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Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 miR-34a-5p e2f3
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miR-30a-5p靶向E2F7阻滞A549细胞周期并抑制其增殖
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作者 鲍祯 乔亚红 《河南医学研究》 CAS 2024年第17期3106-3113,共8页
目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点... 目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-30a-5p和E2F7 mRNA 3’UTR区域的靶向关系。其次在A549细胞中分别转染miR-30a-5p模拟物(miR-30a-5p mimics)和miR-30a-5p抑制剂(miR-30a-5p inhibitor),应用CCK-8细胞计数试剂盒检测A549细胞增殖情况,流式细胞术检测A549细胞凋亡和细胞周期。qRT-PCR和免疫印迹检测细胞周期相关基因和肺腺癌相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果miR-30a-5p在A549细胞中表达水平低于BEAS-2B,且miR-30a-5p靶向结合与E2F7 mRNA 3’UTR 514-520位点,抑制E2F7表达。转染miR-30a-5p mimics抑制A549细胞增殖,并促进A549凋亡。将A549细胞周期阻滞在G 1期。调控肺腺癌相关基因TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达水平。结论非小细胞肺癌A549细胞中miR-30a-5p通过靶向负调控E2F7的表达,调控TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和细胞周期。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR-30a-5p e2f7 基因表达 细胞周期 凋亡
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微RNA-142-5p与E2F7基因的关系及其影响胰腺癌增殖、侵袭、转移的机制研究
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作者 阿木提江·马合木提 郑坚江 迪里夏提·阿力木 《中国医药导报》 CAS 2023年第26期16-21,42,共7页
目的探讨微RNA-142-5p(miRNA-142-5p)与E2F7基因的关系及其影响胰腺癌(PC)增殖、侵袭、转移的机制。方法选择2016年12月至2019年1月于新疆维吾尔自治区人民医院接受手术治疗的35例PC患者的癌及癌旁组织,采用实时定量PCR检测并比较PC患... 目的探讨微RNA-142-5p(miRNA-142-5p)与E2F7基因的关系及其影响胰腺癌(PC)增殖、侵袭、转移的机制。方法选择2016年12月至2019年1月于新疆维吾尔自治区人民医院接受手术治疗的35例PC患者的癌及癌旁组织,采用实时定量PCR检测并比较PC患者癌及癌旁组织中miR-142-5p的表达情况,比较人PC细胞系(CFPAC-1、SW1990、Capan-1、PANC-1)和正常胰管上皮细胞系(HPDE)中miR-142-5p的表达情况。采用实时定量PCR检测并比较PC患者癌及癌旁组织中E2F7 mRNA的差异,比较Capan-1、PANC-1细胞E2F7 mRNA的差异,采用蛋白质印迹法比较Capan-1、PANC-1细胞中E2F7蛋白的差异。通过Starbase数据库预测miR-142-5p与E2F7基因的结合位点,同时设置转染miR-142-5p模拟物的miR-142-5p mimics组和转染无意义序列的NC组,两组分别共转染E2F7基因野生型(wt)及突变体(mut),采用双萤光素酶实验验证miR-142-5p与E2F7基因的靶向关系。将Capan-1细胞设为NC组、si-E2F7组、E2F7组及miR-142-5p mimics+E2F7组,采用CCK-8、流式细胞仪、划痕实验、Transwell实验观察各组细胞活力、凋亡、迁移、侵袭情况。选取20只雄性BALB/c裸鼠(4~6周龄)用于建立裸鼠异种移植模型,采用随机数字表法将其分为NC裸鼠组、si-E2F7裸鼠组、E2F7裸鼠组及miR-142-5p mimics+E2F7裸鼠组,每组5只。将5×10^(6)个相应处理的PC细胞与100μl的人工基膜混合后皮下注射于裸鼠前腿下方的皮肤,于注射后第30天处死四组动物,比较四组肿瘤体积及重量,采用苏木精-伊红染色观察肿瘤转移能力。结果PC患者癌组织miR-142-5p表达低于癌旁组织,E2F7 mRNA表达高于癌旁组织,CFPAC-1、SW1990、Capan-1、PANC-1细胞miR-142-5p表达低于HPDE细胞(P<0.05)。Capan-1、PANC-1细胞E2F7 mRNA及其蛋白表达高于HPDE细胞(P<0.05)。Starbase数据库分析结果显示,miR-142-5p与E2F7基因的3’非翻译区存在互补。