双标多测法在枣仁安神颗粒6个成分含量测定中的应用

目的建立枣仁安神颗粒中斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、迷迭香酸、五味子醇甲、五味子乙素和丹酚酸B 6个成分的双标多测法,验证该方法在枣仁安神颗粒质量评价中应用的准确性和可行性。方法采用HPLC法,以乙腈为流动相A,0.2%冰醋酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),切换波长320 nm(斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、迷迭香酸、丹酚酸B)、250 nm(五味子醇甲、五味子乙素),柱温28℃。采用5根不同的C_(18)色谱柱,测定枣仁安神颗粒6个成分的实际保留时间,计算各成分在各色谱柱保留时间的平均值,得到各成分的标准保留时间,选取斯皮诺素(峰1)、五味子乙素(峰6)作为双标化合物,使用双标线性校正法准确定位各成分色谱峰,预测成分在未知色谱柱的保留时间并进行方法学验证。以五味子乙素为参照物,计算其余各成分的相对校正因子,对各成分进行定量。结果双标线性校正法能够准确地预测待测组分在未知色谱柱上的保留时间;斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、迷迭香酸、五味子醇甲和丹酚酸B相对于五味子乙素的相对校正因子分别为0.7342、0.6063、0.5664、0.9975及0.7773,其RSD均小于1%;各成分含量计算值和实测值无显著差异。结论双标多测法同时测定枣仁安神颗粒中6个成分可行且准确。

替代对照品法用于丹参和复方丹参片含量测定的研究

目的:建立HPLC替代对照品法测定丹参和复方丹参片的含量。方法:选取对羟基苯甲酸甲酯作为丹参和复方丹参片含量测定对照品丹酚酸B的替代对照品,在不同的条件下测定替代对照品相对对照品的校正因子,利用校正因子和替代对照品对羟基苯甲酸甲酯进行丹参和复方丹参片中丹酚酸B的含量测定。结果:丹酚酸B和对羟基苯甲酸甲酯进样量分别在0.09～2.71μg(r=1.0000)和0.015～0.45μg(r=1.0000)内与峰面积呈良好的线性关系(n=7),测得校正因子f=5.2884,用替代对照品测定方法测得回收率为100.5%(n=9)。结论:本文首次在高效液相色谱仪上使用替代对照品测定了丹参和复方丹参片中丹酚酸B的含量,结果证明用替代对照品对于丹参和复方丹参片进行药品质量控制是可行的、实用的。

PET/PHB共聚酯序列结构研究

本文在290℃用熔融共缩聚制备了系列PET/PHB共聚酯,用高分辨核磁共振(400MHz ~1H-NMR)研究了PET/PHB共聚酯的序列分布规律。结果表明,PHB组分增加,其选择因子m线性降低。在此基础上,得到了PET、PHB链段平均长度,无规度等一系列序列结构参数,其分布规律与一般共缩聚相似。其无规度比270℃共缩聚样品高。并根据PHB链节数≥4才形成PHB相这一前提,估算了共聚酯PHB相(即液晶相主要成分)理论含量与PHB组分的关系:W_(PHB)％(?)104.0x_(PHB)^(4.40)。最后推测了对PET/PHB共聚酯形成液晶相最低PHB理论含量为1.1％wt。

Effect of adrenalectomy on rat epididymidis

AIM: To investigate the effect of adrenalectomy (ADX) on the epididymidis of Sprague-Dawley rats. METHODS: The histological, biochemical (cholesterol protein, zinc, copper, alkaline and acid phosphatase aryl sulphatase, lactic dehydrogenase and leucine amino peptidase) and hormonal (FSH, LH and testosterone) changes of caput and cauda epididymis in ADX rats were observed. RESULTS: Organ wet weight, histological studies and morphometric measurements indicated a cellular degeneration in caput and cauda epididymis of ADX rats. Serum testosterone level was significantly lower in ADX than in sham-operated rats, while the serum FSH and LH were below the detection limit of 1 mIU/mL. The enzymatic activity was higher in ADX than in sham-operated rats. Epididymal zinc level increased whereas copper level decreased in ADX rats compared to the sham-operated. CONCLUSION: Adrenalectomy leads to degeneration of caput and cauda epididymidis epithelial cells as a result of decreased supply of testosterone.

