The Value of p21^(WAF1), p53 Protein and DNA Content in Large Intestine Cancer

目的 探讨 p2 1WAF1 蛋白和 p5 3蛋白在大肠癌发生发展中的作用及其临床意义。方法 对 4 1例大肠腺癌标本及 10例正常大肠粘膜标本 ,应用免疫组织化学S -P法检测细胞周期调控因子 p2 1WAF1 蛋白和突变型 p5 3蛋白 ,应用流式细胞术检测新鲜标本DNA含量。结果 p2 1WAF1 与 p5 3表达呈负相关 ;在正常大肠粘膜、高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌中 p5 3表达率逐渐增高 ,p2 1WAF1 表达率逐渐降低 ,SPF值逐渐升高 ;Dukes分期越晚 ,p2 1WAF1 表达率越低 ,p5 3表达率越高 ,SPF越高。结论 本实验证实了 p2 1WAF1 和 p5 3表达在肿瘤发生发展中起着调控点的作用 ;p2 1WAF1 、p5

Cyclin E、CDK_2和p21^(WAF1)在食管上皮癌变过程中的表达及意义

目的 探讨食管上皮癌变过程中细胞周期调控因子cyclin E、CDK2和p21WAF1的表达状况及其意义。方法 应用免疫组化SP法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织、31例非典型增生组织和17例正常食管粘膜中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA表达。应用半定量RT PCR和Western blot检测22例新鲜食管癌及相应癌旁组织的mRNA和蛋白表达。结果 从食管正常粘膜、非典型增生组织到癌组织,cyclin E和CDK2蛋白和mRNA阳性表达率逐渐上升,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。食管癌组织中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA高表达,与癌旁组织或切缘正常食管粘膜有显著性差异(P<0.01)。cyclin E、CDK2和p21WAF1 基因表达显著正相关(P<0.01 或P<0.05)。结论 食管上皮癌变过程中,细胞周期相关基因cyclin E和CDK2表达逐渐增强。cyclin E基因表达异常是食管癌变过程中的早期事件。p21WAF1 基因在食管癌中高表达,可能与细胞周期调控的反馈机制有关。

骨肉瘤P21^(WAF1)蛋白、PCNA与Ki-67的表达及其意义

目的 :研究骨肉瘤组织中P2 1WAF1 蛋白、增殖细胞核抗原 (PCNA)、Ki 6 7蛋白的表达 ,及其与骨肉瘤的发生、发展之间的关系及对预后的影响。方法 :用免疫组化LSAB法检测P2 1WAF1 蛋白、增殖细胞核抗原 (PCNA)、Ki 6 7蛋白在骨肉瘤中的表达。结果 :45例骨肉瘤中 ,P2 1WAF1 有 8例阳性表达 ,阳性率为 17.77% ;PCNA均有表达 ,阳性率为 10 0 % ;Ki 6 7有 2 7例阳性表达 ,阳性率为 6 0 %。结论 :P2 1WAF1 的低表达、PCNA、Ki 6 7的高表达 ,从一个侧面反映了骨肉瘤的恶性程度较高 ,检测P2 1WAF1 蛋白、增殖细胞核抗原 (PCNA)、Ki 6 7蛋白等多个指标可较全面反映骨肉瘤的恶性程度的高低及患者的预后情况。

宫颈鳞癌中p16、p21^(WAF1)、Rb、cyclinE蛋白的表达

目的 通过观察 p16、p2 1WAF1、Rb、cyclinE 4种细胞周期相关蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达 ,探讨它们在宫颈癌的细胞周期调控中的作用。方法 采用免疫组化EliVision二步法对 88例宫颈鳞癌组织 ,16例宫颈上皮内病变 (CIN)组织 ,15例宫颈炎组织进行 p16、p2 1WAF1、Rb、cyclinE 4种蛋白表达的检测。 结果 p16、p2 1WAF1、cyclinE在宫颈癌中的表达高于宫颈炎(P <0 0 5 ) ;Rb在宫颈癌的表达少于宫颈炎 (P <0 0 5 ) ;Rb与p16在宫颈癌中的表达呈负相关 (r =- 0 6 75 ,P <0 0 5 )。结论 宫颈癌细胞周期G1期中 ,由于Rb蛋白的缺失 ,使cyclinE表达升高 ,致使癌细胞增生 ;同时 ,p16、p2 1WAF1蛋白在宫颈癌中的表达增高 ,并失去抑制作用。

