）连续监测其P15基因甲基化水平的变化。结果在可评估的28例患者中,完全缓解（CR）3例,骨髓完全缓解伴血液学改善（m CR＋HI）5例,骨髓完全缓解（m CR）7例,单纯血液学改善（HI）3例,疾病稳定（SD）9例,疾病进展1例,CR率10.7%,总有效率（CR＋m CR＋HI）64.3%,2年生存率为46.4%。经地西他滨治疗后,患者P15基因明显降低,且用药后第1周下降幅度最大,达20%~60%。结论地西他滨治疗MDS患者具有一定疗效,不良事件具有可控性,且治疗后P15基因明显下降。

恶性血液病中的P_(15)^(INK4B)基因甲基化

目的 探索特定基因操纵区CpG岛高甲基化对人类造血系统恶性肿瘤的作用。方法 利用甲基化特异性聚合酶链反应 (MSP)的方法 ,用亚硫酸氢钠修饰后的DNA为模板进行甲基化特异性聚合酶链反应 (PCR) ,测定了 2 5例急性髓系白血病 (AML) ,15例慢性粒细胞白血病 (CML) ,16例骨髓增生异常综合征 (MDS)和 12例多发性骨髓瘤 (MM)患者P1 5INK4B基因在操纵区 5′ CpG岛异常甲基化的发生率。结果 P1 5INK4B基因异常甲基化的发生率 :AML为 84% ,CML为 0 ,MDS为 5 0 % ,MM为 75 %。高危型的MDS较低危型更易发生甲基化。在MM中 ,P1 5INK4B甲基化一般发生在早期 ,与骨髓象的幼稚程度关系密切。结论 调节细胞生长和分化的P1 5INK4B基因高甲基化是使P1 5INK4B 基因失活的主要原因之一 ,CpG岛高甲基化与恶性血液病的发生密切相关。

p15基因对人肝癌HepG2顺铂耐药细胞周期和耐药性的影响研究

目的:利用p15-shRNA表达载体干扰细胞周期相关基因p15,探讨p15基因对人肝癌HepG2顺铂耐药细胞周期和耐药性的影响。方法:用梯度浓度的顺铂诱导HepG2细胞耐药并建立动态耐药模型HepG2/顺铂/2.0,以不同浓度(30、60、90nmol·L-1)的干扰质粒p15-shRNAY2和阴性对照质粒(shRNA-F)转染HepG2/顺铂/2.0细胞后48h检测p15荧光阳性细胞,筛选最佳干扰浓度;以筛选结果转染HepG2/顺铂/2.0细胞,与未转染细胞和阴性对照转染细胞比较,检测细胞存活情况、周期分布和p15、Bcl-2、Bax的蛋白表达。结果:最佳干扰浓度为60nmol·L-1;与未转染细胞和阴性对照转染细胞比较,p15-shRNAY2转染细胞的存活率明显增加,G1期细胞明显减少,p15、Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2蛋白表达明显增加(P均<0.01)。结论:p15-shRNA可抑制p15基因表达,干扰细胞周期使G1期的比例减少,增加HepG2/顺铂/2.0对顺铂的耐药性。