Effect of basic fibroblast growth factor on the expression of glial fibrillary acidic protein after tractive spinal cord injury in rats

OBJECTIVE: To investigate the effects of basic fibroblast growth factor (bFGF) on the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) after tractive spinal cord injury in rats and to explore the recovery of spinal cord function. METHODS: The rats were subjected to tractive spinal cord injury at T13-L2. Cortical somatosensory-evoked potential (CSEP) was closely monitored and when P1-N1 wave amplitude decreased to 70% of that before operation, a small-bore catheter was inserted below the injured plane through subarachnoid cavity. In the treatment groups, 20 microl of bFGF solution (containing 20 microg of bFGF) was injected through the catheter right after the operation and 1, 2, 3, 4, 8, 12 and 24 h postoperatively. In the control group, same volume of normal saline was injected and every four rats were killed at 1, 4, 7, 14 and 21 d after the operation. Combined behavior score (CBS) and electro-physiological examination were adopted to evaluate function recovery. Expression of GFAP was observed by immuno-histochemical staining and was analyzed quantitatively by computer image analysis. RESULTS: There was statistically significant difference in GFAP-positive cells between bFGF treatment group and the control group (P

以橙皮苷为对照品的内加入法测定甘草中甘草苷和甘草酸含量

目的建立测定甘草中甘草苷和甘草酸含量的替代对照品法。方法以橙皮苷为替代对照品,通过测定甘草苷和甘草酸铵相对橙皮苷的校正因子,利用相对校正因子计算甘草中甘草苷和甘草酸的含量。色谱柱为Welch Ultimate C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH至2.5)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为276 nm(甘草苷)、284 nm(橙皮苷)、252 nm(甘草酸铵),进样量为10μL,柱温为30℃。结果甘草苷、橙皮苷、甘草酸铵的进样量分别在0.0830~1.0381μg、0.0987~1.2337μg、0.2165~2.7063μg范围内与其峰面积(r=0.9995,0.9994,0.9997)线性关系良好;甘草苷和甘草酸铵与橙皮苷的相对校正因子的平均值分别为1.0813和0.4495;甘草苷和甘草酸的平均加样回收率分别为99.62%和98.44%,RSD分别为0.87%和1.19%(n=6)。结论该方法经济快速,可行实用,准确度高,重复性好,可用于甘草中甘草苷和甘草酸的含量测定。

STUDIES ON SEQUENCE STRUCTURE OF PET/PHB COPOLYESTERS

In this paper,the sequence distribution in the copolyester made from polyethyleneterephthalate （PET） and p-hydroxybenzoic acid （PHB） at 290℃has been investigated by 400MHz 1H-NMR.It has been found that reference factor m of PET/PHB copo!yester linearly de-creases when PHB molar fraction increases.In addition,a series of sequence structure parameters,such as PET,PHB segment mean length,randomness,etc.are calculated from a probability modelby m,XPHB%.This copolyester made at 290℃ is found to be nearer to that of completely randomcopolymer compared with that of the eopolyester made at 270℃,as in the case of the generalcopolycondensation.PHB-rich phase is formed only when PHB per number≥4,basing on thisconclusion,we establish the relationship between theoretical contents of PHB-rich phaseWPHB% and PHB contents XPHB% :WPHB%=104.0XPHB4.40 The minimum PHB-rich phase con-tent forming liquid crystal phase is 1.1% wt.

替代对照品法测定复方甘草口服溶液中甘草苷和甘草酸含量

目的建立以橙皮苷为替代对照品测定复方甘草口服溶液中甘草苷和甘草酸含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法采用替代对照品法,以橙皮苷为替代对照品,测定甘草酸铵与橙皮苷、甘草苷与橙皮苷的相对校正因子,利用相对校正因子计算复方甘草口服溶液中甘草酸和甘草苷含量。色谱柱采用Welch Ultimate C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%三乙胺溶液(用磷酸调pH至2.5)-乙腈(梯度洗脱),检测波长分别为276 nm(甘草苷)、284 nm(橙皮苷)、252 nm(甘草酸铵),柱温为30℃,流速为1.0 m L/min。结果橙皮苷、甘草苷、甘草酸铵的进样量分别在0.033 2~0.498 3μg(r=0.999 5),0.049 3~0.740 2μg(r=0.999 2),0.443 0~6.495 1μg(r=0.999 3)范围内与峰面积线性关系良好;甘草苷和甘草酸铵与橙皮苷的相对校正因子分别为1.081 4和0.449 2;甘草苷和甘草酸的平均回收率分别为98.94%和99.19%(n=6)。结论该方法成本低,试验时间短,仪器噪音小,适用于测定复方甘草口服溶液中甘草苷和甘草酸含量。