p53和p21^(WAF1/CIP1)基因在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的 探讨联合检测 p5 3和 p2 1蛋白表达与上皮性卵巢癌预后的关系。 方法 10 8例上皮性卵巢癌标本用于研究 ,每个标本同时用免疫组化的方法检测p5 3和 p2 1蛋白表达。 结果 p5 3( - )和 p5 3( +)患者的 5年生存率分别为 6 0 .4 7%和2 9 .4 3% ,差异有显著性 (P =0 .0 2 2 8)。p2 1( - )和 p2 1( +)患者的 5年生存率分别为 31.5 8%和 4 7.14 % ,差异有显著性 (P =0 .0 2 4 6 )。p5 3( - )而 p2 1( +)患者的预后明显优于其他患者 (P =0 .0 0 13)。多因素分析显示 p5 3、p2 1蛋白联合表达状态是判断上皮性卵巢癌预后的独立因子 .p5 3蛋白表达与p2 1蛋白表达呈负相关 (P =0 .0 0 0 3)。结论 联合检测 p5 3、p2 1蛋白表达在判断上皮性卵巢癌预后上的意义优于单纯检测p5 3或 p2 1蛋白表达 ,对临床有指导意义。

p21^(WAF1)基因多态性及其蛋白表达与乳腺癌组织学分级的关系

目的 探讨p2 1WAF1基因多态性及其蛋白表达与乳腺癌组织学分级的关系。方法 分别采用聚合酶链反应单链构象多态性技术 (PCR -SSCP)和免疫组织化学LSAB法检测 10 0例乳腺癌组织p2 1WAF1基因多态性和蛋白表达。结果 具有p2 1WAF1DNA多态性和无多态性的乳腺癌组织p2 1WAF1蛋白表达阳性分别为 18例 (10 0 % )和 32例 (39 0 % ) ,前者明显高于后者 (P <0 0 1) ;在乳腺癌组织腺管形成 1,2 ,3组中具有p2 1WAF1DNA多态性改变和蛋白阳性的病例数分别为 1(5 0 % ) ,6 (14 0 % ) ,11(2 9 7% )和 7(35 0 % ) ,2 0 (4 6 5 % ) ,2 3(6 2 2 % ) ;在细胞核多形性 1,2 ,3组中具有p2 1WAF1DNA多态性改变和蛋白阳性的病例数分别为 1(5 9% ) ,2 (4 8% ) ,15 (36 6 % )和 5 (2 9 4 % ) ,15(35 7% ) ,30 (73 2 % ) ;在组织学分级 1,2 ,3组中具有p2 1WAF1DNA多态性改变和蛋白阳性的病例数分别为 3(8 8% ) ,4 (8 7% ) ,11(5 5 0 % )和 14 (4 1 2 % ) ,2 1(4 5 7% ) ,15 (75 0 % ) ,在核分裂象计数 1(<5个 ) ,2 (5～ 10个 ) ,3(>11个 )组中p2 1WAF1蛋白阳性例数分别为 7(36 8% ) ,19(4 3 2 % )和 2 4 (6 4 8% )。以上各指标组间比较差异有显著性 ,p2 1WAF1DNA多态性与其蛋白表达呈正相关关系 (P均 <0 0 1)。

