温下方逆转A549/DDP细胞的多药耐药及对膜表面蛋白表达的影响

目的运用血清药理学方法,体外研究温下方对A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用及机制。方法正常血清及不同浓度的温下方含药血清作用于A549/DDP细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测温下方含药血清对A549/DDP细胞的逆转作用;运用免疫荧光技术,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和P-糖蛋白(P-gp)的表达。结果温下方含药血清能明显逆转A549/DDP细胞的多药耐药,增敏倍数为2～2.5倍。并可明显降低P-gp、LRP、MRP蛋白表达。结论温下方通过降低P-gp、LRP、MRP的表达以增强A549/DDP对化疗药的敏感性,逆转肺腺癌细胞的多药耐药。

冰片对P-糖蛋白影响的^(99m)Tc-MIBI显像研究

目的通过99mTc-MIBI显像以明确冰片对大鼠脑内、脑外恶性肿瘤细胞P-gp的功能是否有影响。方法取Wistar大鼠,制成皮下和脑内C6脑胶质瘤(C6)和耐药C6脑胶质瘤(C6R)肿瘤模型,分成对照组、冰片单次应用组和冰片连续应用组,进行躯体99mTc-MIBISPECT显像和脑部99mTc-MIBI放射自显影,利用感兴趣区(ROI)技术分别计算C6和C6R的肿瘤/肌肉放射性比值和肿瘤/脑皮质比值(T/NT),并把C6的T/NT与C6R的T/NT相除得出两者间的比值(TC6/TC6R),对各组显像结果进行比较。结果 1、C6R皮下肿瘤、脑内肿瘤摄取99mTc-MIBI明显低于C6皮下肿瘤、脑内肿瘤;2、冰片单次应用后,与对照组比较,C6皮下肿瘤和脑内肿瘤摄取99mTc-MIBI无明显变化,而C6R皮下肿瘤和脑内肿瘤摄取99mTc-MIBI明显增高,同时皮下肿瘤和脑内肿瘤的TC6/TC6R均明显减低;3、冰片连续应用后,与对照组比较,C6皮下肿瘤摄取99mTc-MIBI无明显变化,而C6R皮下肿瘤、C6脑内肿瘤、C6R脑内肿瘤摄取99mTc-MIBI均明显增高,且皮下肿瘤TC6/TC6R有明显降低,而脑内肿瘤TC6/TC6R虽有所降低,但无统计学差异。4、冰片连续应用后,对大鼠肿瘤细胞摄取99mTc-MIBI的影响程度与冰片单次应用相同。结论冰片单次应用和连续应用对脑内、外耐药恶性肿瘤P-糖蛋白的功能有一定的抑制作用,两者影响的幅度相似。

七叶皂苷对P-糖蛋白功能的影响

目的:探讨七叶皂苷对P-糖蛋白功能的影响。方法:构建稳定表达P-糖蛋白的LLC-PK1细胞系,以real-time RT-PCR和Western Blotting分析P-糖蛋白基因mRNA和蛋白表达,共聚焦显微镜观察P-糖蛋白细胞定位,流式细胞术检测细胞内罗丹明123荧光强度。结果:(1)P-糖蛋白在LLC-PK1细胞中稳定高表达;(2)转染细胞中P-糖蛋白定位在细胞膜上;(3)七叶皂苷抑制P-糖蛋白功能,细胞内罗丹明123荧光强度增加123%,但其抑制效果是维拉帕米的30%。结论:七叶皂苷抑制P-糖蛋白功能,但其抑制效果弱于维拉帕米。