双标多测法在脑心通胶囊5个成分含量测定中的应用

目的 建立脑心通胶囊中羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B和藁本内酯5个成分的双标多测法,验证该方法在脑心通胶囊质量评价中应用的准确性和可行性。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,以乙腈为流动相A,0.5%甲酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为1 ml/min,检测波长403 nm(羟基红花黄色素A)、240 nm(芍药苷)、280 nm(丹酚酸B)、324 nm(阿魏酸和藁本内酯),柱温35℃。采用6根不同型号的C18色谱柱,测定脑心通胶囊5个成分的实际保留时间,计算各成分在各色谱柱保留时间的平均值,得到各成分的标准保留时间,选取羟基红花黄色素A(峰1)、藁本内酯(峰5)作为双标化合物,使用双标线性校正法准确定位各成分色谱峰,预测各成分在未知色谱柱的保留时间并进行方法学验证。以阿魏酸为参照物,计算其余各成分的相对校正因子,对各成分进行定量。结果 双标线性校正法能准确地预测待测组分在未知色谱柱上的保留时间。羟基红花黄色素A、芍药苷、丹酚酸B和藁本内酯对于阿魏酸的相对校正因子分别为0.728,1.094,1.553和1.339,其RSD均小于1%。各成分含量计算值和实测值无显著差异。结论 双标多测法同时测定脑心通胶囊中5个成分可行且准确。

替代对照品法测定复方甘草酸苷胶囊中甘草酸苷含量

目的:建立替代对照品测定复方甘草酸苷胶囊中甘草酸苷含量的方法。方法:以水杨酸为替代对照品,采用HPLC法,采用Welch Ultimate C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH值为2.3)(38:62)为流动相,在检测波长252 nm(甘草酸苷)/304 nm(水杨酸),柱温30℃的条件下,测定水杨酸与甘草酸苷的相对校正因子(f),利用相对校正因子(f)计算复方甘草酸苷胶囊中甘草酸苷含量。结果:水杨酸与甘草酸苷分别在35.23~352.32μg·mL-1(r=0.9999)和55.42~554.20μg·mL-1(r=1.0000)浓度范围内与峰面积有良好的线性关系;甘草酸苷的平均回收率为100.47%;水杨酸与甘草酸苷的相对校正因子(f)为1.7621。结论:以水杨酸作为替代对照品,用HPLC测定复方甘草酸苷胶囊中甘草酸苷的含量的方法经济、快速、可行,可作为复方甘草酸苷胶囊中甘草酸苷含量的测定方法。

具有区分力的叶酸片体外溶出度测定方法研究

目的建立叶酸片的溶出测定方法,评价自制制剂与参比制剂在4种不同pH溶出介质中的体外溶出行为。方法以摇瓶法考察叶酸在不同pH溶液中的溶解度及稳定性;采用桨法,转速为75 r/min,测定叶酸片在不同介质中的溶出行为,获得具有区分力的溶出曲线;采用相似因子法评价自制制剂与参比制剂溶出曲线的相似性。结果叶酸的溶解度具有pH依赖性,在4种溶出介质中8 h内稳定性较好,自制制剂与参比制剂在4种溶出介质中的溶出曲线均具有较好的相似性。结论经优化后的叶酸片溶出曲线测定方法区分力良好,可为叶酸片体外溶出评价和仿制药一致性评价提供参考。

对照品替代法用于绿原酸含量测定的研究

目的建立对照品替代法测定中药饮片或中成药中绿原酸含量的方法。方法以对乙酰氨基酚为对照品替代,采用高效液相色谱法(HPLC),Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长240 nm,流速1.0 ml/min,柱温30℃。利用相对斜率法测定对乙酰氨基酚与绿原酸的相对校正因子(f),计算供试品中绿原酸的含量。结果对乙酰氨基酚和绿原酸分别在5.36~107.19μg/ml(r=1.0000),5.13~102.60μg/ml(r=0.9999)浓度范围内线性关系良好;对照品替代法和外标法的平均回收率分别为98.33%,98.65%;RSD分别为1.34%,1.30%;相对校正因子f=0.5119;不同仪器及色谱柱、流速、柱温、不同测定波长对f值无显著影响;将两法的结果进行对比无显著性差异。结论以对乙酰氨基酚替代绿原酸作为对照品,采用HPLC测定绿原酸的含量进行质量控制是可行的,可用于含绿原酸成分的中药饮片及中成药的含量测定。