骨肉瘤中p53、p21^(WAF1)、cyclinA蛋白的表达及其意义

目的 探讨骨肉瘤中 p5 3、p2 1WAF1、cyclinA蛋白的表达及相互关系。 方法 应用免疫组化方法对骨肉瘤组织及正常软组织中p5 3、p2 1WAF1、cyclinA的蛋白表达进行检测。结果 正常软组织中p5 3表达均阴性 ,2 8% (14 / 5 0 )骨肉瘤中可检测到p5 3蛋白的异常积累 ;正常软组织中均有不同程度的 p2 1WAF1蛋白的阳性表达 ,5 2 % (2 6 / 5 0 )骨肉瘤 p2 1WAF1阴性 ,骨肉瘤中p2 1WAF1的蛋白表达表现为p5 3蛋白依赖性的方式 ;正常组织中cyclinA为阴性 ,75 6 % (2 8/ 37)骨肉瘤中存在cyclinA蛋白过表达 ,cyclinA与p2 1WAF1的表达呈负相关 (r=- 0 874 ,P <0 0 1) ;p2 1WAF1蛋白的表达与骨肉瘤的分化呈正相关 (r =0 6 87,P<0 0 1)。结论 p5 3蛋白的异常积聚、p2 1WAF1的失表达及cyclinA的过表达参与了骨肉瘤失控的增生及肿瘤的形成。

应用组织芯片技术观察HPV16/18相关外阴尖锐湿疣DNA倍体类型及cyclinD1、P53、P21^(WAF1)蛋白的表达

目的 : 探讨HPV16 18阳性的尖锐湿疣DNA倍体和cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 蛋白表达的改变。方法 : 使用组织芯片技术和DNA计算机图像分析方法观察 2 2 7例外阴尖锐湿疣和 2 1例外阴鳞状细胞癌的DNA倍体类型 ,并进行cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 免疫组化研究。结果 : HPV 16 18阳性外阴尖锐湿疣 2C细胞占 (4 4 .36± 6 .6 6 ) % ,3C～ 4C占 (37.72± 8.4 3) % ,5C占 (15 .2 1± 6 .33) % ,>5C占 (2 .71± 1.0 4 ) %。 98例HPV16 18阳性尖锐湿疣中 ,cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 阳性者分别为 39例 (39.80 % )、5 2例 (5 3.0 6 % )、4 7例(4 7.96 % )。HPV 16 18阳性外阴尖锐湿疣与阴性者差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 : HPV16 18阳性外阴尖锐湿疣DNA倍体图像分析显示高度增殖活性 ,cyclinD1、P5 3高表达 ,P2 1WAF1

胰腺癌组织中p21^(WAF1)的表达及其与临床病理因素的关系

目的 :研究p2 1WAF1在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌临床病理因素的关系 ,了解p2 1WAF1在胰腺癌进展中的作用。方法 :用免疫组织化学方法检测 30例胰腺癌患者癌组织中p2 1WAF1的表达 ,所有数据用卡方检验。结果 :30例中有 10例p2 1WAF1蛋白表达阴性 ,在中、低分化癌、淋巴结转移、血管侵犯和Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌中p2 1表达显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 :p2 1WAF1在胰腺癌中的表达下降与肿瘤的进展有关 ,可作为提示胰腺癌恶性程度的标志。

胆囊癌p53、p73和p21^(WAF1)蛋白的表达

目的探讨p53、p73和p21WAF1基因在胆囊癌中的表达。方法应用免疫组化SP法检测48例胆囊癌、32例癌旁组织、20例正常胆囊组织p53、p73和p21WAF1蛋白的表达,分析p73和p21WAF1相互关系。结果48例胆囊癌中,p53、p73和p21WAF1蛋白阳性表达率分别为56.2%、52.1%和43.8%,均高于癌旁组织和正常组织(P<0.01)。胆囊癌中p73蛋白的表达与Nevin分期有关(P<0.05),p21WAF1蛋白的表达与淋巴结转移、Nevin分期有关(P<0.05)。结论p53、p73和p21WAF1基因在胆囊癌高表达,提示三者在胆囊癌发生发展中起重要作用。胆囊癌中p73与p21WAF1表达无相关性。

