口腔鳞状细胞癌cyclin E及p21^waf1蛋白定量检测及意义

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(oralsquamous cell cancer,OSCC)cyclin E、p21waf1蛋白表达与抑癌基因p53突变的关系及其临床病理学意义。方法:采用流式细胞术(FCM)对8例正常口腔粘膜及30例OSCC石蜡包埋组织中cyclin E和p21waf1蛋白表达进行定量检测,分析其与突变型p53蛋白表达及临床病理学参数间的关系。结果:OSCC组织cyclinE蛋白平均表达量高于正常口腔粘膜(t=-6.582,P<0.01),过表达率为63.33%(19/30);而p21waf1蛋白平均表达量低于正常口腔粘膜(t=8.126,P<0.01),低表达率为53.33%(16/30);OSCC组织cyclinE/p21waf1比值高于正常口腔粘膜(t=-9.434,P<0.01),异常率为100%(30/30);p53阳性组p21waf1表达量低于p53阴性组(t=3.905,P<0.01),两者间呈负相关(r=-0.491,P<0.05)。p21waf1表达量在OSCC有淋巴结转移组低于无淋巴结转移组(t=3.391,P<0.01),但与OSCC分化无关(P>0.05);而cyclinE表达量与OSCC肿瘤分化及淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论:cyclinE蛋白表达上调及p21waf1蛋白表达下调是OSCC常见异常现象,p21waf1蛋白表达下调可能与p53突变有关,并与OSCC淋巴结转移密切相关,G1/S期正负调控因子cyclinE/p21waf1比例失衡在OSCC发生中可能起着重要作用。

p53蛋白三维空间结构改变与甲状腺乳头状瘤p21^WAF1/CIP1蛋白定量表达关系的研究

目的:从结构分子生物学深度探讨p53蛋白三维空间结构改变与甲状腺乳头状癌(PTC)及甲状腺滤泡性腺瘤(TFA)中p21WAF1/CIP1蛋白定量表达的关系。方法:采用PCR-SSCP、DNA序列分析、计算机重构p53蛋白三维空间结构和有关分析软件、免疫组织化学和图像分析等技术进行研究。根据p53基因Exon5-8突变与否把PTC划分为Ⅰ组(p53基因突变组)和Ⅱ组(无p53基因突变组),再根据突变型p53蛋白三维构象改变的空间位点不同,把Ⅰ组分为ⅠA和ⅠB组。结果:Ⅱ组和ⅠA组的阳性细胞的平均积分光密度值(MOD)差异无统计学意义,两者均数差1.26,P>0.05。Ⅲ组(TFA组)和Ⅱ组、Ⅲ组和ⅠB组、Ⅲ组和ⅠA组之间,尤其是ⅠB组和ⅠA组之间的MOD的差异有统计学意义,均数差分别为12.57、25.80、13.84和-1.96,P<0.01。结论:p53蛋白空间构象的改变与p21WAF1/CIP1蛋白定量表达的变化之间存在着质变与量变的关系。

肾细胞癌中cyclin D1、cyclinE和p21^(cip1)的mRNA表达

目的 探讨细胞周期素D 1、E(cyclinD1、cyclinE)、p2 1cip1在pTNMⅠ期普通型肾细胞癌 (CRCC )发生发展中的作用。方法 用半定量RT PCR方法 ,检测 2 3例 pTNMⅠ期CRCC组织和 7例正常肾组织中cyclinD 1、cyclinE及 p2 1cip1的mR NA含量 ;用免疫组化方法检测CRCC中 p5 3及ki 67的表达 ;并将以上指标与临床病理特征进行统计分析。 结果 CRCC组织中cyclinD1、cyclinE、p2 1cip1mRNA含量分别为 0 .484± 0 .416、0 .472± 0 .3 40、0 .3 5 6± 0 .2 15 ,均高于正常对照组 ( 0 .0 78± 0 .0 5 1,P <0 .0 1;0 .0 63± 0 .0 63 ,P <0 .0 1;0 .178± 0 .114 ,P <0 .0 5 ) ;CyclinD1含量低者肿瘤直径小于 3cm (P <0 .0 1) ;CyclinE含量低者肿瘤常有坏死 (P <0 .0 5 ) ,细胞核分级较高 (P <0 .0 1) ;p2 1cip1低表达者细胞核分级较高 (P <0 .0 5 ) ;p2 1cip1与cyclinE呈正相关 (γ =0 .60 2 ,P <0 .0 1)。结论 pTNMⅠ期CRCC组织中cyclinD1、cyclinE、p2 1cip1mRNA含量升高 。