一测多评法同时测定保肾乙丸中5种蒽醌类成分的含量

目的：建立同时测定保肾乙丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种蒽醌类成分含量的方法。方法：采用高效液相色谱法,以大黄素为基准峰,分别计算其与芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚的相对校正因子（RCF）,通过RCF计算保肾乙丸中上述5种蒽醌类成分的含量。色谱柱为Waters Symmetry C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（70∶30,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚检测质量浓度线性范围分别为5.83186.6μg/ml（r=0.999 7）、9.39300.5μg/ml（r=0.999 5）、9.55305.6μg/ml（r=0.999 9）、10.23327.4μg/ml（r=0.999 9）、4.01128.4μg/ml（r=0.999 4）;定量限分别为364.4、880.2、596.9、319.7、501.3 ng,检测限分别为109.3、293.4、179.1、95.91、150.4 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2.0%;加样回收率分别为96.38%100.90%（RSD=1.62%,n=6）、97.72%101.75%（RSD=1.44%,n=6）、97.66%102.34%（RSD=1.63%,n=6）、97.33%101.91%（RSD=1.75%,n=6）、97.78%100.74%（RSD=1.19%,n=6）。大黄素与芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚间的RCF分别为1.217 7、1.153 4、1.424 2、1.034 5。结论：该方法准确可靠、操作简便快捷,可用于同时测定保肾乙丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种蒽醌类成分的含量。

双标多测法测定丹参配方颗粒中6个酚酸类成分

目的:建立丹参配方颗粒中丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸及丹酚酸B 6个成分的双标多测法,验证该方法在丹参配方颗粒质量评价中应用的准确性和可行性。方法:采用HPLC法,以乙腈为流动相A,以0.05%的磷酸溶液作为流动相B,梯度洗脱(0~15 min,10%A→20%A;15~40 min,20%A→25%A;40~50 min,25%A→30%A;50~50.1 min,30%A→10%A;50.1~60 min,10%A),流速1 mL·min^(-1),柱温40℃,检测波长286 nm,进样量10μL。采用4根型号不同的C18色谱柱,测定丹参配方颗粒6个成分的实际保留时间,计算各成分在各色谱柱保留时间的平均值,得到各成分的标准保留时间。选取原儿茶醛(峰2)和迷迭香酸(峰4)作为双标化合物,使用双标多测法准确定位各成分色谱峰,预测成分在未知色谱柱的保留时间并进行方法学验证。以迷迭香酸为参照物,计算其余各成分的相对校正因子,对各成分进行定量并与外标法所测结果进行比较。结果:收集的6批样品中丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸的含量范围分别为3.82~6.54 mg·g^(-1)、0.44~1.14 mg·g^(-1)、42.75~179.49 mg·g^(-1)、2.20~2.63 mg·g^(-1)、3.11~3.49 mg·g^(-1)、42.41~53.74 mg·g^(-1)。双标线性校正法能够准确地预测待测组分在未知色谱柱上的保留时间,且预测结果与实际值的偏差小于相对保留时间法。使用相对校正因子法和外标法的含量结果无显著性差异。结论:双标多测法同时测定丹参配方颗粒中6个酚酸类成分可行且准确,且该法操作简便,准确度高,经济适用,为丹参配方颗粒中6个酚酸类的含量测定提供了新的思路。