HCV肝炎肝硬化中核心蛋白、p14^(ARF)和p21^(WAF1)的表达

目的 检测HCV肝炎、肝硬化组织中的核心蛋白、p14ARF、p21WAF1的表达及其相关性,探讨HCV核心蛋白对p14ARF、p21WAF1的表达作用。方法 收集HCV表达阳性的肝炎、肝硬化组织23例,采用免疫组织化学EnVision两步法检测HCV感染的肝炎、肝硬化组织的核心蛋白、p14ARF、p21WAF1的表达,并分析三者间的关系。结果 核心蛋白、p14ARF、p21WAF1的阳性表达主要定位于细胞核。在核心蛋白均阳性的组织中,p14ARF的阳性表达率为69.6%,p21WAF1表达率为13%;三组间的阳性强度比较,差异有显著性(P=0 .01),HCV核心蛋白与p14ARF、p21WAF1各组间的P值均<0. 01;HCV核心蛋白与p14ARF、p21WAF1阳性强度两者间相关性检验,相关系数rs分别为-0 .053、0 .45(P值分别为0 .72、0. 20),表明无相关性。结论 HCV核心蛋白对p14ARF、p21WAF1的表达有影响:可能间接促进p14ARF的表达,但抑制p21WAF1的表达。

P21^(WAF1/CIP1)、P16蛋白表达与人脑神经胶质瘤的相关分析

背景与目的:探讨P21WAF1/CIP1、P16两种抑癌基因与人脑神经胶质瘤恶性程度的关系。材料与方法:采用SABC免疫组织化学方法对98例人脑胶质瘤组织及12例正常脑组织标本中P21WAF1/CIP1和P16的表达进行检测,并进行相关分析。结果:P21WAF1/CIP1和P16阳性表达率在人脑胶质瘤中分别为58.16%和42.86%,与正常脑组织中的表达情况差异有统计学意义;P21WAF1/CIP1蛋白和P16蛋白阳性表达率均随着胶质瘤的恶性程度的增高而降低;P21WAF1/CIP1蛋白和P16蛋白可协同表达。结论:P21WAF1/CIP1与P16蛋白的阳性表达率及协同表达率可在一定程度上反映胶质瘤细胞的恶性生物学行为,可以作为一项判断其恶性程度的有效指标。

大肠肿瘤P21^(WAF1)、P53表达及其意义

目的 :探讨P2 1WAF1蛋白和P5 3蛋白在大肠癌发生发展中的作用及其临床意义。方法 :应用免疫组织化学S P法 ,对 4 1例大肠腺癌标本及 10例正常大肠粘膜的细胞周期调控因子P2 1WAF1蛋白和突变型P5 3蛋白进行了检测 ,应用流式细胞术检测了对应的大肠癌和正常大肠粘膜新鲜标本的DNA含量。结果 :P2 1WAF1与P5 3阳性表达率呈负相关 ;在正常大肠粘膜、高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌中P5 3阳性表达率逐渐增高 ,P2 1WAF1阳性表达率逐渐降低 ,SPF值逐渐升高 ;Dukes分期越晚 ,P2 1WAF1表达率越低 ,P5 3表达率越高 ,SPF越高。结论 :P2 1WAF1和P5 3表达在肿瘤发生发展中起着调控点的作用 ;P2 1WAF1、P5 3蛋白表达和DNA含量可以作为判断大肠癌预后的指标。

锰对HUVEC-304细胞生长及p53、p21^(WAF1/CIP1)蛋白表达的影响

目的探讨锰对人脐静脉内皮细胞系HUVEC-304细胞生长及p53、p21WAF1/CIP1蛋白表达的影响。方法取指数生长期HUVEC-304细胞,以100、200、400、800μmol/L MnCl2,分别作用24、48、72 h后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验检测细胞的存活力,筛选锰对细胞的毒性剂量。流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,Western blot方法检测p53、p21WAF1/CIP1蛋白的表达。结果100、200、400、800μmol/L MnCl2作用24、48、72 h均对HUVEC-304细胞有显著的抑制作用(P<0.05),且呈剂量-时间效应关系。流式细胞仪检测结果表明锰能诱导HUVEC-304细胞凋亡(P<0.01),Western blot结果显示,随锰浓度的增高,p53蛋白的表达下降(P<0.05);而p21WAF1/CIP1蛋白表达上升,差异有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论锰可抑制HUVEC-304细胞的增殖,诱导其发生凋亡,p53蛋白的表达减少及p21WAF1/CIP1蛋白的表达增加是其发生凋亡的机制之一。