双萤光素酶报告基因结果显示,共转染E2F7-wt后,miR-142-5p mimics组萤光素酶活性低于NC组(P<0.05);共转染E2F7-mut后,miR-142-5p mimics组萤光素酶活性与NC组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。E2F7组E2F7 mRNA及其蛋白表达、细胞活力、划痕愈合面积、相对侵袭细胞数均高于NC组,细胞凋亡率低于NC组(P<0.05)。miR-142-5p mimics+E2F7组E2F7mRNA及其蛋白表达、细胞活力、划痕愈合面积、相对侵袭细胞数均低于E2F7组,细胞凋亡率高于E2F7组(P<0.05)。E2F7裸鼠组肿瘤体积、重量高于NC裸鼠组,miR-142-5p mimics+E2F7裸鼠组肿瘤体积、重量低于E2F7裸鼠组(P<0.05)。苏木精-伊红染色显示,E2F7裸鼠组肿瘤具有较强的转移能力,而miR-142-5p mimics+E2F7裸鼠组肿瘤的转移能力较差。结论miR-142-5p可能通过靶向E2F7基因影响PC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。 展开更多
关键词 微RNA-142-5p e2f7基因 胰腺癌 细胞增殖 细胞侵袭
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红景天苷通过miRNA-210-3p/E2F3抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移 被引量:4
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作者 杨琪 明昱均 +2 位作者 王秀娟 蒋莉 陈绍平 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第4期625-631,共7页
目的:探讨红景天苷(salidroside,Sal)通过miRNA-210-3p/E2F3对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法:通过生物信息网站分析miR-210-3p及其靶基因在肺腺癌组织和正常组织中的表达及生存... 目的:探讨红景天苷(salidroside,Sal)通过miRNA-210-3p/E2F3对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法:通过生物信息网站分析miR-210-3p及其靶基因在肺腺癌组织和正常组织中的表达及生存影响。采用免疫组化法检测肺腺癌组织和正常组织中E2F3蛋白的表达;qRT-PCR检测NSCLC细胞中miR-210-3p和E2F3基因表达;Western blot检测NSCLC细胞中E2F3蛋白表达;CCK-8、细胞划痕及克隆形成实验分别检测红景天苷和miR-210-3p对NSCLC细胞增殖、迁移及克隆形成的影响。结果:生物信息网站显示miR-210-3p和E2F3在肺腺癌组织中高表达,且与不良预后相关。Sal以时间-浓度依赖抑制NSCLC细胞的增殖活性(P<0.05),并显著降低NSCLC细胞的迁移及克隆形成能力(P<0.05),而低浓度Sal对正常肺上皮细胞的增殖无明显抑制效果。miRNA-210-3p和E2F3表达在NSCLC细胞中上调(P<0.05),Sal可抑制二者表达(P<0.05)。与对照组比较,miR-210-3p inhibitor组E2F3表达上调(P<0.05),miR-210-3p mimics组E2F3表达被抑制(P<0.05),Sal与miR-210-3p mimics联用进一步抑制了miR-210-3p mimics所致的E2F3表达下调和细胞增殖和迁移的增强作用(P<0.05)。结论:miR-210-3p和E2F3在肺腺癌中高表达,Sal可通过时间-浓度依赖负调控miRNA-210-3p/E2F3影响NSCLC细胞的生物学行为,发挥抗癌作用。 展开更多
关键词 红景天苷 肺癌 miRNA-210-3p e2f3 增殖 迁移
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MiR-144-3p调控E2F8对肾透明细胞癌增殖、凋亡的影响
5
作者 田捷 余黄琴 +2 位作者 周敏 郭龙 刘飞 《实用临床医学(江西)》 CAS 2023年第3期18-25,共8页
目的研究miR-144-3p对肾透明细胞癌(KIRC)增殖、凋亡的影响并探究其分子机制.方法检测肾小管上皮细胞HK2和KIRC细胞系786-O、ACHN、OS-RC-2中miR-144-3p、E2F8 mRNA和E2F8蛋白的表达差异;检测KIRC组织和癌旁组织中miR-144-3p和E2F8 mRN... 目的研究miR-144-3p对肾透明细胞癌(KIRC)增殖、凋亡的影响并探究其分子机制.方法检测肾小管上皮细胞HK2和KIRC细胞系786-O、ACHN、OS-RC-2中miR-144-3p、E2F8 mRNA和E2F8蛋白的表达差异;检测KIRC组织和癌旁组织中miR-144-3p和E2F8 mRNA的表达差异.采用荧光素酶报告实验验证E2F8 mRNA和miR-144-3p的互作关系.分别在786-O细胞中过表达miR-144-3p和沉默E2F8,采用WB检测增殖、凋亡相关蛋白的表达;同时在786-O细胞中过表达miR-144-3p和过表达E2F8,并检测增殖、凋亡相关蛋白的表达;分别采用CCK8法和流式细胞术检测上述转染细胞的增殖和凋亡.结果与HK2细胞相比,KIRC细胞系786-O、ACHN、OS-RC-2中miR-144-3p表达水平较低(P<0.001),与E2F8表达水平呈负相关;与癌旁组织相比,KIRC组织中miR-144-3p表达水平较低(P<0.001),E2F8表达水平较高(P<0.01).过表达miR-144-3p可以抑制786-O细胞增殖并促进其细胞凋亡,沉默E2F8也可以达到相同性质的效果.过表达E2 F8可以逆转过表达miR-144-3p对786-O细胞增殖和凋亡的影响.荧光素酶报告实验证实miR-144-3p靶向调控基因E2F8.结论miR-144-3p可以通过调控基因E2F8抑制KIRC肿瘤细胞786-O的增殖和促进其细胞凋亡. 展开更多
