泰兴地区人群中MN及P血型表型分布频率调查

目的了解本地区汉族人群中MN及P血型系统的表型分布频率。方法试管法检测1 013名大样本健康体检者红细胞上M、N、P1血型抗原,根据红细胞凝集与否判定被检者MN及P血型表型。结果男性501名,其中M表型133名、N表型211名、MN表型157名,P1型192名、P2型309名;女性512名,M表型126名、N表型212名、MN表型174名,P1型183名、P2型329名。结论本地区汉族人群中MN血型的表型分布频率依次为N、MN和M,P血型中P2型分布频率明显高于P1型,MN及P血型系统中各表型分布无性别间差异(P>0.05)。

P[9]轮状病毒受体结合特征及其人群抗体水平与HBGA相关性研究

目的 表达P[9]轮状病毒(rotaviruses,RV)GST-VP8*蛋白,研究其与组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)受体的结合方式。了解广东省汕尾市人群P[9]RV特异性抗体水平,并分析其与HBGA受体的相关性。方法 构建pGEX-4T-1- VP8*重组质粒,利用原核表达系统表达纯化VP8*蛋白,目的蛋白经Western bolt确定其特异性,采用酶联免疫吸附试验检测GST-VP8*蛋白与唾液HBGA受体结合方式。利用VP8*蛋白检测广东省汕尾市人群P[9]RV抗体,并检测该人群HBGA受体表型,分析P[9]RV抗体与HBGA的相关性。结果 成功表达了P[9]RV VP8*蛋白,并发现其与A型分泌型HBGA受体特异结合,不结合B、O型分泌型及非分泌型HBGA受体。A型、Le b+/Le y+和分泌型HBGA个体配对的血清中P[9]RV特异性IgG阳性率明显较高。结论 P[9]RV识别A型分泌型HBGA受体,这将有助于理解RV的流行病学,为RV进一步防控提供试验依据。

40例亲子鉴定结果的分析

用血型系统及白细胞抗原(HLA)等方法对40件案例作了亲子鉴定。结果表明 HLA 系统的排除率最高,Rh 血型系统次之;自4个月龄胎儿的心血中可准确检出 HLA。对亲子鉴定的案件性质、检验方法、判定标准及注意事项进行了分析和讨论,旨在解决家庭纠纷、强奸受孕和涉及计划生育方面的有关问题。

指示红细胞保存期限的实验研究

用微滴板法研究不同保存液对红细胞血型抗原保存期限及溶血率的影响。结果表明，红细胞在不同保存液中的保存期限和溶血率各不相同，其变化与保存液的而萄糖浓度及溶液渗透压有关，枸橼酸－枸橼酸钠－葡萄糖液（ＡＣＤ液）具有配制方法简单、保存期限较长等优点，适宜在法医基层单位推广使用。

α1，4半乳糖基转移酶基因26个碱基缺失导致的罕见p表型

目的研究中国人个体PIPk血型系统中罕见P表型的血清学特征及其分子遗传背景。方法对1例血清中含有疑难抗体的先证者及其8位家系成员样本，应用特异性血型抗体和谱细胞进行血型血清学鉴定。对P表型相关的a1，4半乳糖基转移酶（a-1，4-galactosyltransferase，A4GALT）编码基因A4GALT编码区及侧翼内含子区进行聚合酶链反应和DNA序列分析，并进一步通过克隆测序法鉴定A4GALT等位基因组合。结果先证者为罕见的P表型，其血清中含有能与所有非P表型红细胞凝集反应并致其溶血的抗-Tja抗体，其他家系成员为正常的P1或P2表型。DNA直接测序和克隆测序分析发现，先证者的A4GALT基因编码区存在972～997位26bp纯合缺失，该26bp缺失可引起多肽链的移码突变，导致变异型a1，4半乳糖基转移酶比野生型多83个氨基酸残基；而其他家系成员在该位点均为缺失杂合子或未缺失。结论在中国人群中发现因A4GALT基因972～997位26bp缺失导致的P表型。

PIPk血型系统中一例罕见P表型的分子遗传机制研究

目的分析P1Pk血型系统中1例罕见P表型的分子遗传机制。方法采用血清学方法鉴定先证者及其5个容系成员红细胞血型抗原和血清中的抗体。PCR扩增编码P1Pk的a1，4半乳糖基转移酶基因（a1，4-galactosyltransferase，A4GALD编码区及侧翼非翻译区后进行测序分析，并通过克隆测序法鉴定先证者父母A4GALT基因单体型。结果血清学实验证实先证者为罕见的P表型，其血清中含有抗-Tja抗体，而家系成员为常见的P2表型。DNA测序显示，先证者的A4GALT基因编码区存在1026-1029insC纯合突变，该处C碱基的插入可引起多肽链的移码突变，导致变异型a1，4半乳糖基转移酶比野生型多92个氨基酸残基；而其他家系成员在A4GALT基因该位点均为杂合性插入或野生型。结论在中国人群中发现因A4GALT基因1026-1029insC导致的P表型，该表型携带有抗-Tja抗体。