P21^WAF1/CIP1、BaX蛋白在维吾尔族宫颈癌p53Arg72Pro不同基因型中的表达研究

目的初步探讨p53Arg72Pro不同基因型的生物学功能以及在新疆维吾尔族宫颈癌发生机制中的相关作用。方法采用免疫组化的方法检测110例维吾尔族宫颈癌和45例维吾尔族正常宫颈组织中p53基因第四外显子第72位密码子Arg／Pro（p53Arg72Pro）三种基因型Arg／Arg、Pro／Arg、Pro／Pro型中P21^WAF1/CIP1、Bax蛋白的表达。结果在维吾尔族宫颈癌组织中P21^WAF1/CIP1、Bax蛋白的阳性表达率均高于正常宫颈组织，其表达差异有统计学意义（P〈0．05），同时在p53Arg72Pro三种基因型中Pro／Pro型的Bax蛋白阳性高表达率最高66．67％（10／15），其表达差异有统计学意义（P〈0．05）。而P21^WAF1/CIP1蛋白阳性表达率在Arg／Arg型中最高58．5％（24／41），但其差异并无统计学意义（P〉0．05）。结论p53Arg72Pro三种基因型在诱导细胞凋亡、转录激活以及调节细胞周期方面可能存在差异，p53Arg72Pro多态性可能通过不同的机制引起宫颈癌的发生。

骨肉瘤p21^(WAF1/CIP1)基因DNA序列分析及其mRNA、p21蛋白表达

【目的】通过检测骨肉瘤组织中p21WAF1/CIP1基因的表达及其DNA序列变化,探讨它们与骨肉瘤生物学特性之间的关系及其对预后的评价。【方法】采用原位杂交及免疫组化法检测45例人骨肉瘤p21WAF1/CIP1基因mRNA及p21蛋白的表达。采用PCR-SSCP方法检测骨肉瘤p21WAF1/CIP1基因DNA变化。采用双脱氧核苷酸末端终止法进行DNA的直接测序。【结果】①p21蛋白表达阳性率在骨肉瘤中为18%(8/45);②p21WAF1/CIP1基因mRNA表达阳性率在骨肉瘤中为42%(19/45);③DNA序列分析结果显示,骨肉瘤中p21WAF1/CIP1基因第三外显子(exon3)的cDNA全长序列的609位碱基处发生C→T改变,发生率为47%(17/36)。exon2a的cDNA全长序列的187位、303位碱基处发生G→T改变,发生率为6%(2/36)。exon2b的cDNA全长序列的522位碱基处发生G→A改变,发生率为2.7%(1/36)。【结论】①随着骨肿瘤恶性度的升高,p21WAF1/CIP1基因mRNA及p21蛋白的表达下降。②p21WAF1/CIP1基因mRNA在骨肉瘤中的表达对预后有影响。③本实验对中国人群骨肉瘤p21WAF1/CIP1基因DNA多态性位点进行了新的定位,这些位点可能会对今后对该基因的研究提供有意义的参考。

p53、p21^WAF1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 检测原发性非小细胞肺癌中ｐ５３、ｐ２１＾ＷＡＦ１蛋白表达与临床病理及预后的相关性。方法 应用免疫组织化学（ＳＰ法）方法。结果 共检测非小细胞肺癌１４７例，其中鳞癌６３例，腺癌６６例，腺鳞癌１４例，大细胞癌４例。ｐ５３蛋白总阳性率为６１．２％（９０／１４７），鳞癌阳性率为６３．５％（４０／６３），腺癌为５７．６％（３８／６６），腺鳞癌为７１．４％（１０／１４），大细胞癌２例阳性。ｐ２１＾ＷＡＦ１蛋白总阳性率为４０．１％（５９／１４７），鳞癌为４１．３％（２６／６３），腺癌为４２．４％（２８／６６），腺鳞癌２８．６％（４／１４），大细胞癌１例阳性。肺腺癌ｐ５３蛋白阳性表达与其预后相关，６６例腺癌中，生存率低于３年组和高于３年组的ｐ５３蛋白阳性率分别为７５％（２１／２８）和４４．７％（１７／３８）。