关键词 miR-144-3p e2f8 KIRC 增殖 凋亡
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miR-144-3p靶向E2F8抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭并阻滞细胞周期
6
作者 宋世伟 李景武 刘晓辉 《生命科学研究》 CAS 2023年第6期479-487,共9页
为了探究miR-144-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的作用机制,本研究基于多个数据库对miR-144-3p和其下游靶基因在肺腺癌组织中的表达水平进行了预测;通过生物信息学方法和文献调研,确定了E2F转录因子8(E2F transcription facto... 为了探究miR-144-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的作用机制,本研究基于多个数据库对miR-144-3p和其下游靶基因在肺腺癌组织中的表达水平进行了预测;通过生物信息学方法和文献调研,确定了E2F转录因子8(E2F transcription factor 8,E2F8)为miR-144-3p的下游靶基因,并通过双荧光素酶实验对miR-144-3p和E2F8的靶向结合关系进行了验证;然后,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)、免疫印迹分析(Western-blot)、细胞毒性检测(Cell Counting Kit-8 assay,CCK-8 assay)、克隆形成、侵袭能力测定和流式细胞术等实验,对miR-144-3p和E2F8在肺腺癌中的调控机制进行了探究。结果显示,miR-144-3p在肺腺癌组织和细胞中呈显著低表达,而E2F8则显著高表达,两者存在靶向关系;过表达miR-144-3p或敲低E2F8能抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭并阻滞细胞周期于G1期。上述结果表明,miR-144-3p通过负调控E2F8抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭能力,并阻滞细胞周期于G1期,从而抑制肺腺癌细胞的恶性进展。这为肺癌新检测、治疗手段的开发提供了参考依据。 展开更多
关键词 miR-144-3p e2f转录因子8(e2f8) 肺腺癌(LUAD) 增殖 侵袭
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LncRNA NEAT1作为ceRNA解除miR-205-5p对E2F1的靶向作用
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作者 钱庆增 吴于婷 +7 位作者 王云宇 黄仕艺 孟春燕 裴盛斐 王雪 曹向可 冯福民 王彬 《河北医药》 CAS 2023年第23期3545-3549,共5页
目的探讨LncRNA NEAT1作为ceRNA解除miR-205-5p对E2F1的靶向作用。方法培养MH-S肺巨噬细胞,转染siCtrl、silncRNA NEAT1、silncRNA NEAT1+miR-205-5p抑制剂后,qRT-PCR检测E2F1的mRNA转录水平,WB检测E2F1的蛋白水平;并用RIP和RNA pull-d... 目的探讨LncRNA NEAT1作为ceRNA解除miR-205-5p对E2F1的靶向作用。方法培养MH-S肺巨噬细胞,转染siCtrl、silncRNA NEAT1、silncRNA NEAT1+miR-205-5p抑制剂后,qRT-PCR检测E2F1的mRNA转录水平,WB检测E2F1的蛋白水平;并用RIP和RNA pull-down检测lncRNA NEAT1和miR-205-5p的结合情况。建立矽肺和对照小鼠模型,并尾静脉注射小鼠模型(siCtrl、silncRNA NEAT1、silncRNA NEAT1+miR-205-5p抑制剂),qRT-PCR检测E2F1的mRNA转录水平,WB检测E2F1的蛋白水平。结果与siCtrl组(1.15±0.10)比较,转染silncRNA NEAT1后E2F1表达(0.38±0.08)下调;与silncRNA NEAT1组比较,转染silncRNA NEAT1+miR-205-5p抑制剂后E2F1表达(0.58±0.10)上调,差异有统计学意义(P<0.01)。抗AGO2抗体可以将lncRNA NEAT1沉淀下来,表明lncRNA NEAT1可以与AGO2形成复合物,竞争性结合miR-205-5p。与NEAT1-Mut组(1.04±0.05)、NEAT1-NC组(0.99±0.04)比较,NEAT1处理后miR-205-5p(3.90±0.10)显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论LncRNA NEAT1可作为ceRNA,解除miR-205-5p对E2F1的靶向作用。 展开更多
