大鼠坐骨神经损伤后嘌呤P2Y4受体表达变化的实验研究

目的:观察嘌呤P2Y4受体在大鼠坐骨神经损伤后脊髓、背根神经节及坐骨神经中表达的变化规律,初步探讨三磷酸腺苷/三磷酸鸟苷(ATP/UTP)在周围神经再生中的作用机理。方法:42只SD大鼠随机分为正常组(6只),对照组(6只)和实验组(30只),实验组大鼠制成一侧坐骨神经切断修复模型,分别于术后1d,1、2、3、4周切取坐骨神经近远断端各5mm、腰膨大部位脊髓以及对应损伤侧背根神经节,以β-肌动蛋白作为内参对照,应用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察P2Y4 mRNA表达的变化规律。对照组大鼠只做切口不做手术,正常组大鼠取材作为正常对照,并对RT-PCR产物进行序列测定。结果:在正常组及对照组脊髓及坐骨神经有P2Y4 mRNA的表达,背根神经节则无表达。坐骨神经切断后,吻合口远端P2Y4 mRNA的表达逐渐增加,近端则逐渐降低;脊髓内表达2周达高峰,4周恢复正常;在背根神经节,术后1、2、3周出现弱阳性,4周时表达消失。结论:ATP/UTP通过P2Y4受体参与了周围神经损伤后的病理生理改变,在周围神经损伤后的修复过程中起一定作用。

脊髓损伤致大鼠神经源性膀胱尿动力学变化及P2Y4的表达意义

目的探讨大鼠不同平面脊髓损伤(SCI)后神经源性膀胱尿动力学变化及P2Y4的表达意义。方法健康成年SD大鼠50只,雌雄不限,体重180-220g,随机分对照组、骶髓损伤组、骶上脊髓损伤组。建立神经源性膀胱大鼠模型。28d后,进行尿动力学检测。尿动力检测完毕后,取标本用免疫组化法检测P2Y4表达情况。结果逼尿肌漏尿点压力在骶上脊髓损伤组较对照组、骶髄损伤组升高明显;逼尿肌漏尿点压在骶髄损伤组较对照组明显下降。P2Y4在骶上脊髓损伤组的表达较对照组、骶髓损伤组升高明显;P2Y4在骶髓损伤组表达较对照组明显降低。结论大鼠骶上脊髓损伤后,逼尿肌表现为反射亢进,大鼠骶髓损伤后逼尿肌表现为反射减弱。膀胱逼尿肌中P2Y4表达增高可能是引起逼尿肌反射亢进机制之一。

P2Y4受体在面神经损伤后再生过程中的作用

目的探讨嘌呤能P2Y4受体在面神经损伤后再生过程中对面肌功能恢复的作用。方法 30只健康成年雄性SD大鼠随机分为0.9%生理盐水对照组、P2Y4受体激动剂组和P2Y4受体拮抗剂组,每组10只。在手术显微镜下切断各组大鼠右侧面神经主干后,以Neurolac可吸收共聚高分子外周神经套接管桥接形成神经再生室,同时采用ALZET植入式胶囊渗透压泵分别给予生理盐水(对照组)、P2Y4受体激动剂(激动剂组)和P2Y4受体拮抗剂(拮抗剂组);左侧面神经作为正常对照侧,不做手术处理。术后6周观察各组动物面肌运动恢复情况;采用诱发肌电图检测面肌动作电位的最大幅度、潜伏期;通过面肌Masson染色观察单位面积内的肌纤维数目和平均直径;采用神经干甲苯胺蓝染色观察面神经远心端主干有髓神经纤维的数目。结果各组大鼠术后即出现右侧面瘫,术后6周时面肌功能均有不同程度的恢复,但均无法恢复至正常水平;对照组、激动剂组和拮抗剂组面肌诱发电位最大振幅分别恢复到正常水平的70.6%、84.2%、54.1%;单位面积内面肌纤维数目分别为正常对照侧的72.7%、85.7%、54.7%;面肌纤维平均直径分别为正常对照侧的69.5%、86.0%、和53.3%;单位面积内有髓神经纤维数目分别为正常对照侧的72.9%、83.6%和56.9%;与正常对照侧比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。但P2Y4受体激动剂组面肌功能及面神经、面肌形态检测指标均较生理盐水对照组恢复更好,而P2Y4受体拮抗组的恢复程度则明显差于生理盐水对照组和P2Y4受体激动剂组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论激活嘌呤能P2Y4受体能明显促进受损的面神经再生,从而促进面肌功能恢复。