丹参多酚酸对照提取物的质量控制

目的:建立丹参多酚酸对照提取物多指标含量测定及指纹图谱的质量控制方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸-水溶液为流动相A,0.1%甲酸-乙腈溶液为流动相B,梯度洗脱(0~30 min,20%~21.5%B;30~35 min,21.5%~25%B;35~45 min,25%~40%B;45~50 min,40%~95%B),柱温30℃,流速1 mL·min^-1,检测波长288 nm;采用浓度法测定咖啡酸,丹酚酸E,迷迭香酸,紫草酸,丹酚酸B,丹酚酸Y的相对校正因子,并测定丹参多酚酸对照提取物各指标成分含量,与单体对照品外标法测定结果进行比较;同时建立指纹图谱方法,并对10批次提取物进行相似度评价。结果:咖啡酸,丹酚酸E,迷迭香酸,紫草酸,丹酚酸B,丹酚酸Y在各自的检测质量浓度范围内线性关系良好(r>0.9999),进样精密度RSD在0.1%~1.2%,重复性RSD在1.2%~1.6%,6种成分的加样回收率在82.03%~98.68%,样品溶液在36 h内各成分稳定性良好。经测定各指标成分的相对校正因子分别为咖啡酸(2.92),丹酚酸E(1.10),迷迭香酸(1.61),紫草酸(1.07),丹酚酸B(1.00),丹酚酸Y(0.83)。考察不同方法、浓度、仪器、色谱柱、波长等因素的影响,发现测得的相对校正因子适用性较好。校正因子法测定结果和单体对照品外标法测定结果差异较小。建立了丹参多酚酸对照提取物的HPLC特征指纹图谱,确定了5个共有特征峰,并根据对照品对色谱峰进行确认,10批次提取物指纹图谱相似度较高,质量差异较小。结论:该研究建立的多指标含量测定方法和指纹图谱方法简便、快速、准确性高、重复性好,可用于丹参多酚酸对照提取物的质量控制。

基于DRS origin的替代标准物质法研究——以超高效液相色谱测定乳香中11-羰基-β-乳香酸和11-羰基-β-乙酰乳香酸的含量为例

目的以建立乳香中11-羰基-β-乳香酸( KBA)和 11-羰基-β-乙酰乳香酸( AKBA)含量测定方法为例,探讨基于DRS origin 软件的替代标准物质法用于色谱峰定性和定量的可行性与准确性。方法使用超高效液相色谱建立含量测定方法,以AKBA为参照物,考察在19根不同C18色谱柱上使用DRS origin软件对KBA定性的准确性;考察检测波长微小变化对相对校正因子的影响,并对替代标准物质法与外标法定量结果进行比较。结果建立的方法符合方法学验证的要求,其平均回收率为100. 21%( n= 6 ), RSD = 2. 4 7 %。使用 DRS origin软件可准确定性色谱峰;该条件下测得KBA相对于AKBA的相对校正因子为0.936,且在不同条件下保持恒定;使用该相对校正因子计算所得含量与外标法所得结果无明显差异。结论本方法智能、简便、准确且成本较低,可用于乳香的含量测定。

双标多测法在党参5个成分含量测定中的应用

目的:建立双标多测法同时测定党参中腺苷、色氨酸、紫丁香苷、绿原酸、党参炔苷的含量,探索双标多测法(双标线性校正法用于色谱峰定性以及采用相对校正因子定量)在党参质量评价中应用的准确性和可行性。方法:采用HPLC法,以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,3%A→5%A;10~20 min,5%A→15%A;20~30 min,15%→25%;30~50 min,60%A),流速为1 mL·min^(-1),检测波长为257,214,218 nm,柱温25℃;在19根不同的C_(18)色谱柱上测定党参中5个成分的实际保留时间,计算各成分在各色谱柱保留时间的平均值,得到各成分的标准保留时间,选取腺苷(峰1)和紫丁香苷(峰3)作为双标化合物,使用双标线性校正法准确定位各成分色谱峰,预测成分在未知色谱柱的保留时间并与相对保留时间法进行比较。以中间峰紫丁香苷为参照物,计算其余成分的相对校正因子,对各成分进行定量,将所得结果与外标法进行比较。结果:双标线性校正法能够准确预测待测化合物在未知色谱柱的保留时间,比相对保留时间法偏差更小,适用性更强;腺苷、色氨酸、绿原酸、党参炔苷相对于紫丁香苷的相对校正因子分别0.3152、2.2654、0.5955、1.4414,RSD均小于2%;相对校正因子法和常规外标法的定量结果显示二者无显著性差异。结论:双标多测法同时测定党参5个成分,简便准确且经济实用,可更好地控制该品种质量。