关键词 LncRNA NeAT1 ceRNA miR-205-5p e2f1 巨噬细胞
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Research and Practice of the P.E. Information Teaching Design System
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作者 Xi Jianping 《International English Education Research》 2014年第2期93-96,共4页
In this paper, the physical education information teaching design system is researched and developed based on VB6.0 optimization platform. According to the national physical education and health course standards and t... In this paper, the physical education information teaching design system is researched and developed based on VB6.0 optimization platform. According to the national physical education and health course standards and the fundamental theories of the constructivisrn, the author adopts the modular-design development method to design two functional areas which are the displaying of the teaching design contents and the online information database (nine modules in total) on the basis of the P.E. teaching design flow. Importantly, this system features the compatibility, scalability and practical applicability, and can effectively improve the ability of P.E. teachers to design their teaching, and hence provides a guarantee for the improvement of teaching quality and efficiency. 展开更多
关键词 Information teaching Design SYSTeM p.e. Constmctivism
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Analysis on the Optimization of the P.E. Course Teaching Plan in Colleges and Universities
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作者 Dongsheng WANG Zhijun WANG Jian ZUO 《International Journal of Technology Management》 2013年第5期111-113,共3页
In the new period, the physical education in colleges and universities is of greater and greater significance for the enhancement of students' learning efficiency. In this paper, the current situation of the current ... In the new period, the physical education in colleges and universities is of greater and greater significance for the enhancement of students' learning efficiency. In this paper, the current situation of the current physical education is analyzed, and also related suggestions on the optimization of the P.E. course teaching plan are proposed. 展开更多
关键词 Colleges and Universities p.e. Courses teaching plan Suggestions on the Optimization
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膀胱移行细胞癌E2F3、miR-17-5p、miR-20a的表达及相关性分析 被引量:3