温州地区献血人群MN、P、Lewis和Kidd血型系统血型表现型分布的调查

目的了解温州地区献血人群MN、P、Lewis和Kidd血型系统各种血型表现型及其基因的分布状况。方法用微量板法对随机抽取的672名献血者标本进行MN、P、Lewis和Kidd血型系统各种抗原的检测来判断表现型,对结果判断困难者用血清学试管法确认;根据检测所得表现型结果(观察值)和Hardy-weinberg遗传平衡定律来计算基因频率和表现型的期望值;采用χ2检验比较表现型分布的观察值与期望值是否存在显著性差异,来验证观察值是否符合Hardy-weinberg遗传平衡定律。结果 1MN血型系统各表现型分布规律(频率)是:MN(0.4940)>M(0.2902)>N(0.2158);基因分布规律(频率)是:LM(0.5372)>LN(0.4628)。2P血型系统各表现型分布规律(频率)是:P2(0.6503)>P1(0.3497);基因分布规律(频率)是:P2(0.8064)>P1(0.1936)。3Lewis血型系统各表现型分布规律(频率)是:Le(a-b+)(0.6696)>Le(a-b-)(0.1280)>Le(a+b+)(0.1131)>Le(a+b-)(0.0893);基因分布规律(频率)是:Leb(0.5342)>Le(0.3588)>Lea(0.1070)。4Kidd血型系统各表现型分布规律(频率)是:Jk(a+b+)(0.4777)>Jk(a-b+)(0.3184)>Jk(a+b-)(0.2039),未发现Jk(a-b-);基因分布规律(频率)是:Jkb(0.5572)>Jka(0.4428)。5MN、P、Lewis和Kidd血型系统各种血型表现型的观察值与期望值差异均无统计学意义(P>0.05),观察值均符合Hardy-weinberg遗传平衡定律。结论温州地区献血人群MN、P、Lewis和Kidd血型系统血型表现型及其基因的分布具有多态性特征,并且符合Hardy-weinberg遗传平衡定律。

p表型个体的血清学特点和分子机制研究1例

目的分析1例p表型个体的血清学特征和分子机制。方法选取2021年5月在嘉兴市中心血站进行血型鉴定的1例p表型个体为研究对象。用血型血清学方法鉴定其ABO、RhD、P1PK血型和意外抗体。采用PCR-直接测序法(PCR-SBT)对编码P1和PK抗原的α1,4-半乳糖基转移酶基因(A4GALT)的编码区进行测序分析。结果该个体的血型为A型、RhD阳性、P1PK系统为罕见的p表型,血清中存在抗-PP1Pk。测序结果显示其A4GALT基因编码区存在c.343A>T纯合变异。结论A4GALT基因c.343A>T纯合变异很可能导致了p表型个体。

新等位基因A4GALT纯合变异致罕见p血型

先证者女,33岁,孕妇(孕4产1),前3次均为孕3月左右自然流产,无输血和移植史,第4次孕期临床诊断先兆流产,于2023年6月28日在东莞市中医院妇产科拟行剖宫产,术前备血,进行交叉配血试验时发现该先证者血浆中有无法确定特异性的意外抗体,无法找到合适的供者红细胞。血样本遂送至东莞市中心血站输血研究室,本实验室对该先证者采用血型血清学鉴定其红细胞血型表型证实为罕见的p血型,意外抗体特异性鉴定为抗-PP1Pk,先证者基因测序发现为新等位基因A4GALT*(c.100G>A+c.418428delins)纯合子,推测其引起多肽链p.Val34Ile和p.Gln140Trpfs*73改变,并导致α1,4-半乳糖基转移酶失活。同时在家系成员中发现另一个新等位基因A4GALT*c.100G>A,经预测该变异引起的单独p.Val34Ile改变并不影响蛋白功能和酶活性。

江夏地区人群RhD(-)血型系统基因频率的分布

目的:探讨RhD阴性血型基因及其MN、P血型基因在江夏地区人群中的分布频率。方法:采用血清学方法对江夏区42 940例住院患者及健康体检者进行RhD、C、c、E、e、M、N、P1抗原表现型检测。结果:共检出RhD阴性136例,其中ccee 76例(50.88%),CCee 10例(7.35%),Ccee 42例(30.88%),ccEe 6例(4.41%),CcEe 2例(1.47%)。从而得出RhD阴性者中C基因频率为0.235 3,c基因频率为0.764 7,E基因频率为0.029 4,e基因频率为0.706,基因组合体频率为cde=0.042,Cde=0.012 6,cdE=0.001 7,CdE=0,并对M、N及P1抗原进行了分布调查,其中M型34例(25%),N型64例(47.06%),MN型38例(27.94%),P1型50例(36.76%)。结论:RhD阴性表型按频率由高到低依次为deecc>deeCc>deeCC>dEecc>dEeCc,由单倍型来看cde是江夏地区RhD阴性中最常见单倍型,Cde次之,结果比较符合中国汉族RhD阴性血型中Rh单倍型和基因频率分布状况。同时对RhD阴性血的MN及P系统有初步的了解。