艾康恶性疟/间日疟免疫层析检测试剂盒效果评价

目的评价艾康恶性疟/间日疟(P．f/P．v)胶体金免疫层析检测试剂盒诊断疟疾效果。方法以镜检法为金标准,采用盲法实验室测试疟疾阳性和阴性血样。结果共测试331例血样,其中疟疾血样121例。对疟疾的灵敏性和特异性分别为92．56％和98．57％,与镜检符合率为96．38％；其中恶性疟的灵敏性和特异性分别为100．00％和98．57％,重复性为100．00％；对间日疟的灵敏性和特异性分别为86．96％和100．00％,恶性疟和间日疟之间无交叉反应。结论艾康P．f/P．v胶体金免疫层析检测试剂盒诊断疟疾具有快速、简便、准确、直观以及不需要特殊仪器优点,能同时诊断单纯恶性疟和单纯间日疟,但不能鉴别诊断混合感染。

快速免疫色谱测试卡诊断恶性疟和间日疟的效果评价

目的： 评价快速免疫色谱测试卡（ Ｉ Ｃ Ｔ） 在疟区诊断恶性疟和间日疟的效果。方法： 以疟原虫镜检结果为标准， 用 Ｉ Ｃ Ｔ 检测门诊“四热”病人中的恶性疟和间日疟。结果： Ｉ Ｃ Ｔ 检测恶性疟与间日疟的敏感性分别为９６７ ％ 和９０４ ％ ， 特异性为９８６ ％ 。与原虫镜检结果的符合率为９４７ ％ 。恶性疟与间日疟之间无交叉反应。结论： 免疫色谱测试卡可同时检测恶性疟和间日疟， 较镜检法快速、简易。

长沙地区3种优良观赏竹发笋及幼竹高生长规律

为给长沙地区观赏竹的引种培育和科学经营管理提供参考,研究了湖南省森林植物园中黄秆乌哺鸡竹、花秆早竹和花毛竹这3种竹的出笋、退笋及幼竹高生长规律。结果表明：黄秆乌哺鸡竹发笋期在4月初,花秆早竹和花毛竹在3月中下旬,历期均为20～25 d,明显分为初期、盛期和末期3个阶段;同一竹种不同发笋时期的发笋数间存在显著性差异（P〈0.05）,其中黄秆乌哺鸡竹、花秆早竹和花毛竹的平均每株母株发笋数分别为1.09、1.85和1.16株;造成3种观赏竹退笋的原因有很多,其中在初期萌发笋退笋原因主要是人为机械损伤,盛期萌发笋退笋原因为机械损伤和营养缺乏等,而末期萌发笋的退笋原因主要是营养供应不足;3种观赏竹3个不同时期萌发笋幼竹高生长过程均呈“S”型生长曲线,符合“慢-快-慢”生长规律,相应的Logistic方程均较好地拟合了各个时期萌发笋幼竹的平均高生长过程;在幼竹高生长历期和株高方面,3种观赏竹初期和盛期萌发笋均优于末期,留笋养竹时选择初期和盛期萌发笋为宜;3种观赏竹幼竹昼夜生长均呈现一定节律,且夜间增长量均高于白天增长量。

诺氏疟原虫的人体自然感染

云南省墨江县1例“间日疟”患者的血片,经回顾性镜检,发现疟原虫形态特别,早期滋养体多核,红细胞内有多个虫体寄生,晚期滋养体有形成带状趋势。裂殖体和配子体与间日疟原虫相似。经分子生物学鉴定为诺氏疟原虫。

山东中华按蚊传播间日疟的研究

本文报告了１９７３～１９９４年对山东中华按蚊传播间日疟的系统研究结果。在７０年代暴发流行期间感染率为０．４７％，病家蚊经饲养后解剖感染率为１３．２％；实验观察人工感染蚊虫感染率为３６．１％，其中腺子孢子阳性率为１７％，胃部囊合子阳性率为２３．３％；鲁东半岛疟疾非暴发流行区与鲁西南易暴发流行区中华按蚊对间日疟原虫的易感染性无显著性差异；间日疟原虫在中华按蚊体内发育的起点温度为１４．９℃，有效积温为１０５．１５℃；传播间日疟的媒介能量年内季节变化与年度变化均与发病情况较为一致。自１９８２年以来，其能量稳定地处在低水平。此结果提示，若无大量传染源输入，不会造成疟疾大流行。