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作者 任海林 孙岩 +1 位作者 李世斌 韩瑞发 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第20期23-25,共3页
目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western ... 目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western blot检测E2F3蛋白的表达。结果与正常膀胱黏膜比较,膀胱移行细胞癌组织及5637、T24细胞系中E2F3、miR-17-5p和miR-20a均高表达(P<0.05)。E2F3表达随着病理分级的升高逐步增多,miR-20a表达随病理分级的升高有降低趋势。5637细胞系相对T24细胞系高表达E2F3(P<0.05)。结论膀胱移行细胞癌中miR-17-5p、miR-20a和E2F3均高表达,miR-20a和miR-17-5p的表达与E2F3的增高密切相关。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 e2f3 miR-17-5p miR-20a
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P14ARF和E2F1在结直肠肿瘤中的表达及意义 被引量:3
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作者 沈勤 陈德滇 +2 位作者 高倩 周晓军 王芳 《医学研究生学报》 CAS 2009年第1期16-19,23,114,共6页
目的:观察P14ARF、E2F1蛋白在结直肠肿瘤的表达,明确其对肿瘤发生及侵袭发展的影响。方法:应用免疫组化方法检测尸检正常结直肠组织6例,结肠腺瘤30例,不伴淋巴结转移(无LNM)结直肠癌35例,伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠癌30例,后者再分为... 目的:观察P14ARF、E2F1蛋白在结直肠肿瘤的表达,明确其对肿瘤发生及侵袭发展的影响。方法:应用免疫组化方法检测尸检正常结直肠组织6例,结肠腺瘤30例,不伴淋巴结转移(无LNM)结直肠癌35例,伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠癌30例,后者再分为手术切缘组织、结直肠癌组织、淋巴结转移癌组织,共6组的P14ARF、E2F1蛋白表达情况,采用半定量和图像分析定量测定含量。结果:①结直肠正常黏膜组织、腺瘤组织、癌组织P14ARF、E2F1的表达阳性率逐渐减少,差异存在统计学意义(P<0.05)。②P14ARF、E2F1在伴有淋巴结转移、肝转移的癌组织内表达阳性率与不伴转移的癌组织之间差异无统计学意义(P>0.05)。③P14ARF、E2F1蛋白表达在不同临床病理特征的关系之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①P14ARF、E2F1具有抑制癌发生作用,蛋白异常仅是结直肠癌癌变早期事件,与淋巴结、远处器官转移等侵袭活动无关,与临床病理特征无关。②P14ARF、E2F1相互协同抑制细胞生长和诱导凋亡,因而可以作为治疗结直肠癌的新靶点。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 p14ARf e2f1 抑制肿瘤发生
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EB病毒活化端粒酶与p16^(INK4A)/E2F1调控的关系 被引量:2
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作者 杨静 邓琳 +2 位作者 丁琳 柳息洪 曹亚 《现代肿瘤医学》 CAS 2003年第3期164-165,共2页
目的 探讨EB病毒诱导人鼻咽上皮细胞永生化过程中 ,EB病毒活化端粒酶与EB病毒介导的细胞周期紊乱的关系。方法 利用WesternBlotting检测p16 INK4A和E2F1蛋白表达情况 ;利用hTERT -SEAP报道基因和端粒酶PCR -ELISA分别检测hTERT表达和... 目的 探讨EB病毒诱导人鼻咽上皮细胞永生化过程中 ,EB病毒活化端粒酶与EB病毒介导的细胞周期紊乱的关系。方法 利用WesternBlotting检测p16 INK4A和E2F1蛋白表达情况 ;利用hTERT -SEAP报道基因和端粒酶PCR -ELISA分别检测hTERT表达和端粒酶活性。结果 EB病毒下调p16 INK4A表达 ,并上调E2F1表达 ;与之相关 ,EB病毒诱导hTERT表达 ,并活化端粒酶活性。 展开更多
关键词 eB病毒 端粒酶活化 p16^INK4A 细胞周期紊乱 e2f1 鼻咽癌
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miR-3691-3p靶向调控E2F3/PRDM1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:4
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作者 孙莉 牛涵波 +1 位作者 徐义英 孙茂民 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2018年第1期22-27,共6页