放疗后脑恶性胶质瘤细胞内p53和p21^WAF1蛋白的表达

目的 探讨放射治疗后脑恶性胶质瘤细胞内p53蛋白及其下游靶基因p21^WAF1和Eax表达的变化与内源性细胞内p53状态的关系。方法 Wertern Blot测定在放疗后不同时间点时两种人恶性胶质瘤细胞株：U87MG(野生型p53)和T98G(突变型p53)内p53、p21^WAF1和Bax蛋白的表达，应用密度测定仪对表达的蛋白进行半定量分析。结果 照射后2h，U87MG细胞内p53蛋白水平较照射前增加6倍，在24h内保持稳定，随后3d内继续增加。而p53下游靶基因p21^WAF1蛋白被p53转录激活后6h开始增加，在12h大约是基线的10倍，随后其进一步增加。而在T98G细胞中放疗后p53蛋白表达无明显改变，在放疗后72h内没有观察到p21^WAF1的表达。这两个细胞株中，Bax蛋白表达在放疗后均没有明显变化。结论放疗后恶性胶质瘤细胞内p53蛋白和其靶蛋白的激活和积聚取决于其内源性细胞内p53的状态。而Bax水平没有变化表明放射诱导的细胞凋亡并不需要bcl—2家族中该成员的参与。

人P21^WAF1/CIP1启动子荧光素酶真核表达载体的构建

目的:构建含人P21WAF1/CIP1基因启动子的表达载体pGL3-P21p。方法:以全血总RNA为模板,经RT-PCR扩增P21WAF1/CIP1基因启动子,并将其克隆到T-easy载体,测序分析,然后经酶切再克隆到pGL3-basic,构成重组真核表达载体pGL3-P21p。将pGL3-P21p转染到乳腺癌细胞株MCF7中,并检测细胞中荧光素酶的活性。结果:经测序、酶切等检测证实重组真核表达载体pGL3-P21p构建成功,荧光素酶活性检测显示P21WAF1/CIP1基因启动子对荧光酶基因表达起到了正调控作用。结论:P21WAF1/CIP1启动子荧光素酶真核表达载体的成功构建为进一步研究P21WAF1/CIP1基因启动子的表达调控奠定了基础。

脑星形胶质细胞瘤组织P21^(WAF1/CIP1)mRNA的表达与p53基因突变的关系

目的：探讨脑星形胶质细胞瘤组织Ｐ２１^(WAF1/CIP1) ｍＢＮＡ的表达与p^(53)基因突变的关系及其意义。方法：应用 ＲＴ－ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３８ 例新鲜脑星形胶质细胞瘤组织中上述两种基因进行研究。结果：p^(53)基因在脑星形胶质细胞瘤组织中的突变率为２８．９％（１１／３８），且在Ⅲ、Ⅳ级肿瘤突变率显著高于Ⅰ～Ⅱ级者（Ｐ＜０.０５）；Ｐ２１^(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ在Ⅲ，Ⅳ级中的表达显著低于Ⅰ～Ⅱ级肿瘤组织（Ｐ＜０．０１）；１１例p^(53)基因突变组中，Ｐ２１^(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ表达阳性率明显低于２７例p^(53)基因未突变组（Ｐ＜０．０５）。结论：脑星形胶质细胞瘤组织中Ｐ２１^(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ的低表达可能与p^(53)基因突变有关。

P53和P21^WAF1/CIP1蛋白与上皮性卵巢癌预后关系的探讨

目的探讨P53和P21蛋白表达与上皮性卵巢癌预后的关系。方法108例上皮性卵巢癌标本用于研究，用免疫组化的方法检测P53和P21蛋白表达。结果P53（10w）和P53（high）病人的5a生存率分别为60．47％和29．43％，差异有显著性（P=0．0228）。P21（10w）和P21（high）病人的5a生存率分别为31．58％和47．14％，差异有显著性（P=0．0246）。P53（10w）并且P21（high）病人的预后明显优于其他病人（P=0．0013）。P53蛋白表达与P21蛋白表达呈负相关（P=0．0003）。多因素分析显示P53、P21蛋白联合分析是判断上皮性卵巢癌预后的独立因子。结论联合分析P53、P21蛋白表达在判断上皮性卵巢癌预后上的意义优于单纯检测P53或P21蛋白表达，对临床有指导意义。