Survivin蛋白在乳腺浸润性导管癌的表达及与p21^(WAF1)、p53的关系

目的研究survivin蛋白在乳腺癌的表达及与p21WAF1、p53的关系。方法免疫组化二步法(Envision)检测5例乳腺导管内癌及68例浸润性导管癌中单克隆抗体survivin、p21WAF1、p53蛋白的表达。结果survivin蛋白表达位于细胞浆内;在乳腺导管内癌表达率为40·00%(2/5),在乳腺浸润性导管癌表达率为64·71%(44/68),两者差异无统计学意义(P=0·261);survivin蛋白表达率在组织学Ⅱ~Ⅲ级乳腺癌中明显高于Ⅰ级(P=0·037),p21WAF1蛋白表达率为57·53%、p53蛋白表达率为52·05%,三种蛋白表达无相关性。结论survivin蛋白在乳腺癌发生的早期即起作用并持续于乳腺癌的浸润转移过程中,其表达可作为乳腺癌组织分化的参考指标。

人脑神经胶质瘤中p16、p21^(WAF1/CIP1)蛋白表达的研究

目的 探讨 p16、p2 1WAF1/CIP1两种抑癌基因与人脑神经胶质瘤恶性程度的关系。方法 采用SABC免疫组织化学方法对 6 4例人脑胶质瘤组织及 8例正常脑组织标本中p16和 p2 1WAF1/CIP1表达情况进行检测 ,并进行相关分析。结果 ①p16和 p2 1WAF1/CIP1阳性表达率在人脑胶质瘤中分别为 4 5 .3%和 6 4 .1%与正常脑组织中的表达情况差异显著 (P <0 0 5 ) ;②p16蛋白和 p2 1WAF1/CIP1蛋白阳性表达率均随着胶质瘤的恶性程度的增高而降低 ,差异显著 (P <0 0 1) ,且呈负相关关系 ;③p16蛋白和 p2 1WAF1/CIP1蛋白可协同表达 ,且在正常脑组织和脑胶质瘤各分级中 p16蛋白和 p2 1WAF1/CIP1蛋白协同表达率差异显著 (P <0 0 5 ) ,并呈负相关关系。结论 p16与p2 1WAF1/CIP1蛋白的阳性表达率及协同表达率可在一定程度上反映胶质瘤细胞的恶性程度 。

p53蛋白三维空间结构改变与甲状腺乳头状瘤p21^WAF1/CIP1蛋白定量表达关系的研究

目的:从结构分子生物学深度探讨p53蛋白三维空间结构改变与甲状腺乳头状癌(PTC)及甲状腺滤泡性腺瘤(TFA)中p21WAF1/CIP1蛋白定量表达的关系。方法:采用PCR-SSCP、DNA序列分析、计算机重构p53蛋白三维空间结构和有关分析软件、免疫组织化学和图像分析等技术进行研究。根据p53基因Exon5-8突变与否把PTC划分为Ⅰ组(p53基因突变组)和Ⅱ组(无p53基因突变组),再根据突变型p53蛋白三维构象改变的空间位点不同,把Ⅰ组分为ⅠA和ⅠB组。结果:Ⅱ组和ⅠA组的阳性细胞的平均积分光密度值(MOD)差异无统计学意义,两者均数差1.26,P>0.05。Ⅲ组(TFA组)和Ⅱ组、Ⅲ组和ⅠB组、Ⅲ组和ⅠA组之间,尤其是ⅠB组和ⅠA组之间的MOD的差异有统计学意义,均数差分别为12.57、25.80、13.84和-1.96,P<0.01。结论:p53蛋白空间构象的改变与p21WAF1/CIP1蛋白定量表达的变化之间存在着质变与量变的关系。