目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-36... 目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-3691-3p mimic后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测候选靶基因E2F3和PRDM1 mRNA和蛋白表达的变化;人工合成候选靶基因的小干扰RNA(E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA)转染入DU145细胞中,采用实时荧光定量PCR检测siRNA在细胞中的转染率;DU145细胞株分别转染阴性对照siRNA、E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA后,采用MTT、Transwell、划痕实验检测DU145细胞株增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:随着miR-3691-3p mimic转染浓度增高,在DU145细胞株中E2F3和PRDM1 mRNA的表达量逐渐下降(P<0.01或P<0.05),两个蛋白的表达水平均明显降低(P<0.01)。与阴性对照组相比,转染E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA的DU145细胞株中,E2F3和PRDM1在mRNA水平上表达量显著减少(E2F3:t=31,P<0.01;PRDM1:t=10.44,P<0.01)。且转染E2F3 siRNA的DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(均P<0.01);而转染PRDM1 siRNA的DU145细胞增殖和侵袭能力显著下降(均P<0.01),迁移能力没有明显变化(P>0.05)。结论:在DU145细胞中,低水平的miR-3691-3p通过靶向调控E2F3和PRDM1的增高来增强细胞的生物学特性。 展开更多
关键词 前列腺癌 DU145细胞株 miR-3691-3p e2f3 pRDM1 生物学特性
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miR-449b通过E2F3-p53途径抑制子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B的生长 被引量:2
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作者 陈慧君 黄亦波 +1 位作者 林蓉蓉 郑飞云 《医学研究杂志》 2015年第8期41-45,共5页
目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活... 目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活性,流式细胞仪来检测转染前后细胞凋亡情况。细胞克隆形成实验观察转染前后细胞克隆形成能力。Western blot方法检查转染前后细胞内E2F3蛋白和p53的表达情况。结果转染后实验组miR-449b表达量较NC组增加,细胞增殖能力和克隆能力减弱,而细胞凋亡增加(P<0.05)。miR-449b使E2F3表达下调,p53表达上调(P<0.05)。结论 miR-449b通过E2F3-p53途径抑制HEC-1-B细胞增殖并促进凋亡,可能作为治疗子宫内膜腺癌的新分子靶标。 展开更多
关键词 miR-449b HeC-1-B细胞 增殖 凋亡 e2f3 p53
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组织芯片研究胃肠道间质瘤中E2F1、MDM2及P53的表达及意义 被引量:1
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作者 吴红霞 郑绘霞 +5 位作者 王宏坤 肖虹 李宁 程彩霞 赵玉泽 梁建芳 《山西医科大学学报》 CAS 2010年第5期418-422,共5页
目的探讨E2F1、MDM2及P53在胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)中的表达及与GIST临床病理特征和预后的关系。方法利用组织芯片技术及免疫组化EnVision法检测123例GIST中E2F1、MDM2及P53的表达情况,分析三者表达与临床... 目的探讨E2F1、MDM2及P53在胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)中的表达及与GIST临床病理特征和预后的关系。方法利用组织芯片技术及免疫组化EnVision法检测123例GIST中E2F1、MDM2及P53的表达情况,分析三者表达与临床病理特征的关系,并对三者与GIST预后的关系进行统计学分析。结果 123例GIST中108例有三种蛋白均可评估,108例中E2F1、MDM2及P53蛋白三者阳性表达率分别为62.0%,43.5%和57.4%。三者表达均与NIH分级呈显著正相关(均P<0.001);在不同发生部位、是否坏死及有无转移复发之间差异均有显著性意义(均P<0.05),且三者表达在肠道发生的GIST明显高于胃和肠道外部位(P<0.05),胃和肠道外相比差异无统计学意义(P>0.05);而在不同发生年龄及不同细胞类型间相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 E2F1、MDM2及P53表达与GIST预后有关,三者对评价GIST预后是非常有意义的标记物。 展开更多