间日疟原虫乳酸脱氢酶的表达、纯化及免疫活性的鉴定

目的在大肠杆菌中表达间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,对重组蛋白进行纯化并测定其免疫活性。方法将构建的LDH/pGEX-4T-1重组菌BL21接种于LB培养基中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组融合蛋白的表达,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,ELISA检测血清效价,Western-blotting鉴定其免疫活性。结果重组质粒在大肠杆菌中表达PvLDH与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白,表达产物主要以包涵体形式存在,经复性、纯化后免疫小鼠,能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,ELISA法测效价为1∶51200,Western-blotting结果显示该血清能特异性与间日疟和恶性疟患者全血发生反应,而不能与正常人起交叉反应。结论PvLDH在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性和免疫原性。

艾康疟原虫检测试剂盒现场应用效果观察

目的评价国产艾康疟原虫(pf/pv)检测试剂盒现场应用效果。方法以镜检方法作为金标准比较艾康疟原虫检测试剂盒现场应用效果。结果336例样本均用镜检方法和艾康疟原虫试剂盒诊断,镜检阳性155例,阴性181例;试剂盒诊断阳性156例,阴性180例,试剂盒诊断疟疾的灵敏度为99.4%,特异度为98.9%。试剂盒诊断间日疟的灵敏度为98.8%、特异度为100.0%;试剂盒诊断恶性疟的灵敏度为100.0%、特异性为99.3%。未发现交叉反应。结论艾康试剂盒诊断疟原虫敏感性与特异性均高,且一次能测出单纯恶性疟或单纯间日疟的感染,操作简单,结果显示直观、快速,在常温下保存稳定,适合疟疾流行区的基层单位使用。

疟疾现症病人的血象及某些血液生化变化情况

目的 了解云南西南部恶性疟和间日疟现症病人的血象和某些血液学变化。 方法 以来自陇川县、瑞丽市和部分缅甸北部居民镜检证实为恶性疟和间日疟的现症住院病人 ,进行血常规检验和谷丙转氨酶、尿素氮测定。 结果 恶性疟、间日疟血常规各检验 69例和 3 4例 ,血小板、白细胞、红细胞总数和血红蛋白含量低于正常值者 ,恶性疟依次为 81 2 %、10 1%、3 4 8%、5 3 6% ,间日疟依次为 69 7%、2 0 6%、2 9 4%、5 0 0 %。恶性疟和间日疟谷丙转胺酶高于正常值者分别 3 85 % (2 /5 2 )和 4 5 % (1/2 4) ,χ2 =0 0 0 0 4,P >0 0 5 ;尿素氮高于正常值者各为 2 3 5 3 % (12 /5 1)和2 5 0 % (6/2 4) ,χ2 =0 0 19,P >0 0 5。结论 两种疟疾均可引起较为严重的贫血、白细胞总数降低 ,尤其是血小板的减少 ;对肝脏、肾脏功能均有不同程度的影响 ,而对后者的影响更为显著。

间日疟原虫和恶性疟原虫可溶性抗原免疫反应性比较

目的分析和比较间日疟原虫(Plasmodiumvivax,P.v)和恶性疟原虫(P.falciparum,P.f)可溶性抗原与间日疟感染者混合血清和单克隆抗体(McAb)M26-32免疫反应性的差别,以期寻找潜在的疟疾诊断抗原。方法取P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,经60%Percoll浓集其中的感染红细胞(i RBC)。分别制备P.v、P.f和正常红细胞(nRBC)可溶性抗原,应用P.v感染者、正常对照混合血清和M26-32单抗与相应的抗原进行免疫印迹分析。结果免疫印迹分析表明,P.v感染者能特异性识别26k、33、49、115kDaP.v抗原;100、102、110、150、175kDaP.f抗原;能够交叉识别的条带有:31、59、63、70、120kDa。M26-32单抗能识别P.f、P.v抗原中31kDa等抗原条带。结论P.v感染者能特异识别间日疟抗原组份,并能交叉识别P.f抗原,其中31kDa抗原组分具有较强的免疫原性,同时能被M26-32单抗识别,其作为P.v特异性诊断抗原的价值有待于进一步研究。