PSA启动子介导的TAT-p21^(WAF1/CIP1)融合蛋白在前列腺癌细胞中的特异表达及活性初探

目的:设计并构建含有前列腺组织特异性抗原(PSA)启动子的TAT-p21WAF1/CIP1融合蛋白真核表达载体(pPSA-TAT-p21),使由TAT蛋白转导结构域(TAT)介导的抑癌基因蛋白p21WAF1/CIP1(p21)能够在前列腺癌细胞中实现特异性的跨膜转运,增强p21对前列腺癌的抑制作用。方法:利用PCR技术构建含有PSA启动子、TAT蛋白转导序列和p21读码框架的真核表达载体pPSA-TAT-p21,并进行酶切、测序鉴定。脂质体法在前列腺癌LNCaP细胞和大肠癌HT-29细胞中转染上述表达载体及对照质粒后进行反转录PCR(RT-PCR),检测p21的mRNA以及蛋白在不同细胞中的表达情况。MTT法检测转染pPSA-TAT-p21后LNCaP细胞的增殖情况。结果:成功构建pPSA-TAT-p21真核表达载体。RT-PCR和Western blotting结果显示PSA-TAT-p21在前列腺癌细胞中有明显表达,在大肠癌细胞中基本不表达,呈现特异性的表达,而由CMV启动子介导的p21(pCMV-21)对照组在两个细胞株中均有表达。细胞增殖实验结果显示,含有TAT蛋白转导结构域的PSA-TAT-p21的融合蛋白对前列腺癌细胞增殖的抑制作用明显高于不含TAT的PSA-p21蛋白。结论:pPSA-TAT-p21能够在前列腺癌细胞中特异性地高效表达,为前列腺癌基因的靶向治疗提供了实验依据。

Bcl-2、Bax、P21-WAF1、P16-MTS1蛋白在胃腺癌演化系列中的表达

目的 通过对胃腺癌演化系列胃粘膜中Bcl 2、Bax、P2 1 WAF1、P16 MTS1蛋白的检测 ,探讨胃腺癌发生的机制及四种蛋白表达与胃腺癌生物学行为的关系。方法 1、利用免疫组化S P法检测胃癌演化系列胃粘膜中Bcl 2、Bax、P2 1 WAF1、P16 MTS1蛋白的表达 ;2、利用SPSS统计软件包作统计学分析处理。结果 在CSG、CAG、IM系列胃粘膜中Bax、Bcl 2表达先高后低 ,而P16 MTS1、P2 1 WAF1表达先低后高 ,(P <0 .0 5 )。高分化胃腺癌中Bcl 2、Bax、P2 1 WAF1、P16 MTS1表达较低分化者高 ;P16 MTS1表达在非贲门癌中比贲门癌中高 ,P2 1 WAF1表达在有淋巴结转移的胃腺癌中较低 (P<0 .0 5 )。结论 Bax、Bcl 2的高表达及P2 1 WAF1、P16 MTS1的表达受抑可能参与胃腺癌发生 ;四种蛋白异常表达均与胃腺癌分化呈正相关 ;P16 MTS1、P2 1 WAF1的表达异常与胃腺癌的发生部位及淋巴结转移相关。

P21^WAF1/CIP1、BaX蛋白在维吾尔族宫颈癌p53Arg72Pro不同基因型中的表达研究

目的初步探讨p53Arg72Pro不同基因型的生物学功能以及在新疆维吾尔族宫颈癌发生机制中的相关作用。方法采用免疫组化的方法检测110例维吾尔族宫颈癌和45例维吾尔族正常宫颈组织中p53基因第四外显子第72位密码子Arg／Pro（p53Arg72Pro）三种基因型Arg／Arg、Pro／Arg、Pro／Pro型中P21^WAF1/CIP1、Bax蛋白的表达。结果在维吾尔族宫颈癌组织中P21^WAF1/CIP1、Bax蛋白的阳性表达率均高于正常宫颈组织，其表达差异有统计学意义（P〈0．05），同时在p53Arg72Pro三种基因型中Pro／Pro型的Bax蛋白阳性高表达率最高66．67％（10／15），其表达差异有统计学意义（P〈0．05）。而P21^WAF1/CIP1蛋白阳性表达率在Arg／Arg型中最高58．5％（24／41），但其差异并无统计学意义（P〉0．05）。结论p53Arg72Pro三种基因型在诱导细胞凋亡、转录激活以及调节细胞周期方面可能存在差异，p53Arg72Pro多态性可能通过不同的机制引起宫颈癌的发生。