胃癌及癌前病变中p16、p21^(WAF1)、CDK4、cyclinD1蛋白的表达及其意义

目的:探讨胃癌及癌前病变中p16、p21WAF1、CDK4和cyclinD1蛋白的表达、相互关系及其意义。方法:应用免疫组化SP法检测胃癌、不典型增生、慢性浅表性胃炎及正常胃组织中p16、p21WAF1、CDK4和cyclinD1蛋白的表达情况。结果:胃癌中p16和p21WAF1蛋白表达率分别为:52.7%、30.9%,显著低于慢性浅表性胃炎和不典型增生(P<0.01),而CDK4和cyclinD1蛋白表达率分别为:61.8%、47.3%,均明显高于正常胃组织和慢性浅表性胃炎,差异有显著性(P<0.01),但胃癌和不典型增生组织中CDK4和cyclinD1蛋白表达率之间差异无显著性(P>0.05)。胃癌中p16与cyclinD1蛋白表达呈负相关关系(P<0.05),而CDK4与cyclinD1呈正相关关系(P<0.01)。结论:胃癌发生机制涉及p16、p21WAF1、CDK4和cyclinD1调节通路中多个基因的异常,且与胃癌Lauren分型、浸润深度、淋巴结转移有关。CDK4和cyclinD1蛋白高表达可能是胃癌发生过程中的早期分子事件。

鼻咽癌p53 p21^(WAF1)和MDM2蛋白异常表达的临床意义

目的:探讨p53、p21WAF1、MDM2蛋白在原发鼻咽癌(NPC)异常表达的临床意义。方法:采用LSAB法检测69例原发NPC组织中p53、p21WAF1和MDM2蛋白的表达状况。结果:1)p53、p21WAF1和MDM2蛋白在原发NPC组织的阳性表达率分别为79.7%、84.1%、和82.6%;高表达率分别为50.7%、46.4%和31.9%。2)p53蛋白的高表达率随TNM分期的升高而增多,P=0.042。3)p53或MDM2蛋白高表达者的复发间期显著短于相应蛋白低表达/阴性者,分别P=0.038和P=0.002。4)p53和MDM2蛋白同时高表达者、MDM2蛋白高表达同时p21WAF1蛋白低表达/阴性者的复发间期明显短于对照组,分别P<0.001;p21WAF1蛋白高表达同时p53蛋白低表达/阴性者、p53和MDM2蛋白同时低表达/阴性者的复发间期显著长于对照组,分别P=0.002和P=0.014。5)p53和MDM2蛋白高表达同时p21WAF1蛋白低表达/阴性者的复发间期明显短于对照组,P<0.001;p53和MDM2蛋白低表达阴性同时p21WAF1蛋白高表达者的复发间期明显长于对照组,P=0.002。结论:p53或MDM2蛋白高表达提示有促进NPC复发的作用,p21WAF1蛋白高表达提示有抑制NPC复发的作用。单独检测p53或MDM2蛋白在原发NPC组织的表达情况可以作为预测NPC复发倾向和临床预后的参考指标;如同时检测p53、MDM2和p21WAF1蛋白的两项或三项指标,预测意义更理想。

DNA损伤生物学反应中ATM对p21^(WAF1/CIP1)蛋白的直接磷酸化

毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白 (mutatedinataxiatelangiectasia ,ATM)是直接感受DNA双链断裂损伤并起始诸多DNA损伤信号反应通路的主开关分子 .已有研究发现 ,DNA损伤生物学反应中 ,ATM可通过磷酸化活化p5 3,继而转录活化细胞周期检查点蛋白p2 1WAF1 CIP1的表达 ,而对于ATM是否直接参与p2 1WAF1 CIP1的早期活化迄今尚无实验证明 .通过免疫共沉淀反应 ,检测到细胞电离辐射 (ionizingradiation ,IR)反应早期ATM与p2 1WAF1 CIP1蛋白存在相互作用 .将p2 1WAF1 CIP1蛋白编码基因全长克隆入原核表达载体pGEX4T 2 ,经诱导表达及亲和层析纯化获取GST p2 1融合蛋白作为磷酸化底物 .体外磷酸化实验检测证明 ,IR活化的ATM具磷酸化p2 1WAF1 CIP1蛋白的功能 ,并且此磷酸化功能可被PI3K家族特异性抑制剂Wortmannin所抑制 .结果揭示了IR后ATM可通过直接磷酸化p2 1WAF1 CIP1蛋白 ,在IR致DNA损伤生物学反应早期调控p2 1WAF1