复方蒿甲醚抑制蚊体内间日疟原虫孢子增殖观察

间日疟现症病人用复方蒿甲醚片，于治疗前及治疗后５、１２和２４ｈ分别以大劣按蚊叮咬吸血感染，结果用药前按蚊的唾腺子孢子阳性率为７５．８２％，用药后５ｈ有极少数吸血按蚊的胃壁卵囊阳性，但唾腺中均未检出子孢子。服药后患者血内疟原虫无性体及有性体较治疗前迅速减少，表明复方蒿甲醚能迅速杀灭红内期间日疟原虫，并能抑制其在蚊体内的孢子增殖。

以异种抗原间接荧光抗体试验检测间日疟原虫抗体的评价

使用Pc及Pf抗原对单纯间日疟流行区的疟疾病人血清进行IFA试验,以评价其替代PV抗原检测间日疟原虫抗体的效应程度。用Pc,Pc及Pf抗原分别检测155例确诊的间日疟病人血清,其GMRT依次为175.8,37.4及12.7,两两相比均有非常显著差异;其阳性符合率依次为97.4％,81.9％及63.9％,差异亦非常显著。3种抗原测得的抗体滴度进行直线回归分析,获得表示Pv和Pc抗原检测间日疟原虫抗体时抗体滴度关系的回归方程Y=1.22+0.65X。假此方程,通过Pc抗原检测时的抗体滴度,可能推算用Pv抗原检测时的抗体滴度。

间日疟原虫、恶性疟原虫和伯氏疟原虫各期的提纯和分离

用纤维素(Cellulose,CF-11)过滤去除白细胞后再用 Percoll 密度梯度离心方法提纯分离间日疟(P.v.)、恶性疟(P.f.)和伯氏疟(P.b.)3种疟原虫。经纤维素过滤后,P.v.病人血和P.b.感染鼠血中白细胞去除率分别平均达 94.7％和 75.4％,而且不影响原虫密度和各期构成比。多个 Percoll 不连续梯度离心测试3种疟原虫裂殖体、滋养体、环状体和未感染红细胞的相对平均密度(kg/L):P.v.分别为 1.059、1.072、1.096 和 1.099;P.f.分别为 1.070、1.079、1.10 和 1.10,配子体 1.085;P.b.分别为 1.059、1.062、1.103 和 1.104。并据此选择各自合适的 Percoll 梯度分离3 种疟原虫,将裂殖体、滋养体同环状体分开,获取原虫纯度(原虫数/100 个红细胞),P.v.由分离前 0.8％至分离后 93.5％,P.f.由2.3％至100％,P.b.由 30.6％至93％,分别提高 113.8、43.4和 2倍。

间日疟原虫子孢子免疫BALB/c小鼠的试验研究

用间日疟病人血,离体感染中华按蚊,分离子孢子,用10～12万条子孢子/次的量,免疫BALB/c小鼠,抗体效价均达到1:640,取其脾细胞作融合试验,已培养出抗体滴度高、特异性强的抗间日疟原虫子孢子单克隆抗体(McAb)。

BinaxNOW~疟原虫检测试剂卡临床应用效果观察

目的评价美国Inverness medical professional diagnostics公司生产的疟原虫检测试剂卡的临床应用效果。方法以镜检方法作为金标准比较BinaxNOW疟原虫检测试剂卡临床应用效果。结果 400份样本用镜检方法和BinaxNOW疟原虫检测试剂卡诊断,镜检法检出阳性138份,其中恶性疟77份、间日疟61份;疟原虫检测试剂卡检出阳性139例,其中恶性疟71份,间日疟68份。试剂卡检测疟疾的敏感度为98.55%,特异度为98.85%,检测恶性疟的灵敏度为87.01%、特异度为98.76%,检测间日疟的敏感度为93.44%、特异度为96.76%。存在交叉反应。结论BinaxNOW疟原虫检测试剂卡诊断疟疾敏感性与特异性高,操作简单,结果显示直观、快速,适合边远疟区无镜检能力的个体、乡村医生开展疟疾筛查。