双标多测法测定乳块消片中5个成分的含量

目的:建立乳块消片中5个成分(丹参素、王不留行黄酮苷、橙皮苷、丹酚酸B、丹酚酸A)的含量测定方法,探索双标多测法(双标线性校正法用于色谱峰定性以及采用相对校正因子定量)的可行性。并以5个成分的含量测定为例,比较双标线性校正法和相对保留时间法2种定性方法,以及相对校正因子法和常规外标法2种定量方法的优劣和差异。方法:采用HPLC法,以乙腈为流动相A,0.2%磷酸水溶液为流动相B,梯度洗脱(0~30 min,5%A→20%A;30~40 min,20%A→30%A;40~50 min,30%A),流速为1 mL·min-1,检测波长为282 nm,柱温为30℃。在4根不同的C18色谱柱上测定乳块消片5个成分的实际保留时间,计算各成分在各色谱柱保留时间的平均值,得到各成分的标准保留时间,选取丹参素(峰1)和橙皮苷(峰3)2个成分作为双标化合物,使用双标线性校正法准确定位各成分色谱峰,预测成分在未知色谱柱的保留时间并进行方法学验证。以中间峰橙皮苷为参照物,计算橙皮苷与其余各成分的相对校正因子,对各成分进行定量。结果:不同企业的样品中丹参素、王不留行黄酮苷、橙皮苷、丹酚酸B、丹酚酸A的含量范围分别为3.14~6.25、0.37~1.79、0.42~1.18、0.91~3.50、1.40~6.97 mg·g-1。双标线性校正法能够准确地预测待测成分在未知色谱柱上的保留时间,且预测结果与实际值的偏差小于相对保留时间法,对色谱峰的定位比相对保留时间法更加精准;以相对校正因子法和常规外标法的定量结果显示二者无显著性差异。结论:双标多测法作为一种新的替代对照品方法,能较好地运用于乳块消片多成分的测定中,值得进一步研究完善和推广。

双标多测法在柏子养心丸5个成分含量测定中的应用

目的:建立柏子养心丸中阿魏酸、桂皮醛、五味子醇甲、五味子甲素及五味子乙素5个成分的双标多测法,验证该方法在柏子养心丸质量评价中应用的准确性和可行性。方法:采用HPLC法,以乙腈为流动相A,0.1%醋酸溶液为流动相B,梯度洗脱(0~70 min,20%A;70~85 min,20%A→80%A),流速为1 mL·min^(-1),检测波长335 nm(0~31 min)、285 nm(31~52.5 min)、215 nm(52.5~85 min),柱温35℃。采用6根不同型号的C_(18)色谱柱,测定柏子养心丸5个成分的实际保留时间,计算各成分在各色谱柱保留时间的平均值,得到各成分的标准保留时间,选取阿魏酸(峰1)、五味子乙素(峰5)作为双标化合物,使用双标线性校正法准确定位各成分色谱峰,预测成分在未知色谱柱的保留时间并进行方法学验证。以阿魏酸为参照物,计算其余各成分的相对校正因子,对各成分进行定量。结果:双标线性校正法能够准确地预测待测组分在未知色谱柱上的保留时间;桂皮醛、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素相对于阿魏酸的相对校正因子分别为0.2644、0.4062、0.3772、0.3994,其RSD均小于2%;各成分含量计算值和实测值无显著差异。结论:双标多测法同时测定柏子养心丸中5个成分可行且准确。

替代对照品内加入法测定复方甘草片中的甘草苷和甘草酸

目的采用HPLC法测定复方甘草片中甘草苷和甘草酸的含量。方法采用替代对照品内加入法,以橙皮苷为替代对照品,通过测定甘草苷和甘草酸铵与橙皮苷的相对校正因子,利用相对校正因子计算复方甘草片中甘草苷和甘草酸的含量。采用Welch Ultimate C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三乙胺溶液(用磷酸调p H2.5)为流动相,梯度洗脱,甘草苷、橙皮苷、甘草酸铵的检测波长分别为276、284、252 nm,柱温30℃,流速1.0 m L·min^-1。结果33.22~498.30 ng甘草苷、49.35~740.20 ng橙皮苷、0.4330~6.4951μg甘草酸铵与其峰面积有良好的线性关系(r分别为0.9995、0.9992、0.9993);甘草苷和甘草酸铵与橙皮苷的相对校正因子分别为1.0814、0.4492;甘草苷和甘草酸的平均回收率分别为98.82%、99.05%。结论所用方法经济、快速、实用,可用于复方甘草片中甘草苷和甘草酸的含量测定。