胃癌中p21^(WAF1)与p53基因的相关性研究

目的 探讨胃癌中 p2 1WAF 1与 p5 3基因的关系。方法 采用 S- P法检测 p2 1WAF 1和 p5 3在胃癌中的表达。结果 p2 1与 p5 3在正常胃黏膜、不典型增生、胃癌中的阳性表达率分别为 10 0 .0 %与 0 %、92 .5 %与 15 .0 %、39.8%与 5 6 .5 % ;40例不典型增生 ,p5 3阳性而 p2 1阴性者为 5 .0 % ,p5 3阴性而 p2 1阳性为 82 .5 % (P<0 .0 5 ) ;p2 1、p5 3阳性高分化腺癌各为 6 3.3%与 36 .7% ,与低分化腺癌 32 .7%与 78.2 %比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;48.1%的胃癌 p2 1、p5 3蛋白表达相反 (P>0 .0 5 ) ;p2 1表达在侵犯浅肌层为 6 0 .0 %显著高于深肌层的 35 .2 % (P<0 .0 5 ) ;p2 1、p5 3在原发与转移癌中一致表达为 35 .3%与 70 .6 % ,皆与未转移癌 6 2 .5 %与 42 .5 %有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;p2 1在 TNM 期 6 0 .0 %、 期 5 6 .2 %显著高于 期 2 7.8%、 期 2 2 .2 % (P<0 .0 5 )。结论 正常胃黏膜和不典型增生 p2 1蛋白表达大部分依赖 p5 3蛋白 ,而胃癌在相当程度上不依赖。p2 1失表达和 p5 3异常表达与胃癌发生、分化程度、转移有关 ,而 p2 1失表达还与侵袭。

食管癌变过程中p53、BrdU、P21^(waf1)和PCNA蛋白表达的变化

目的:探讨食管癌及癌前病变组织中p53、P21^(waf1)、PCNA及S期细胞标记指数(BrdU)表达的变化。方法:采用免疫组化ABC法对食管癌高发区无症状食管活检组织179例(正常上皮31例,基底细胞过度增生(BCH)117例,不典型增生(DYS)31例)、食管癌手术切除标本26例以及同一个体食管癌手术标本37例及相应癌旁组织中(正常上皮7例,BCH29例,DYS23例)p53、PCNA、BrdU和P21^(waf1)进行检测。结果:不同个体和同一个体病理形态学相似的食管正常、各级癌前病变和癌组织中p53、P21^(waf1)、PCNA和BrdU蛋白表达变化相似。随病变程度加重,PCNA、p53和BrdU阳性细胞数均呈上升趋势,但P21^(waf1)呈下降趋势(P<0.05)。BrdU阳性表达与食管癌患者的年龄、性别、分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移均无关(P>0.05)。p53蛋白表达与食管癌患者淋巴结转移有关(P<0.05),与其他指标无关;P21^(waf1)的表达与细胞分化程度有关(P<0.05);PCNA的表达与细胞分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:不同个体和同一个体食管癌变过程中存在相似的分子变化。在食管癌变过程中p53蛋白可能起重要的促进细胞增生的作用;P21^(waf1)可能是一个重要的保护因子。

子宫颈癌中Plk1和Cyclin B1、p21^(WAF1)的表达及其临床意义

目的探讨Plk1(polo-like kinase1)和Cyclin B1、p21WAF1在子宫颈癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法利用组织芯片技术,结合免疫组化Eli Vision法对102例子宫颈癌、20例子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、20例正常子宫颈组织中Plk1和Cyclin B1、p21WAF1的表达进行检测,并分析相关数据。结果 Plk1在子宫颈癌、CIN中的阳性率分别为70.5%、55.0%,明显高于正常子宫颈组织(10%),差异有统计学意义(P<0.01)。Cyclin B1在子宫颈癌、CIN中的阳性率分别为52.9%,30.0%,明显高于正常子宫颈组织(10.0%),差异有统计学意义(P<0.01)。p21WAF1在子宫颈癌、CIN中的阳性率分别为23.5%、10.0%,明显高于正常子宫颈组织(0),差异有统计学意义(P<0.05)。Plk1、Cyclin B1和p21WAF1在子宫颈癌、CIN中的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。Plk1表达与子宫颈癌间质浸润深度相关(P<0.05)。Cyclin B1表达与子宫颈癌间质浸润深度及淋巴结转移相关(P<0.05)。p21WAF1在子宫颈癌中的表达与组织学分级相关(P<0.01)。组织学分级低的子宫颈癌中p21WAF1阳性率高。Plk1和Cyclin B1在子宫颈癌中的表达呈正相关(rs=0.297,P=0.002)。Plk1和p21WAF1在子宫颈癌中的表达呈负相关(rs=-0.403,P<0.001)。结论 Plk1、Cyclin B1和p21WAF1的表达与子宫颈癌的发生、发展相关,且前两者与子宫颈癌预后相关,三者联合检测有可能成为子宫颈癌临床治疗的新靶点。