关键词 胃肠道间质瘤 组织芯片 e2f1 MDM2 p53 免疫组化 预后
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P14ARF、E2F1对结直肠癌发生发展的影响 被引量:2
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作者 沈勤 王芳 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第7期1391-1393,共3页
肿瘤抑制因子P14ARF通过p53-MDM2-P14ARF细胞周期调节系统使细胞老化或凋亡,对肿瘤的发生发展起重要的抑制作用;E2F1可以作为转录因子参与调节细胞周期,然而高表达的E2F1也能诱导许多类型的细胞凋亡,因此E2F1具有促使癌变和诱导凋亡双... 肿瘤抑制因子P14ARF通过p53-MDM2-P14ARF细胞周期调节系统使细胞老化或凋亡,对肿瘤的发生发展起重要的抑制作用;E2F1可以作为转录因子参与调节细胞周期,然而高表达的E2F1也能诱导许多类型的细胞凋亡,因此E2F1具有促使癌变和诱导凋亡双向性质;P14ARF和E2F1直接影响肿瘤的发生、发展和预后,这关系着患者治疗方案的选择,因而日益受到重视。本文章旨在探讨P14ARF、E2F1与人结直肠癌发生发展的关系,就其机制和影响综述如下。 展开更多
关键词 p14ARf e2f1 结直肠癌
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宫颈鳞癌中癌基因C-myc与相关蛋白E_2F-1P15^(INK4b)的表达及临床意义的研究 被引量:1
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作者 李雪婷 李丽 +1 位作者 李素红 王全红 《中国药物与临床》 CAS 2013年第2期162-165,I0002,共5页
目的探讨宫颈鳞状细胞癌癌变过程中C-myc基因与其相关蛋白E2F-1、P15INK4b的表达以及与宫颈鳞癌临床病理特征的相关性。方法选取60份宫颈鳞癌、61份宫颈上皮内瘤变(CIN)组织(其中CINⅠ~Ⅱ级31份,CINⅢ级30份)和21份正常宫颈组织。所有... 目的探讨宫颈鳞状细胞癌癌变过程中C-myc基因与其相关蛋白E2F-1、P15INK4b的表达以及与宫颈鳞癌临床病理特征的相关性。方法选取60份宫颈鳞癌、61份宫颈上皮内瘤变(CIN)组织(其中CINⅠ~Ⅱ级31份,CINⅢ级30份)和21份正常宫颈组织。所有病例制成组织芯片,采用原位杂交技术检测各组宫颈病变中C-mycmRNA的表达情况;免疫组织化学法(Elivison二步法)检测各组中E2F-1、P15INK4b蛋白的表达。统计学方法采用χ2检验和Spearman等级相关分析。结果随着宫颈从正常组织到发生CINⅠ~Ⅱ、CINⅢ直至发展为鳞状细胞癌,C-mycmRNA、E2F-1和P15INK4b蛋白的阳性表达率显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。C-mycmRNA在2组间的表达差异均有统计学意义。E2F-1蛋白的阳性表达在CINⅢ与宫颈鳞癌组之间差异有统计学意义。P15INK4b蛋白的阳性表达在CINⅠ~Ⅱ与CINⅢ、CINⅢ与鳞癌组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。C-mycmRNA与E2F-1、P15INK4b的阳性表达均呈正相关(P<0.01)。E2F-1与P15INK4b的阳性表达呈正相关(P<0.01)。结论 C-myc癌基因在子宫颈鳞状细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,其高表达预示子宫颈鳞状细胞的不良转化。C-myc癌基因与E2F-1、P15INK4b蛋白共同作用于CINⅢ向浸润性鳞癌的发展过程。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 基因 MYC 原位杂交 免疫组织化学 p15 e2f
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miR-3529-3p通过下调E2F3基因表达抑制卵巢癌SKOV-3细胞增殖的机制研究 被引量:1
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作者 万淑琼 鲍群丽 +3 位作者 黄耿 姜艳萍 张青冬 王楚平 《国际医药卫生导报》 2022年第1期24-27,共4页