大鼠嘌呤P2Y4受体在神经系统中表达的实验研究

目的 研究P2Y4受体在成鼠脊髓,脊神经节及坐骨神经的表达及分布情况,为研究ATP/UTP对周围神经再生的作用机制提供理论基础。方法 取成鼠脊髓、脊神经节及坐骨神经(SD大鼠,雌雄不拘),采用原位杂交和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,观察嘌呤P2Y4受体的分布与表达,并对RT-PCR的结果进行测序。结果 原位杂交与RT-PCR结果显示,脊髓灰质有P2Y4R的表达,主要分布在中央管上皮细胞和前角,运动神经元呈强阳性,白质中为阴性。坐骨神经也可见到P2Y4受体的表达,主要分布在雪旺细胞及其内的血管内皮细胞。脊神经节则没有P2Y4受体的表达。结论 大鼠的P2Y4受体可能主要分布在输出纤维,在感觉神经原纤维几乎无表达。

尿源干细胞促进脊髓损伤后神经源性膀胱恢复

目的观察大鼠神经源性膀胱模型功能和组织学变化,探索尿源干细胞对大鼠神经源性膀胱的修复治疗作用。方法 45只健康清洁的正常SD大鼠按照完全随机法分为正常组、损伤组、干细胞组,每组15只。治疗组建模7 d后,尾静脉注射尿源性干细胞。28 d后,尿动力学检测大鼠尿动力各项指标,肌条实验观察膀胱收缩情况,Western blot观察P2Y4在膀胱中的表达,TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果干细胞组大鼠膀胱湿质量(0.31±0.01)g和膀胱湿质量/体质量值(1.19±0.41)、尿动力指标[收缩时间(112.75±16.52)s、离体膀胱逼尿肌肌条指标[收缩时间(16.47±2.29)s]、膀胱肌细胞凋亡率(28.22±11.08)%均优于损伤组[膀胱湿质量(0.66±0.07)g,膀胱湿质量/体质量值(2.30±0.26),尿动力指标:收缩时间(59.00±5.68)s,离体膀胱逼尿肌肌条指标:收缩时间(19.80±3.77)s,膀胱肌细胞凋亡率(59.80±14.18)%]。Western blot检测结果显示干细胞组的蛋白P2Y4的表达低于损伤组。结论尿源干细胞可促进脊髓损伤后大鼠神经源性膀胱的功能恢复。

Y2P4O13:Eu^3+荧光材料的制备及其性能

采用湿化学法制备了Eu^3+掺杂Y2P4O13荧光材料,通过X射线粉末衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和荧光光谱(FL)等手段表征制备产物的物相结构、荧光性能,并对合成原料中稀土与磷的比例(n(Y+Eu)/n(P))和pH调节剂种类对制备样品的物相结构及性能的影响进行分析。结果表明:合成原料中n(Y+Eu)/n(P)比值和pH调节剂种类直接影响着制备产物的物相结构与性能。在n(Y+Eu)/n(P)=12.1、以NH4HCO3为pH调节剂调节pH为6的条件下可获得正交晶系的Eu^3+掺杂Y2P4O13荧光材料。所制备的Y2P4O13:2at%Eu^3+荧光材料在395nm光的激发下可发射出橙红光。