利用组织芯片研究p21^(WAF1/CIP1)和Rb基因在肝细胞肝癌中的表达

目的:利用组织芯片研究肝细胞肝癌(hepatocelluarcarcinoma,HCC)中p21WAF1/CIP1简称p21、Rb蛋白的表达及两者的关系。方法:建立含40例HCC肿瘤组织及其相应癌旁、远癌正常组织共120个微组织的组织芯片,应用免疫组织化学技术(SP法)检测HCC肿瘤、癌旁、远癌正常组织中p21、Rb蛋白的表达情况。结果:p21蛋白缺失率在HCC肿瘤组织中为27.5%,显著高于癌旁及远癌正常肝组织(P<0.05),并与HCC的组织学分级相关(P<0.05);Rb蛋白缺失率在HCC肿瘤组织中为42.5%,显著高于癌旁和远癌正常肝组织P<0.05,但与HCC肿瘤的大小和组织学分级均无统计学相关性(P>0.05)。HCC肿瘤组织中p21与Rb的表达呈负相关P<0.05。结论:p21、Rb蛋白表达缺失可能与HCC的发生有密切联系,p21与Rb基因在HCC中可能通过负反馈机制相互调节。组织芯片是可高效进行肿瘤分子病理研究的技术平台。

Notch1、P21^(WAF1)和Involucrin在鼻咽癌组织中的表达及意义

背景与目的:Notch1受体蛋白的异常表达常见于多种原发性肿瘤,但它与鼻咽癌的关系仍不清楚。本研究拟探讨鼻咽癌组织中Notch1受体蛋白、其下游蛋白P21WAF1和Involucrin蛋白的表达,以及它们与鼻咽癌分化程度的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测101例鼻咽癌组织和20例鼻咽慢性炎症组织中Notch1﹑P21WAF1和Involucrin蛋白的表达。结果:20例鼻咽慢性炎症组织中Notch1、P21WAF1和Involucrin蛋白表达率分别为100%(20/20)、90.0%(18/20)、100%(20/20);鼻咽癌组织中Notch1、P21WAF1和Involucrin蛋白的表达率分别为77.2%(78/101)、89.1%(90/101)和80.1%(81/101);三者在不同组织类型鼻咽癌组织中的表达均有显著差异,随着分化程度的下降表达明显减弱,分别为P=0.000,P=0.026和P=0.000;并且在角化性鳞状细胞癌、分化型非角化癌和未分化癌之间两两比较,表达均有显著差异,分别P<0.05;Notch1的表达水平分别与P21WAF1和Involucrin的表达水平正相关,P=0.002和P=0.001;而P21WAF1与Involucrin的表达水平无明显的相关。结论:鼻咽癌组织中Notch1、P21WAF1和Involucrin的表达与鼻咽癌细胞分化程度密切相关。

乙型肝炎病毒X基因经p53依赖性与非依赖性途径对p21^(WAF1)表达的影响

背景与目的研究表明,在不同情况下乙型肝炎病毒X基因(HBx)对p21WAF1的表达具有不同的影响,但作用机制仍不清楚。本研究的目的是探讨HBx对p53下游基因p21WAF1的影响。方法通过正、反义野生型p53(wtp53)与HBx单转染及共转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,以及HBx转染不同内源性p53状态的肝癌细胞株,检测p21WAF1启动子荧光素酶基因表达,并用流式细胞仪观察细胞周期的变化,Westernblot法比较p53、p21WAF1表达水平的变化。结果正、反义wtp53与HBx单转染及共转染SMMC-7721细胞,HBx与正义wtp53共转染组(1.007±0.098)与单转染正义wtp53(0.490±0.012)相比,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显升高(P<0.05),其余各组HBx均可导致p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显减少(P<0.05)。Westernblot法表明HBx可导致p53的表达增加,但p53表达较低的SMMC-7721细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达减弱,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达(0.053±0.010)也较对照组(0.094±0.013)明显减少(P<0.05),而p53表达较强的HepG2细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达增强、p21WAF1启动子荧光素酶基因的表达(1.252±0.052)较对照组明显升高(0.767±0.031)(P<0.05)。细胞周期结果表明瞬时转染HBx的SMMC-7721和Hep3B细胞停滞在G0-G1期细胞数(42.31%、36.96%