目的探讨微小RNA(miR)-3529-3p抑制卵巢癌SKOV-3细胞增殖的作用机制。方法研究时间为2021年1月至5月。分别转染NCmimic(NC组)和miR-3529-3p mimic(miR-3529-3p组)至卵巢癌SKOV-3细胞。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染... 目的探讨微小RNA(miR)-3529-3p抑制卵巢癌SKOV-3细胞增殖的作用机制。方法研究时间为2021年1月至5月。分别转染NCmimic(NC组)和miR-3529-3p mimic(miR-3529-3p组)至卵巢癌SKOV-3细胞。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染效率。CCK-8法检测每组细胞的光密度值。集落形成实验检测每组细胞的集落形成数。miRNAMap数据库预测miR-3529-3p的靶基因。qRT-PCR和蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测靶基因的表达。采用独立样本t检验。结果miR-3529-3p组和NC组SKOV-3细胞中miR-3529-3p表达分别为(1.01±0.07)和(9.55±1.50),NC组miR-3529-3p表达显著低于miR-3529-3p组(t=5.68,P<0.01)。CCK-8法显示miR-3529-3p过表达抑制SKOV-3细胞增殖(P<0.05)。与NC组相比,miR-3529-3p组集落形成数显著减少(P<0.05)。miR-3529-3p的靶基因可能是E2F转录调节因子3(E2F transcription factor 3,E2F3)。与NC组比较,miR-3529-3p组SKOV-3细胞中E2F3基因表达明显降低(P<0.01)。结论miR-3529-3p可抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,其可能的分子机制是通过靶向抑制E2F3表达实现。 展开更多
关键词 卵巢癌 miR-3529-3p e2f转录调节因子3 细胞增殖
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E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 郭玉霞 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第4期314-316,386,共4页
目的探讨E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达并分析其临床意义。方法免疫组织化学En Vision法检测E2F1和P53蛋白在215例子宫内膜样腺癌和100例正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析二者与临床病理参数的关系。结果 E2F1和P53蛋白在... 目的探讨E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达并分析其临床意义。方法免疫组织化学En Vision法检测E2F1和P53蛋白在215例子宫内膜样腺癌和100例正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析二者与临床病理参数的关系。结果 E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达均高于正常子宫内膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);E2F1表达与肿瘤分级、FIGO分期及淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05);P53蛋白表达与FIGO分期和淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄及肿瘤分级无关(P>0.05),E2F1和P53蛋白在子宫内膜样腺癌中的表达呈显著正相关性(P<0.05)。结论 E2F1和P53蛋白表达在子宫内膜样腺癌的发展过程中起着一定的协同作用,二者过度表达的患者预后较差,联合检测对判断患者预后是非常有用的指标。 展开更多
关键词 子宫内膜样腺癌 e2f1 p53
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基于GDL非一致孔隙率的PEMFC模拟仿真 被引量:2
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作者 张智明 沈哲民 +1 位作者 商亚鹏 潘涛 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第8期35-41,共7页
目前,针对质子交换膜燃料电池(PEMFC)性能的数值模拟研究大多假设气体扩散层(GDL)的多孔介质孔隙率一致,但实际上GDL受双极板脊背压缩产生的变形会导致孔隙率的非一致性.文中针对装配压力引起的GDL变形及非一致孔隙率情况,基于有限元理... 目前,针对质子交换膜燃料电池(PEMFC)性能的数值模拟研究大多假设气体扩散层(GDL)的多孔介质孔隙率一致,但实际上GDL受双极板脊背压缩产生的变形会导致孔隙率的非一致性.文中针对装配压力引起的GDL变形及非一致孔隙率情况,基于有限元理论和计算流体力学软件,在FLUENT中导入力学分析得到非一致孔隙率的自定义函数(UDF).模拟结果表明:脊部下方GDL由于孔隙率的变化使得沿Y方向截面纵向气体的流速往双极板方向的递增;且孔隙率的非一致性导致脊部下方的气体浓度较流道下方降低、水含量增大,产生积水现象,这些变化将不利于燃料电池性能的保持.然后在验证函数准确性的同时探究了电池温度、湿度等参数随燃料电池电压的变化规律,并研究了燃料电池内部温度的变化.发现流道下方阴极侧电化学区域比阳极侧温度高,反映了实际燃料电池中阴极侧水堆积现象造成热的传输速度慢于阳极侧的实际情况. 展开更多
关键词 peMfC性能仿真 GDL变形 非-致孔隙率 自定义函数 电流密度
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